第二章+基因工程的酶学基础.ppt

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,,基因工程的酶学基础,,限制性核酸内切酶,第二节,DNA,连接酶,第三节,DNA,修饰酶,第四节 基因工程其它工具酶,,限制性核酸内切酶,要点介绍,1,、了解并掌握一些基本概念的掌握如,限制性核酸内切酶、同尾酶、同裂酶、识别序列、切割位点、位点偏爱等。,2,、了解酶的命名方法。,3,、掌握限制性核酸内切酶的种类及区别、识别序列及特征、作用机制、反应体系和影响因素等。,4,、了解内切酶的性质、功能和应用。,5,、掌握,DNA,分子片断化的方法。,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,主要为细菌、,少数霉菌和蓝藻,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,来源,识别序列,切割位点,作用机制,基因工程中的应用,教材,P13,表,2-1,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,教材,P39,,限制性核酸内切酶,教材,P39,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,P46,在,PH,不合适，或甘油浓度过高,10%,时，,限制性内切酶的切割位点会出现非专一性，,因此应确保酶的体积为总体积的十分之一以下。,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,限制性核酸内切酶,,DNA,连接酶,DNA,连接酶,是由大肠杆菌染色体编码的,T4 DNA,连接酶，,是由大肠杆菌,T4,噬菌体,DNA,编码的。,连接酶的来源,P21,（,3,）热稳定,DNA,连接酶,三,,NAD+,T4 DNA,连接酶,ATP,教材,P22,,其它工具酶,了解一些其它酶的作用和用途,,其它工具酶,P53,,其它工具酶,发夹结构,,