骨碎补检验方法验证方案汇总.doc

骨碎补检验方法验证方案TS-56-001 安徽谓博中药股份有限公司验证立项申请表 立项部门质量部申请日期立项题目 骨碎补检验方法验证方案要求完成日期验证原因确认骨碎补检验方法是否符合本公司产品类别前验证验证要求目的： 确认骨碎补检验方法是否符合本公司产品。确保骨碎补成品质量合格。 立项部门负责人签名 化验室意见 签名 年 月 日 质量部意见签名 年 月 日验证管理部门意见签名 年 月 日质量副总经理意见签名 年 月 日指定编制验证方案部门及人员部门：质量部化验室人员：化验员、化验室主任编制验证方案要求及完成日期按照公司验证管理文件的规定编制出该验证项目的验证对象、验证的目标和范围，验证的要求与内容、所需的条件、测试方法以及时间进度，并设计出验证所需的表格。此方案应在 月 日前编制完成。验证完成要求及日期验证小组严格执行该验证方案，验证结束后，拟订出该方法的验证周期和验证报告报验证领导小组批准。此验证应在 月 日前验证结束。验证小组签名 年 月 日备注验证方案审批表 3 审批程序部门负责人签名日期备注起草 审 核QC主管质量部验证管理部门批准备注参加验证人员姓 名所在部门职务/职称验证分工化验室QC检测化验室QC主任方案的制定质量部质量部负责人验证方案的审批，指导、组织、落实验证工作其 它安徽谓博中药股份有限公司验 证 文 件题 目骨碎补检验方法验证方案编 码页 码第 1 页/共 页起 草 人起草日期审 核 人 审核日期批 准 人批准日期一、简介取净骨碎补或片，照烫法（通则0213）用砂烫至鼓起，撞去毛。本品形如骨碎补或片，体膨大鼓起，质轻、酥松。二、验证目的：骨碎补检验质量标准收载在中国药典2015版一部, 为保证生产出的成品符合检验标准的要求,确认该检测方法是否适用于本公司生产的成品检验。现对质量标准分析方法进行验证，确保检验结果的准确可靠。三、验证范围、鉴别、含量测定四、验证小组成员及职责4.1验证小组成员4.2人员职责人 员职 责验证小组组长组织相关的验证培训；负责起草验证方案、组织项目的具体验证、督促验证小组成员按照验证方案的要求做好验证记录；起草并完成验证报告，对整个验证项目负责。验证小组成员按照方案实施验证、并做好记录、意外情况及时汇报和记录、协助起草验证方案和报告。 表1：五、验证实施步骤1、为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施1.1仪器：己经过校正并在有效期内1.2人员：均经过培训，熟悉方法及使用的仪器1.3对照品：1.4材料：均符合检验要求1.5参考资料：中国药典2015年版一部及四部2、鉴别2.1试验A：取本品粉末0.5g，加甲醇30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（1:12:2.5：3）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。2.2试验B：取甲醇30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取试验A项下对照品溶液，照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（1:12:2.5：3）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。2.3检测结果:表2检验结果结果判断试验A试验B检测人: 检测日期:2.4 验证标准:试验A供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。试验B供试品溶液在与对照品溶液相同的位置未显荧光斑点。2.5检验结果评价 3、含量测定照高效液相色谱法测定。仪器： 高效液相色谱仪，编号：3.1专属性3.1.1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-醋酸-水（35:4:65）为流动相；检测波长为283nm。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。流速：1.0ml/min；进样量：10l。3.1.2对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柚皮苷60g的溶液，即得。3.1.3供试品溶液的制备：取本品粗粉约0.25g，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇30ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。3.1.4空白溶液的制备：直接取甲醇作为空白溶液。3.1.5将结果填入下表。表3 含量测定专属性试验表保留时间供试品溶液对照品溶液空白溶液检测人： 检测日期：3.1.6验证标准：供试品溶液中应呈现与柚皮苷对照品保留时间相同的色谱峰；空白溶液中在这点应无色谱峰。3.1.7结果评价3.2准确度3.2.1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-醋酸-水（35:4:65）为流动相；检测波长为283nm。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。流速：1.0ml/min；进样量：10l。3.2.2对照品溶液的制备：取3.1.2项下对照品溶液作为对照品溶液。3.2.3供试品溶液的制备：取3.1.3项下的供试品溶液，作含量测定用。3.2.4取本品粉末(过三号筛)约0.25g，置50ml量瓶中，共称九份。3.2.4.1三份中分别加3.1.2项下的对照品溶液10ml，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。3.2.4.2三份中分别加3.1.2项下的对照品溶液20ml，置50ml量瓶中，加甲醇30ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。3.2.4.3三份中分别加3.1.2项下的对照品溶液30ml，置50ml量瓶中，加甲醇20ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。3.2.5计算回收率%=（CA）/B100%式中A为供试品所含被测成分量； B为加入对照品量； C为实测值。回收率限度要求：90108RSD限度要求33.2.6计算结果填入下表：表5 含量测定柚皮苷加样回收率试验表序号样品称量（g）样品中柚皮苷的含量（mg）对照品加入量（mg）实测值（mg）回收率（%）回收率的平均值（）RSD（%）123456789检测人： 检测日期：3.2.7结果评价3.3精密度3.3.1重复性（设操作人员A）3.3.1.1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-醋酸-水（35:4:65）为流动相；检测波长为283nm。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。流速：1.0ml/min；进样量：10l。3.3.1.2对照品溶液的制备：取3.1.2项下对照品溶液作为对照品溶液。3.3.1.3供试品溶液的制备：取取本品中粉约0.25g，精密称定，共称6份。置锥形瓶中，加甲醇30ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。3.3.1.4计算 F对 供试品峰面积稀释倍数含量= 100% 物重（1水份%）1000 式中：平均峰面积 f对：对照品稀释倍数 W对对照品称重 S 对照品纯 度 F对响应因子 平均响应因子3.3.1.5将计算的结果填入下表表6 含量测定柚皮苷重复性试验表序号样品称量（g）含量（g/g）含量的平均值（g/g）RSD（%）123456检测人： 检测日期：3.3.1.6结果评价3.3.2中间精密度（换一时间，换一操作人员，设操作人员为B）3.3.2.1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-醋酸-水（35:4:65）为流动相；检测波长为283nm。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。流速：1.0ml/min；进样量：10l。3.3.2.2对照品溶液的制备：取3.1.2项下对照品溶液作为对照品溶液。3.3.2.3供试品溶液的制备：取取本品中粉约0.25g，精密称定，共称6份。置锥形瓶中，加甲醇30ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。3.3.2.4计算 F对 供试品峰面积稀释倍数含量= 100% 物重（1水份%）1000 式中：平均峰面积 f对：对照品稀释倍数 W对对照品称重 S 对照品纯 度 F对响应因子 平均响应因子 3.3.2.5将计算的结果填入下表表7： 含量测定柚皮苷中间精密度试验表序号样品称量（g）含量（g/g）含量的平均值（g/g）RSD（%）操作员A123456操作员B123456检测人： 检测日期：3.3.2.6结果评价3.4耐用性3.4.1以流动相的组成比例、同一规格的色谱柱为变动因素，得出测定结果不受影响的程度，为使方法用于常规检验提供依据。3.4.2对照品溶液的制备：取3.1.2项下对照品溶液作为对照品溶液。3.4.3供试品溶液的制备：取3.1.3项下供试品溶液作为供试品溶液。3.4.4色谱条件1：以甲醇-醋酸-水（35:4:65）为流动相，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长为250nm，流速：1.0ml/min；进样量：10l。3.4.5色谱条件2：流动相组分比例改变，其他条件不变。以甲醇-醋酸-水（55:4:45）为流动相，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长为250nm，流速：1.0ml/min；进样量：10l。以甲醇-醋酸-水（15:4:85）为流动相，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长为250nm，流速：1.0ml/min；进样量：10l。3.4.6将数据整理，填入下表。表8 含量测定耐用性试验表保留时间分离度理论板数色谱条件1色谱条件2检测人： 检测日期：3.4.7结果评价六、验证的结果评价及建议七、再验证周期：质量部门根据验证结果确定再验证周期