郑大.移植免疫.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,移植免疫及其免疫检测,郑州大学检验,医学系,第二十六章,Transplantation Immunology,移植（,transplantation,）,将身体的某一部分（如细胞、组织或器官），通过手术或其他途径移到同一个体或另一个体的特定部位，并使其继续存活的方法，称移植。,被移植的部分称为,移植物,（,graft,，,transplant,）,，献出移植物的个体称,供者,（,donor,）；,接受移植物的个体称,受者,（,recipient,）,或,宿主,（,host,）。,不同个体间进行组织或器官移植时，供者与受者双方相互接受兼容的程度称为,组织相容性,（,histocompatibility,）。,移植根据移植物来源不同分类,移植根据移植部位不同分类,原位移植,：,即移植物植入到原来的解剖部位，移植前需将受者原来的器官切除，如原位心脏移植、原位肝移植,；,异位移植：,即移植物植入到另一个解剖位置，一般情况下，不必切除受者原来器官，如肾移植、胰腺移植一般是异位移植，原位不好固定；,旁,原位移植：,即将,移植物植入到贴近受者同名器官的位置，不切除原来器官，如胰腺移植到紧贴受者胰腺的旁原位胰腺移植,。,移植根据移植物种类不同分类,器官移植：,将一个器官整体或局部从一个个,体转移,到另,一个体的,过程，肝移植,、肾移植、心脏移植、,肺移植。,组织移植：,将自体组织或人工材料等移植到身体的某一部位，如皮肤移植、骨及软骨移植、真皮及脂肪移植、黏膜移植、筋膜移植、肌移植、神经移植、复合组织移植、生物材料填入以及组织工程化组织移植等。,细胞移植：,干细胞具有自我,更新、多向分化与重建长期造血的潜能及损伤后自我修复的能力,。,其他移植类型,“多米诺”（骨牌）式,移植：,例如,病人,A,需要移植肺脏而心脏健康，病人,B,需要移植心脏，这时出现捐献者,C,可以同时捐献心脏和肺脏，由于,心肺联合移植成功率更高,，所以可以考虑将,C,的心脏肺脏都移植给,A,，同时将,A,的心脏移植给,B,。,劈离式,移植：,(split liver transplantation,SLT),是基于肝脏是,功能性分段器官,的,理论，将,完整,的供,肝分割成,2,个或,2,个以上的解剖功能单位分别移植给不同,受者，达到,“,一,肝两,受,”,或,“,一,肝多,受,”,，是,拓展供,肝池和缓解供肝短缺的重要方法之一。,排斥反应,（,rejection,）,由于供受者间组织不相容，移植物与受者免疫系统相互作用引起免疫应答，导致移植物或受者组织损伤反应，反之，供受者遗传物质愈相同，即组织相容性愈高，排斥反应愈弱，长期存活率就愈高。,HVGR-,host versus garaft rejection,宿主抗移植物反应,GVHR-,garaft versus host rejection,移植物抗宿主反应,第一节 器官移植与移植免疫特点,移植物能否长期存活取决于,移植器官在移植过程中活力的保持,手术时的血管吻合和血液循环重建质量,移植排斥反应的控制,一、器官和组织移植的一般规律,移植器官或组织的,抗原性异物属性,排斥移植物的,记忆特性,负向免疫调节的必要性：,免疫抑制剂应用或免疫耐受诱导十分必要,二、,HLA,是诱导排斥反应最强的靶抗原,I,、,II,类分子，尤其,HLA-DR,位点的抗原分子，首要抗原,保守估计,HLA,至少存在,1300,个不同的单体型，相应地约有,1710,7,个,基因型，这,就是除同卵双生子以外几乎无,HLA,相同者的遗传基础，从而,HLA,可视作个体的“身份证”,。,其次，,HLA-A,、,B,、,DQ,、,DP,HLA-C,与排斥反应无关,三、受体对,HLA,的识别与效应机制,受体对,HLA,的识别,：,直接,识别：受体,T,细胞对移植物表面完整的,同种异型,HLA,分子的识别，参与强烈的急性排斥反应,；,CD4,+Th,细胞间接识别，在急性期、中期和晚期、慢性排斥反应中发挥作用。,受体对移植物的排斥,效应：,CD4,+T,细胞的活化和巨噬细胞的动员，介导迟发性超敏反应，导致免疫损伤,；,CD8,+T,细胞的直接杀伤作用,；,ADCC,或,CDC,造成急性或超急性免疫损伤,；,抗原,/,抗体复合物，激活补体损伤血管,；,残留,于移植物的过客细胞介导,GVHR,。,第二节,HLA,配型与应用分析,供、受体之间的,HLA,同源性是移植物长期存活的关键。,HLA,型别的判定具有多样性、复杂性,HLA,的配型方法,1.,血清学分型法,2.,细胞学分型法,3.,分子生物学分型法,1.,血清学方法,应用已知的抗,HLA,特异性标准分型血清与待测淋巴细胞混合，借助补体的生物学作用，介导细胞裂解的,细胞毒试验。可检测的抗原称,SD,（,serologically defined antigen,）抗原，包括,HLA-A,、,B,、,C,、,DR,、,DQ,。,该方法简单、快速、易操作；缺点是误差率较高。,2.,细胞学分型法,是以,混合淋巴细胞培养,（,MLC,）或称混合淋巴细胞反应（,MLR,）为基本技术，所测定的抗原称为,LD,抗原,(lymphocyte defined antigen),。包括,HLA-D,，,DP,双向,MLC,单向,MLC,3.,分子生物学分型法,RFLP,与,PCR-RFLP,分型法：,检测,HLA,多态性方法,PCR-SSO,分型法：,序列特异性寡核苷酸,-,聚合酶链式反应，应用广泛，能鉴定所有已知序列的,HLA-DR,，,DQ,，,DP,等位基因；,PCR-SSP,分型法,：,序列特异引物引导的,PCR,反应，,HLA-AB,，,DRB1,PCR-SSCP,分型法：,单链构象特异性,-PCR,SBT,分型法：,基于序列的,HLA,分型法,HLA,分型方法的应用,HLA,配型,HLA,交叉配型与预存抗体的检测,群体反应性抗体,（,panel reactive antibodies,PRA,）是指群体反应性抗,HLA-IgG,抗体，是各种组织器官移植术前筛选致敏受者的重要指标，与移植排斥反应和存活率密切相关。如果病人在曾经的输血或者器官移植中接触过他人,HLA,，,则会产生较强的抗性，不利于器官移植配型,。,PRA10,%,为阴性；,10,50,%,低致敏；,PRA50,%,为高,致敏，,PRA,越强，获得合适供体或移植成功的概率越低。,第三节 常见的组织或器官移植,肾移植,肝脏移植,心脏移植和心肺联合移植,角膜,移植,皮肤,移植,骨髓与其他来源的干细胞移植：骨髓、外周血、脐血干细胞,第四节 排斥反应的种类及发生机制,超排斥反应,急性排斥反应,慢性排斥反应,移植物抗宿主反应,1.,超急性排斥反应,（,hyperacute rejection,）,大多发生于血管吻合后数分钟至术后,24,小时内。,移植物,HLA,或,ABO,血型抗原与受者血清中,预存抗体,结合，激活补体，导致血小板聚集，吸引中性粒细胞聚集，并使凝血系统激活，最终导致严重的局部缺血及移植物坏死。也可由微生物感染引起。,目前临床上以,ABO,血型鉴定、,ABO,血型抗体效价测定、供受者,ABO,交叉配合和供受者补体依赖的淋巴细胞毒交叉试验作为预测试验，要求,ABO,血型配合，交叉配合试验阴性，以防止超急性排斥反应的发生。,2.,急性排斥反应,acute rejection,为同种移植中最常见的一种排斥反应类型。多发生于术后数天至数月内。,其发病机理中主要为细胞免疫，受者致敏产生大量细胞毒性,T,细胞可直接杀伤靶细胞，也可通过产生的细胞因子损伤组织。,急性体液性排斥反应：,内皮细胞表面,HLA,分子的抗体介导，导致移植物组织或器官的血管炎。,急性细胞性排斥反应：,移植组织或器官实质性损伤，伴有淋巴细胞和巨噬细胞浸润。与,CD4Th1,、,CD8,+,CTL,、,ADCC,作用相关。,3.,慢性排斥反应,chronic rejection,术后数月至,1,年后发生的缓慢、进行性、不可逆，并最终导致移植物功能丧失的损害形式。正常组织结构的丧失和纤维化是其病理特点。,引起慢性排斥反应的因素,（,1,）,CD4,+,Th1,细胞、巨噬细胞介导的迟发性超敏反应,（,2,）,B,细胞产生的抗体活化补体或通过,ADCC,破坏血管内皮细胞,（,3,）急性排斥反应反复发作所致移植物退行性变,（,4,）非免疫相关因素：局部缺血，微生物感染等,4.,移植物抗宿主反应,移植物中淋巴细胞（主要是,T,细胞）识别宿主抗原而致敏、增殖分化直接或间接攻击受者靶组织而发生的一种排斥反应，称为移植物抗宿主反应（,graft versus host reaction,，,GVHR,），严重时称移植物抗宿主病（,graft versus host disease,，,GVHD,）。,GVHR,发生前提,：,供受者,HLA,不相容；,移植物中含有足够数量的,免疫细胞；,受者免疫功能低下。,第五节 排斥反应的免疫监测,体液免疫与细胞免疫水平检测的意义,尿微量蛋白检测的临床意义,急性时相反应物质检测的临床意义,一、体液免疫与细胞免疫水平检测,1.,体液免疫：,特异性抗体水平检测，补体水检测,2.,细胞免疫：,外周血,T,细胞及其亚群检测；,NK,细胞活性测定；血清细胞因子测定；粘附分子及其配体测定,二、尿微量蛋白检测的临床意义,血浆蛋白：,Alb,，,IgG,，,IgA,，轻链，,b,2,M,，,C3,，,a,1-,微球蛋白、,TRF,，,Hb,，,Mb,非血浆蛋白：,SIgA,，,Tamm-Horsfall,蛋白，,GBM,抗体,方法：,免疫比浊，,ELISA,，,RIA,、毛细管电泳,三、急性时相反应物质检测,CRP,IL-1,，,IL-6,，,TNF-a,第六节 常用的免疫抑制药物及浓度监测,免疫抑制剂应用,对移植抗原特异性免疫耐受的诱导,免疫抑制剂体内浓度监测,一、免疫抑制剂应用,化学性抑制剂,生物性抑制剂,中草药,1.化学性抑制剂,环孢霉素,CsA,糖皮质醇激素,硫唑嘌呤,环磷酰胺,FK-506,（他克莫斯）,霉酚酸酯（,MMF,）,2.,生物性抑制剂,抗淋巴细胞球蛋白,细胞性单克隆抗体,某些融合蛋白,反义寡核苷酸,3.,中草药,雷公藤：雷公藤多苷（,T II,）,冬虫夏草：,FTY720,是冬虫夏草有效成分,ISP-1,结构改造而成。,二、对移植抗原特异性免疫耐受的诱导,抗原植入，新生儿诱导,供着,HLA,分子，封闭同种抗原特异性,T,细胞,TCR,诱导受者特异性,T,细胞凋亡，产生免疫耐受,T,细胞疫苗,三、免疫抑制剂体内浓度监测,方法：,ELISA,、,RIA,、荧光偏振、高效液相、质谱、毛细管电泳等,药代动力学监测：谷值、峰值,方法评价：,END,