1、单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第一次 微生物学实验准备工作及微生物接种技术,细菌革兰氏染色法,第二次 细菌芽孢及荚膜染色观察,第三次 细菌的运动性观察及细菌鞭毛染色法,第四次 常见放线菌及霉菌观察,一、微生物接种技术,一）、实验目的,学习微生物接种工具的使用，掌握无菌操作方法，建立有菌概念。,二）、实验原理,在,微生物学实验或科研生产中，要经常地把一定种类的微生物菌种接种或移植到新鲜培养基中。由于我们接种的微生物都是纯种的，所以接种工作都必须在无菌环境下（在无菌室或超净工作台）进行，并严格遵守无菌操作技术。利用接种工具（如接种环、接种
2、铲等）进行菌种的移植。因此无菌操作是接种培养微生物的关键。,三）实验用品,接种环等接种工具、斜面培养基、酒精灯、酒精棉球,四）实验步骤：,1,、接种工具的介绍,接种环、接种钩、接种针、接种圈、接种锄、玻璃涂棒、其他接种工具,2,、无菌操作要点,1,）、要求建立“有菌概念”。,2,）、接种时要有一个洁净的环境，整个操作过程必须在火焰旁进行。,3,）接种环，棉塞一定要拿在手上，不能随便乱丢。,3,、微生物接种技术,1,）、斜面接种技术,从斜面菌种将菌移接至另一斜面培养基的方法，叫做斜面接种,。,接种方法：,A,、,接种前用酒精棉球擦净桌面；,B,、,将试管贴上标签，注明菌名、接种日期、接种人姓名等
3、然后用酒精棉球擦手消毒；,C,、,点燃酒精灯以后，在火焰旁将每一支试管内的棉塞稍微转一下，使其松动，以便在接种时易拔出，并将试管放在试管架上，放在接种台的右前方；,D,、,将菌种和斜面培养基的两支试管，用大拇指和其他四指握在左手中，使中指位于两试管之间的部分，斜向上，并使他们呈水平位置，也可将试管横放在左手掌中央，用四个手指托住试管，大拇指压在试管上，斜面向上；,E,、,右手拿接种环，在火焰上将环的部分烧红灭菌，环以上凡在接种可能进入试管内的部分，均应通过火焰灼烧。（见图,4,）,图,4,接种环灭菌,以下操作，需要使管口靠近火旁,F,、,用右手小指、无名指和手掌拔掉棉塞；,G,、,以火焰灼烧
4、管口，灼烧时应不断转动试管口，使试管口沾染的少量菌得以烧死；,H,、,将烧过的接种环伸入菌种试管内，先将环接触没有长菌的培养基部分，使其冷却，以免烧死被接种的菌体，然后轻轻接触菌体，取出少许，慢慢将接种环抽出试管（图,5,），注意尽量不要使环的部分碰钉子到管壁，取出后不可使环通过火焰；,图,5,从一个试管移种到另一试管,I,、,迅速将接种环在火焰旁伸进另一试管，在斜面培养基上从底部划线到顶部，但不要把培养基划破，也不要使菌种沾染管壁；,J,、,取出接种环，灼烧试管口，并在火焰旁将棉塞塞上，不要用试管去迎棉塞，以免试管在运到时灌入不洁的空气，,K,、,将接种环在火焰上再灼烧灭菌，放回原出后，再腾出手来将棉塞塞紧，将新接种的斜面试管放在试管架上；,L,、,接种后的斜面培养基，放在恒温箱内培养。,2,）、液体接种方法,3,）、穿刺接种方法,4,）、平板接种方法,图,6,穿刺接种,作业：,1,、培养微生物的试管为什么要塞上棉塞？,它的作用是什么？,2,、无菌操作的要点是什么？,
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