1、
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2、ourth level,Fifth level,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,关于苹果树腐烂菌的研
3、究,报告人：王娟娟,实验展望及目的,实验材料及仪器,实验方法及步骤,实验预期结果,2,苹果树腐烂病,(apple tree,valsa,canker),是我国各苹果产区普遍发生且为害严重的病害，由多种,Cytospora,spp,引起。但由于我国病原菌的种类及其致病性分化情况至今尚不清楚，严重影响了人们对病害发生和流行规律的认识，制约了对病害预测、预报和寄主抗病性的研究，,致使病害,防治缺乏相应对策,。,因此，本文选用在,PDA,上培养性状差异明显的,若干,株腐烂病菌,分离株为对象，对其生物学特性与致病性的关系进行了研究。,实验目的,3,实验材料及仪器,PDA,培养基,LB,培养基 牛肉膏蛋白
4、胨 培养基腐烂的苹果枝 健康的苹果枝 摇床,4,致病菌的筛选,1,l,病原菌的鉴定,2,分离菌的回接及致病性测定,教学过程,致病菌的再分离,拮抗菌的筛选,5,致病菌的筛选,灭菌培养皿，置于湿纱布上，用无菌操作法向培养皿中加入,25,乳酸,12,滴，,然后将冷却至,50,左右的,PDA,培养基倒入培养皿中，每皿倒,1015ml,，轻轻摇动,成为平面。取采集到的苹果腐烂病病组织，选择典型单个病斑，用剪刀从病斑边缘,(,病健交界处,),剪取小块病组织数块，放入,70,酒精浸,3s,，移入,O,1,升汞液中进行表,面消毒，放入灭菌水中漂洗,5,次，除去残留的消毒剂。将病组织移至,PDA,平板培养基上，
5、每皿,4,块。重复多次，筛出纯菌。,6,病原菌的鉴定,将获得致病菌纯培养物分别移植在,PDA,、苹果树枝条汁培养基，,28,恒温培,养。每隔,3d,观察一次菌落培养性状，色泽测定菌落生长速度，并在低倍显微镜观察真菌菌丝，进行初步判定。,7,致病菌的再分离,采用常规组织分离法从接种发病 枝条分离致病菌，在,PDA,培养基平板上获得纯培养，并与原接种致病菌进行比较,8,分离菌的回接及致病性测定,ThemeGallery,is a Design Digital Content&Contents mall developed by Guild Design Inc.,第一步，选取技条：分别取
6、苹果无病,2a,生枝条截成,20Ca,长的,小段，每个菌种用,30,段,第二步，消毒：将切成的小段用,7505,酒精表面消毒，再,用无菌水冲洗,第三步，接种：先用烙铁把切成的小段烫伤，再向苹果枝条小段,皮内接入适量的分离纯化苗丝,第四步，保湿：把接种的枝条小段与对照一同放,入保湿缸内，置于,25,恒温箱内培养,第五步，观察记录：每天观察同时记载发,病情况。以烫伤不接菌的枝条小段为对照统计发病率。,9,拮抗菌的筛选,从土壤中富集细菌，然后在肉膏蛋白胨培养基上培养，根据其形态、菌落初步筛出不同的菌，进一步进行分离纯化。,把土壤中筛出的菌和致病菌共同培养，观察数天，看是否出现抑菌圈，以及抑菌圈的大小。重复该步骤。,10,实验预期结果,回接及致病性的预测：,用分离的致病菌接种苹果的两年生枝段，均能发病，表现与田间相同的症状。致病菌在接种 几天后开始显症，此后病斑向四周扩展，病部开始有黑色小点出现，对照均未感病。,拮抗菌的筛选的,预测：,会出现大小不同的抑菌圈,11,感谢您的关注！,
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