宁夏青吴忠市铜峡高级中学2026届高三下学期期末六校联考生物试题含解析.doc

宁夏青吴忠市铜峡高级中学2026届高三下学期期末六校联考生物试题
注意事项：
1． 答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。
2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。
3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。
4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。

一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1．下列关于光合作用的叙述，正确的是（ ）
A．光反应只能在有光条件下进行，暗反应只能在黑暗中进行
B．光反应是在叶绿体类囊体上进行，暗反应只能在叶绿体基质中进行
C．影响光反应的外界因素仅有光照强度，影响暗反应的外界因素只是CO2浓度
D．光反应为暗反应提供[H]和ATP，暗反应需要不止一种酶的催化
2．关于遗传和变异，下列说法错误的是（ ）
A．基因突变的方向与环境没有明确的因果关系
B．基因重组虽然不能产生新基因，但可以形成多样化基因组合的子代，有利于适应多变的环境，对生物进化有重要意义
C．生物体的遗传与变异，往往以细胞内基因的传递和变化为基础
D．猫叫综合征是人的第5号染色体缺失引起的遗传病
3．下列关于核糖体结构与功能的叙述，正确的是（ ）
A．核糖体由蛋白质和tRNA组成
B．抗体是由浆细胞中游离的核糖体合成
C．多个核糖体串联在一条mRNA上可快速合成多条肽链
D．核糖体在完成一条mRNA的翻译后两个亚基立即被降解
4．下列关于细胞结构及细胞生命活动的叙述，正确的是（ ）
A．高温破坏蛋白质中的肽键使蛋白质的空间结构变得松散
B．真核细胞的细胞核是遗传信息转录和翻译的场所
C．细胞分裂间期既有DNA的复制又有蛋白质的合成
D．细胞凋亡只发生在胚胎发育的过程中
5．下列有关教材实验中使用的试剂和实验原理的叙述，正确的是（ ）
A．制作人的口腔上皮细胞临时装片观察线粒体时需在洁净载玻片中央滴一滴生理盐水
B．盐酸在观察细胞有丝分裂和观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中的作用相同
C．向某溶液中加入斐林试剂，水浴加热后出现砖红色沉淀，说明该溶液中含有葡萄糖
D．在提取纯净的动物细胞膜和植物细胞的质壁分离与复原实验中水的作用原理相近
6．β-淀粉样蛋白（Aβ）在脑组织内堆积会导致阿尔茨海默病。小胶质细胞是脑组织中的重要免疫细胞，具有“清洁”功能。CD22是一种仅表达在小胶质细胞表面的膜蛋白。研究人员给实验组小鼠的大脑注射CD22单克隆抗体（单抗），对照组不注射，评估CD22单抗对小胶质细胞清除能力的影响。48小时后，得到图所示结果。以下分析不合理的是（ ）

A．CD22单抗能特异性结合小胶质细胞膜上的CD22
B．CD22蛋白基因可在小胶质细胞中特异性表达
C．敲除CD22蛋白基因会增加小鼠脑中Aβ含量
D．小胶质细胞能吞噬并清除Aβ以减少其过度堆积
7．下列有关基因突变的叙述，正确的是（ ）
A．基因突变可导致染色体上基因的结构和数目都发生改变
B．发生在植物体细胞的基因突变可通过无性繁殖传递给后代
C．基因突变的不定向性体现基因突变可发生在个体发育的任何时期
D．DNA分子中发生碱基对的增添、缺失和替换都会引起基因突变
8．（10分）研究指出，有些人可能具有抵抗HIV侵染的能力，原因是其细胞中含有HLAB57基因，能使身体内产生更多功能强大的某种免疫细胞，该种免疫细胞能产生大量可抑制HIV活性的蛋白质。下列有关人体免疫调节的说法，比较合理的是
A．机体只能依赖浆细胞产生的抗体消灭HIV
B．HLAB57基因表达产生的蛋白质可直接消灭HIV
C．含有HLAB57基因的细胞可能具有识别HIV的能力一
D．T细胞在HIV侵入人体的过程中没有发挥其免疫功能
二、非选择题
9．（10分）2019年年底在湖北武汉爆发了新冠肺炎病的流行。研究表明这是由新型冠状病毒（2019-nCov）感染引起。该病毒为单股正链RNA（+RNA）病毒，主要通过飞沫传播，通过人的口腔、呼吸道黏膜感染人体。可以用核酸试剂盒检测。戴口罩可有效预防感染。结合所学知识回答下列问题：
（1）试剂盒检测的原理：_______________________。（至少写2种）
（2）新型冠状病毒不是通过皮肤细胞感染，而是通过黏膜细胞感染，其原因是________________________________。
（3）新型冠状病毒侵入人体后寄生在宿主细胞中，___________能识别被寄生的寄主细胞，并与之密切接触，使其裂解死亡；新型冠状病毒被释放出来，而后会被_________免疫产生的________所凝集，使之失去侵染能力，最后被吞噬细胞吞噬消化。
（4）假定病毒基因组+RNA含有8000个碱基，其中A和U占碱基总数的40%。以病毒基因组+RNA为模板合成一条子代+RNA的过程共需要碱基G和C______个。
（5）病毒寄生在蝙蝠体内，但不会引起蝙蝠大量死亡，这是病毒和蝙蝠两种生物长期____________的结果。
10．（14分）思考回答下列生物技术问题：
（1）泡菜发酵过程中起作用的主要菌种是__________，泡菜水表面的白膜是________，而苹果酒表面的白膜是____________。
（2）在微生物实验中，灭菌与消毒的主要区别体现在灭菌______（至少答两点）。一般来说，生物学实验中，实验操作者的双手、用于组培的植物组织、用于研究呼吸强度的种子，需要进行 __处理；微生物接种操作、灭菌的培养基倒平板都要在_____附近进行，这是为了防止外来杂菌污染。
（3）测定培养液中活菌数，用稀释涂布平板法。通过菌落计数并计算后常发现，稀释倍数高的组别的计算结果往往大于稀释倍数低的组别，导致这种结果的原因最可能是_______。
（4）加酶洗衣粉是含有酶制剂的洗衣粉，除碱性脂肪酶外，常用的酶制剂还有_______等。
11．（14分）为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。

（1）将草甘膦抗性基因作为_____，与Ti质粒用相同的_____和DNA连接酶处理构建基因表达载体。
（2）用_处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_____的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'
3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'
根据上述序列应选择引物_____（填字母）进行PCR。
A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'
B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'
C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'
D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'
（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计_____种引物，其原因是_____。
（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否_____。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____过程，获得转基因水稻。
12．蛛丝蛋白纤维是目前已知的最坚韧的天然纤维之一，又被称为“生物钢”。为了提高羊毛纤维的拉伸强度，科学家将蜘蛛牵丝蛋白基因整合到羊胎儿成纤维细胞，并用此细胞作为核供体，结合核移植技术，成功获得了能合成蛛丝蛋白的转基因细毛羊。回答下列问题。
（1）检测蜘蛛牵丝蛋白基因是否成功导入到羊胎儿成纤维细胞，一般采用的方法是_______，可使用__作为探针对目的基因检测。
（2）将转基因成功的羊胎儿成纤维细胞作为核供体细胞，在对其进行体外培养时，传代一般都控制在10代以内，原因是_______。
（3）用细毛羊卵母细胞作为核移植的受体，在核移植之前必须先对卵母细胞进行的操作有_______。
（4）为检测出生小羊是否成功表达牵丝蛋白基因，可采用的方法有_______（填序号）。
①DNA测序 ②染色体倍性分析 ③体细胞结构分析 ④抗原-抗体杂交 ⑤对羊毛纤维进行拉伸度测试
（5）为了提高已有重组胚胎的利用率，可采用_______技术，但此技术产生同卵多胚的数量是有限的，从后代数量的角度分析，采用羊胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆的优势在于_______。
参考答案

一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1、D
【解析】
光合作用指绿色植物通过叶绿体，利用光能，把二氧化碳和水转化成储存能量的有机物，并释放出氧气的过程。
【详解】
A、光反应只能在有光条件下进行，而暗反应在有光条件下和黑暗中都可以进行，A错误；
B、绿色植物细胞的光反应在叶绿体类囊体上进行，暗反应在叶绿体基质中进行，而蓝藻等原核细胞的光合作用在细胞质中进行，B错误；
C、影响光反应的外界因素主要是光照强度，影响暗反应的外界因素主要是CO2浓度和温度，影响光合作用的因素还有水、无机盐离子等，C错误；
D、光反应为暗反应提供[H]和ATP，暗反应需要多种酶的催化，D正确。
故选D。
光合作用的影响因素有：光照强度、温度、二氧化碳浓度、色素、酶等。
2、D
【解析】
可遗传的变异包括基因突变、基因重组和染色体变异：
（1）基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失或替换，这会导致基因结构的改变，进而产生新基因；
（2）基因重组是指在生物体进行有性生殖的过程中，控制不同性状的非等位基因重新组合，包括两种类型：①自由组合型：减数第一次分裂后期，随着非同源染色体自由组合，非同源染色体上的非等位基因也自由组合；②交叉互换型：减数第一次分裂前期（四分体），基因随着同源染色体的非等位基因的交叉互换而发生重组。此外，某些细菌（如肺炎双球菌转化实验）和在人为作用（基因工程）下也能产生基因重组；
（3）染色体变异包括染色体结构变异（重复、缺失、易位、倒位）和染色体数目变异。
【详解】
A、基因突变是不定向的，与环境没有明确的因果关系，A正确；
B、基因重组虽然不能产生新基因，但可以形成多样化基因组合的子代，从而使得后代有了更大的变异性，有利于适应多变的环境，对生物进化有重要意义，B正确；
C、生物体的遗传与变异，往往以细胞内基因的传递和变化为基础，进而表现出生物体性状上的差异，C正确；
D、猫叫综合征是人的第5号染色体部分缺失引起的遗传病，属于染色体结构变异，D错误。
故选D
3、C
【解析】
基因表达是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程，基因表达产物通常是蛋白质。基因表达包括转录和翻译。转录过程由RNA聚合酶进行，以DNA为模板，产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动，留下新合成的RNA链。翻译过程是以信使RNA（mRNA）为模板，指导合成蛋白质的过程。
【详解】
A、核糖体由蛋白质和rRNA组成，A错误；
B、抗体是分泌蛋白，由浆细胞中附着的核糖体合成，B错误；
C、多个核糖体串联在一条mRNA上可快速合成多条肽链，提高翻译的效率，C正确；
D、核糖体在完成一条mRNA的翻译后大小亚基会分离，不会立即被降解，D错误。
故选C
4、C
【解析】
真核细胞的细胞核是遗传信息转录和复制的主要场所，细胞分裂间期主要完成DNA的复制和相关蛋白质的合成，细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。细胞凋亡是生物体正常的生命历程，对生物体是有利的，而且细胞凋亡贯穿于整个生命历程。
【详解】
A、高温破坏蛋白质的空间结构使其变得松散，但没有破坏肽键，A错误；
B、真核细胞的细胞核是遗传信息转录和复制的主要场所，翻译在核糖体上进行，B错误；
C、细胞分裂间期主要完成DNA的复制和相关蛋白质的合成，C正确；
D、细胞凋亡贯穿于生物个体整个生命历程中，D错误。
故选C。
5、D
【解析】
1．质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。
2．质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
【详解】
A、制作人的口腔上皮细胞临时装片观察线粒体时，在洁净载玻片中央滴一滴用生理盐水配制的健那绿染液，A错误；
B、盐酸在观察细胞有丝分裂中的作用是解离，而在观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中的作用是改变细胞膜的通透性，进而使染色剂容易进入，B错误；
C、向某溶液中加入斐林试剂，水浴加热后出现砖红色沉淀，说明该溶液中含有可溶性还原糖，C错误；
D、在提取纯净的动物细胞膜和植物细胞的质壁分离与复原实验中利用了渗透作用的原理，实验的结果都是吸水或失水造成的，D正确。
故选D。
6、C
【解析】
题意分析，实验组小鼠的大脑注射CD22单克隆抗体（单抗），CD22单克隆抗体（单抗）能清除小胶质细胞表面的CD22膜蛋白，实验结果显示实验组中（Aβ）含量降低（与对照组相比），故此可推测，小胶质细胞表面的CD22膜蛋白的存在不利于小胶质细胞对β-淀粉样蛋白（Aβ）的清除，据此得出实验结论为：CD22单抗能提高小胶质细胞清除能力。
【详解】
A、抗体能与相应的抗原发生特异性结合，故CD22单抗能特异性结合小胶质细胞膜上的CD22，A正确；
B、CD22是一种仅表达在小胶质细胞表面的膜蛋白，可推知CD22蛋白基因可在小胶质细胞中特异性表达，B正确；
C、由分析可知，敲除CD22蛋白基因会使小鼠脑中Aβ含量下降，C错误；
D、小胶质细胞是免疫细胞，具有“清洁”功能，能吞噬并清除Aβ以减少其过度堆积，D正确。
故选C。
7、B
【解析】
基因突变是指基因中发生碱基对的增添、缺失和替换进而造成基因结构发生改变。基因突变若发生在体细胞中，一般不会通过繁殖遗传给后代，但植物体细胞可以经过无性繁殖传递给后代。基因突变的结果一般是产生它的等位基因，基因的数目一般不发生变化。
【详解】
A、基因突变可以导致染色体上基因的结构改变，但不会引起基因数目的改变，A错误；
B、发生在植物体细胞的基因突变不能通过有性繁殖传递给后代，但是可通过无性繁殖传递给后代，B正确；
C、基因突变的不定向性体现在一个基因可以朝不同的方向突变出多个等位基因（复等位基因）；基因突变的随机性表现在基因突变可发生在个体发育的任何时期，可以发生在细胞内不同的DNA分子上，以及同一DNA分子的不同部位，C错误；
D、DNA分子中发生碱基对的增添缺失和替换而引起的基因结构的改变，叫做基因突变，D错误。
故选B。
8、C
【解析】
体液免疫和细胞免疫的具体过程：

【详解】
A、抗体与抗原结合后形成沉淀或细胞集团，被吞噬细胞吞噬消化，A错误；
B、由题意知，HLAB57基因作用机理，能使身体内产生更多功能强大的某种免疫细胞，该种免疫细胞能产生大量可抑制HIV活性的蛋白质，B错误；
C、含有HLAB57基因的细胞可能具有识别HIV的能力一，C正确；
D、在体液免疫中T细胞分泌淋巴因子给B细胞，仍然发挥作用，D错误。
故须C。

二、非选择题
9、RNA的特异性、碱基互补配对原则、荧光标记法 只有黏膜细胞膜表面才有与新型冠状病毒特异性结合的受体 效应T细胞 体液 抗体 9600 共同进化
【解析】
1.201 9新型冠状病毒具有生物的特征，因此是生物，它没有细胞结构，包括蛋白质外壳和遗传物质内核两部分，病毒只能寄生在活细胞里，因此它的生活方式是寄生；预防201 9新型冠状病毒感染肺炎的具体做法有：开窗通风，保持室内空气的流通；咳嗽和打喷嚏时使用纸巾或屈肘遮掩口鼻，防止飞沫传播等。
2. 不同物种之间，生物与无机环境之间，在相互影响中不断进化和发展，最终形成了生机勃勃的生物圈，这就是共同进化。
【详解】
（1）诊断新冠患者所用试剂盒是根据RNA的特异性碱基互补配对原则或荧光标记法 等能够显示病毒特异性的原理进行检测的。
（2）因为只有黏膜细胞膜表面有与新型冠状病毒特异性结合的受体，而皮肤细胞表面没有与新型冠状病毒发生特异性结合的受体，所以新冠病毒不是通过皮肤细胞感染，而是通过黏膜细胞感染。
（3）新型冠状病毒侵入人体后寄生在宿主细胞中，由于新冠病毒的侵染而使细胞免疫过程产生了效应T细胞，效应T细胞能识别并与相应的靶细胞（被新冠病毒感染的细胞）密切接触，使其裂解死亡；新型冠状病毒被释放出来，而后会被体液免疫过程产生的相应抗体所凝集，使之失去侵染能力，最后被吞噬细胞吞噬消化。
（4）以病毒基因组+RNA为模板合成一条子代+RNA的过程实际上是要复制两条RNA单链（包含正、负个一条链），而且这两条单链之间是互补的，根据有互补关系的单链中互补碱基之和恒等的原理分析如下：假定病毒基因组+RNA含有8000个碱基，其中A和U占碱基总数的40%。则G和C占碱基总数为8000×（1-40%）=4800，故此以病毒基因组+RNA为模板合成一条子代+RNA的过程共需要碱基G和C的数量为4800×2=9600个。
（5）病毒寄生在蝙蝠体内，但不会引起蝙蝠大量死亡，这是病毒和蝙蝠之间经过长期相互选择而实现了两种生物的共同进化，即二者关系的形成是共同进化的结果。
熟知病毒的生理特性是解答本题的关键！掌握RNA的复制过程以及具有从DNA到RNA的相关碱基计算的迁移能力是解答本题的另一关键！
10、乳酸菌 大量繁殖的产膜酵母 大量繁殖的醋酸杆菌 ①用强烈的理化因素  ②杀死物体表面或内部的全部微生物   ③包括芽孢和孢子 消毒 酒精灯火焰 多个细菌连在一起形成一个菌落 碱性蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶
【解析】
1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】
（1）泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。泡菜水表面的白膜是大量繁殖的产膜酵母，而苹果酒表面的白膜是大量繁殖的醋酸杆菌。
（2）消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），灭菌与消毒的主要区别体现在灭菌是用强烈的理化因素，杀死物体表面或内部的全部微生物，包括芽孢和孢子。一般来说，实验操作者的双手、用于组培的植物组织、用于研究呼吸强度的种子，需要进行较温和的消毒处理；微生物接种操作、灭菌的培养基倒平板都要在酒精灯火焰附近进行，这是为了防止外来杂菌污染。
（3）用稀释涂布平板法通过菌落计数时，因为可能出现多个细菌连在一起形成一个菌落，故稀释倍数高的组别的计算结果往往大于稀释倍数低的组别。
（4）加酶洗衣粉是含有酶制剂的洗衣粉，除碱性脂肪酶外，常用的酶制剂还有碱性蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等。
本题考查泡菜的制作、微生物的培养和分离实验，要求考生识记参与泡菜制作的微生物及其代谢类型，掌握泡菜制作的原理及条件，掌握微生物的培养和分离实验，能结合所学的知识准确判断答题。
11、目的基因 限制性核酸内切酶 CaCl2 潮霉素 BD 2 保证基因的两条反向平行的链都做模板，且其上碱基序列不同 表达 再分化
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：
分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术；
③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。
个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
（1）用相同的限制性内切酶切割目的基因和质粒后露出相同的黏性末端再用DNA连接酶连接，从而构建基因表达载体，题中以草甘膦抗性基因作为目的基因。
（2）依据图中信息，农杆菌用CaCl2处理后变成感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后在含有标记基因表达的潮霉素培养基中筛选，从而获得含目的基因表达载体的农杆菌。
（3）根据已知草甘膦抗性基因的部分序列以及双链DNA分子的结构特点（反向平行），再结合DNA复制（PCR中）的特点，即子链合成的方向是从5’到3’，应选择引物B、D进行PCR扩增。
（4）为使基因的两条反向平行的链都做模板，而且其碱基序列不同，所以，PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计2种引物。
（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否表达。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过再分化过程，获得转基因水稻。
本题主要考查基因工程的应用相关知识，识记和理解目的基因的获取、表达载体的构建以及目的基因的检测等知识是解答本题的关键。
12、DNA分子杂交 放射性同位素标记（或荧光标记）的蛛丝蛋白基因 10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型 培养至减数第二次分裂中期，去核 ④⑤ 胚胎分割 可以获得大量遗传物质相同的后代
【解析】
1、基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
（1）基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体（常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒）。
（2）基因工程四步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。
（3）将目的基因导入受体细胞：①将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；②将目的基因导入动物细胞的方法：显微注射技术；③将目的基因导人微生物细胞的方法：用Ca2+处理细胞→感受态细胞。
（4）目的基因的检测与鉴定：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原−抗体杂交技术。
2、动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物，克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞。核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，因为体细胞的全能性低于胚胎细胞。
3、对囊胚阶段的胚胎分割时，要将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发展。
【详解】
（1）检测蜘蛛牵丝蛋白基因是否成功导入到羊胎儿成纤维细胞，可采用DNA分子杂交技术检测，其原理是碱基互补配对。所用探针为放射性同位素标记（或荧光标记）的蜘蛛牵丝蛋白基因对目的基因进行分子水平上的检测。
（2）供体细胞采用的是羊胎儿成纤维细胞，而不是成年个体成纤维细胞的原因是胎儿成纤维细胞分裂次数少。用于核移植的供体细胞，一般都选用传代10代以内的细胞，原因是该种细胞代谢旺盛、分裂能力强，且遗传物质没有发生改变，能保持正常的二倍体核型。
（3）核移植的受体细胞常选用去核卵母细胞的原因：卵母细胞大，容易操作；卵母细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。核移植的受体应选用处于MⅡ中期的卵母细胞。在核移植之前，需将卵母细胞培养至减数第二次分裂中期，去掉卵母细胞的细胞核，目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞。
（4）目的基因是否表达出相应的蛋白质，除了通过检测羊毛纤维的拉伸强度来确定外，还可以通过抗原−抗体杂交技术反应来判断，故选④⑤。
（5）为了提高重组胚胎的利用率，可采用胚胎分割移植技术。用于分割的胚胎应是桑椹胚或囊胚阶段的胚胎。采用胎儿成纤维进行转基因体细胞克隆，属于无性生殖，因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养，从数量上看可以获得大量遗传物质相同的后代。
解答本题的关键是掌握转基因技术、核移植技术、胚胎移植等过程，能够弄清楚题图中供体、受体的选择和特征，明确核移植时的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期，并能够选择正确的方法检测目的基因是否表达。