1、结束放映,返回目录,获取详细资料请浏览:,PCR,技术扩增,方法,3.,化学方法合成,基因工程的操作过程,*,PCR,技术扩增目的基因,基因工程的操作过程,*,2.,基因表达载体的构建,基因工程的操作过程,*,3.,将目的基因导入受体细胞,植物:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法,动物:显微注射法,微生物:感受态细胞法,基因工程的操作过程,*,4.,目的基因的检测和鉴定,利用,DNA,分子杂交技术,检测目的基因的有无;,利用,分子杂交技术,检测目的基因是否转录;,利用,抗原,-,抗体杂交技术,检测目的基因是否翻译;,利用,个体生物学水平的鉴定,检测重组基因是否表达,*,【,例,1】(2012
2、福建理综,,32),肺细胞中的,let7,基因,表达减弱,癌基因,RAS,表达增强,会引发肺癌。,研究人员利用基因工程技术将,let7,基因导入肺癌,细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。,该基因工程技术基本流程如图,1,。,请回答下列问题。,(1),进行过程,时,需用,_,酶切开载体以,插入,let7,基因。载体应有,RNA,聚合酶识别和结合,的部位,以驱动,let7,基因转录,该部位称为,_,。,(2),进行过程,时,需用,_,酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。,点击,(1),构建基因表达载体时,需要用同种限制酶切割目的基因和载体。载体应有启动子、终止子和标记基因,其中启
3、动子是,RNA,聚合酶识别和结合部位。,答案:,(1),限制启动子,(2),胰蛋白,解,析,考查基因工程的基本过程,图,1,图,2,基因工程的操作过程,*,【,例,1】(2012,福建理综,,32),肺细胞中的,let7,基因,表达减弱,癌基因,RAS,表达增强,会引发肺癌。,研究人员利用基因工程技术将,let7,基因导入肺癌,细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。,该基因工程技术基本流程如图,1,。,请回答下列问题。,(3),研究发现,,let7,基因能影响癌基因,RAS,的表,达,其影响机理如图,2,。据图分析,可从细胞,中提取,_,进行分子杂交,以直接检测,let7,基因是否转录。肺
4、癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中,_(RAS mRNA/RAS,蛋白,),含量减少引起的。,点击,(3),检验目的基因是否,转录,,常用分子杂交技术,,即用,RNA,分子与,DNA,分子进行杂交。,由图,2,知,当,let7,基因转录出来的,miRNA,与会抑制,RAS,蛋白的产生,故肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中,RAS,蛋白含量减少引起的。,答案:,(3)RNA,RAS,蛋白,解,析,考查基因工程的基本过程,图,1,图,2,基因工程的操作过程,*,(2013,浙江宁波期末,,27)ch1L,基因是蓝细菌拟核,DNA,上控制叶绿素合成的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建该种生物缺失,ch1L,基因的变异株细胞。技术路线如图所示,对此描述错误的是,(,),。,A,ch1L,基因的基本组成单位是脱氧核苷酸,B,过程中使用的限制性核酸内切酶的作用是将,DNA,分子的磷酸二酯键打开,C,过程都要使用,DNA,聚合酶,D,若操作成功,可用含红霉素的培养基筛选出该变异株,解析答案,训练,甲地因森林火灾引起的植被受损,其实并没有彻底消灭,属于次生演替;,而乙地火山原因导致植被彻底被破坏,,属于初生演替,。,答案:,A,基因工程的操作过程,本课时内容结束,谢谢!,训练提升,请完成,创新设计,!,