课题3-分解纤维素的微生物的分离-(3).ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,学习目标：,学会分离土壤中能分解纤维素的微生物的方法,课题,3,分解纤维素的微生物的分离,纤维素,是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是,含量最丰富的,多糖,类物质,。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是,因,为它们能够产生,纤维素酶。,草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？,胃和肠道中生活着大量分解纤维素的微生物，能产生纤维素酶，将纤维素分解成葡萄糖。,课题背景,棉花,是自然界中纤维素含量最高的天然产物，纤维素的分解需要在,纤维素酶,的催化作用下完成，请完成下列过程（阅读课本第二段）：,（一）纤维素与纤维素酶,基础知识,纤维素酶是一种,复合酶,，一般认为它至少包括三种组分,，即,C,1,酶、,C,X,酶和葡萄糖苷酶,，前两种酶使纤维素分解成,纤维二糖,，第三种,酶将纤维二糖分解,成葡萄糖,。,纤维素,纤维二糖,葡萄糖,C,1,酶,Cx,酶,葡萄糖苷酶,体会纤维素酶作用的实验：,（二）纤维素分解菌的筛选,1,、筛选纤维素分解菌的方法是,_,。该方法可以通过,_,反应直接筛选。,刚果红染色法,颜色,2,、其原理是：刚果红可以与纤维素形成,_,，当纤维素被,_,分解后，红色复合物无法形成，出现以,_,为中心的,_,，我们可以通过,_,来筛选纤维素分解菌。,红色复合物,纤维素酶,纤维素分解菌,透明圈,是否产生透明圈,练一练：,1.,下列关于纤维素酶的说法，错误的是,A.,纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种,B.,纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖,C.,纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁,D.,葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖,2.,利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是,A.,刚果红能与纤维素形成红色复合物,B.,刚果红能与纤维二糖形成红色复合物,C.,刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物,D.,若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌,土壤取样,选择培养,梯度稀释,将样品涂布到,鉴别,纤维素分解菌的培养基上,挑选产生透明圈的菌落,（操作流程）,（,此步可省略,实验设计,旁栏思考题,本实验流程与课题,2,中的实验流程有哪些异同？,课题,2,土壤取样制成悬液，直接稀释涂布在选择培养基上,课题,3,土壤取样，选择培养，增加纤维素分解菌浓度后，再稀释涂布,纤维素分解菌大多分布在,_,_,的环境中。采集土样时，应选择富含纤维素的环境。如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。也可将,滤纸埋在土壤,中一个月左右，这样会有能分解纤维素的微生物生长。,【,资料一,】,土壤取样,富含纤维素,旁栏思考题,为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？,在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,旁栏思考题,将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？,使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约,10cm,的腐殖土壤中。,1,、纤维素分解菌,选择培养基,属于,_,（固体、液体）培养基，原因是,_,。,【,资料二,】,选择培养,阅读资料二“选择培养基”，回答以下几个问题：,液体,没有添加琼脂（,凝固剂,）,2,、该培养基对微生物,_,（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是,_,_,。,以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖,具有,可选用,牛肉膏蛋白胨培养基,作为对照。,3,、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？,思考,2,实验流程中“选择培养”的目的是什么？,其目的是增加纤维素分解菌的浓度，,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。,【,资料三,】,刚果红染色法,方法一：,先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应,方法二：,在倒平板时就加入刚果红,染色法,优点,缺点,方法一,（,后加刚果红,）,方法二,（,先加刚果红,）,颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用,操作繁琐，刚果红会使菌落之间发生,混杂,操作简便，不存在菌落混杂问题,有些微生物能,降解色素,，形成明显的透明圈。,思考：这两种方法各有哪些优点与不足,方法一中,NaCl,溶液的作用？,洗去,浮色,类似的操作还出现在什么实验中？,选择培养的操作方法,将土样加入装有,30ml,选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在,摇床,上，在一定温度下,振荡,培养,1,2,天，直至培养液变,浑浊,。也可重复选择培养。,思考：据“摇床”、“振荡”分析纤维素分解菌的异化作用类型？,操作提示,结果分析与评价,1,、选取的实验样品是什么？取样的环境有哪些特点？理由？,2,、培养基是否有杂菌污染？是否分离得到了目的菌株？,3,、分析结果不同的原因。,为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行,_,实验，纤维素酶的发酵方法有,_,发酵和,_,发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的,_,含量进行定量测定。,发酵产纤维素酶,液体,固体,葡萄糖,课题延伸,D,1,、下列材料中纤维素含量最高的是,(),A,杨树,B,小麦,C,玉米,D,棉花,C,2,、纤维素酶能够分解,(),A,纤维素的微生物,B,淀粉的微生物,C,纤维素,D,淀粉,B,3,、刚果红能与哪项物质形成红色复合物,(),A,纤维二糖,B,纤维素,C,葡萄糖,D,麦芽糖,B,4,、寻找纤维素分解菌应到,(),A,湿润的环境中,B,富含纤维素的环境中,C,富含无机盐的环境中,D,池塘中,D,5,、纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有,(),A,NaNO,3,B,KCl,C,酵母膏,D,纤维素粉,A,6,、下列哪种生物能产生纤维素酶,(),A,纤维素分解菌,B,牛,C,羊,D,兔,D,7,、选择培养时应将锥形瓶固定在,(),A,桌子上,B,温箱里,C,窗台上,D,摇床上,B,8,、选择培养的结果：培养液变,(),A,清澈,B,浑浊,C,红色,D,产生透明圈,C,9,、刚果红染色时，加入刚果红可在,(),制备培养基时 梯度稀释时,倒平板时 涂布时,培养基上长出菌落时,A,B,C,D,A,10,、两种刚果红染色法的结果是,(),A,均会出现透明圈,B,均不会出现透明圈,C,方法一出现，方法二不出现,D,方法一不出现，方法二出现,