生化课件09.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第九章 体液葡萄糖检验,第一节 概 述,第二节 体液葡萄糖测定,糖是生物体内重要的能源和结构材料。食物中的糖包括,淀粉、糖原、蔗糖和乳糖,等，经消化后转变成单糖，进入体内以糖原的形式储存或以葡萄糖运行于全身。糖的功能主要是,氧化供能，构成机体成分，及转变成脂肪、AA,等。糖的测定主要测定血及尿中的葡萄糖，特殊项目如糖化血红蛋白测定可了解糖尿病疗效观察等。,血糖,3.96.1mmol/L,第一节 概 述,一、血糖的来源与去路,食物糖,肝糖原,非糖物质,氧化供能,糖原,转变为脂,肪、AA等,尿糖,8.8mmol/L,异生,分解,吸收,（二）血糖浓度的调节,1.器官的调节,：肝、肾。,2.激素的调节：,降低血糖的激素：胰岛素。,升高血糖的激素：肾上激素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长激素等。,3.神经的调节：,神经系统通过控制激素的分泌调节血糖。,胰岛素：,是体内唯一降低血糖的激素，由胰岛-细胞合成。,作用：,1.促进肌肉、脂肪组织细胞膜对葡萄糖通透性，,使血容易进入细胞内（肝、脑例外）；,2.加速糖原合成，抑制糖原分解；,3.促进糖氧化；,4.促进糖变脂肪；,5.抑制糖异生,。,高血糖,7.2mmol/L,生理性：饮食性、情感性。（暂时性）,病理性：内分泌功能障碍。（持久性）,典型病例：糖尿病。（三多一少症状）,多食、多饮、多尿、体重减轻。,糖尿病,型：胰岛素依赖型，（青少年为主）,型：非胰岛素依赖型，（中老年为主）,糖代谢紊乱,低血糖,3.2mmol/L,生理性：饥饿时间过长、持续剧烈运动,病理性：胰岛-细胞器质性病变（增生、,肿瘤）,抗胰岛素的激素分泌不足（皮质,功能降低）,严重肝病疾患,酮 症,酮体含量高于正常0.080.49mmol/L，称为酮血症。,引起的原因有糖尿病。糖摄取不足（如饥饿、消化不良和频繁呕吐等）。糖原储积症。碱中毒。,测定方法：,有亚硝基铁氰化钠显色法。,（二）有机化学法,原理：,在热醋酸溶液中，葡萄糖能与邻甲苯胺缩合生成蓝色化合物，颜色深浅在一定浓度范围内与血糖含量成正比。,邻甲苯胺葡萄糖 葡萄糖基胺,希夫氏碱 蓝绿色化合物,缩合,脱水,重排,方法学评价：,1.显色与冰乙酸浓度、加热时间等有关。因此各管条件必须一致。,2.试剂含冰乙酸，使用小心，防腐蚀比色计。,3.轻度溶血无影响，但严重黄疸、溶血和乳糜样高脂血标本应先制备无蛋白滤液后再行测定。,4.特异性不高，除葡萄糖外，果糖、半乳糖、麦芽糖等都可反应，但血中含量甚微，对结果无影响。,（三）酶法,1.己糖激酶法,葡萄糖+ATP 葡萄糖-6-磷酸+ADP,葡萄糖-6-磷酸+NADP 6-磷酸葡萄糖酸内脂+NADPH,NADPH在340nm有一吸收峰，本法特异性高，灵敏度高，干扰因素少，但试剂较贵。2.葡萄糖氧化酶法,葡萄糖+O+H,2,O 葡萄糖酸内酯+H,2,O,2,H,2,O,2,+4-氨基安替比林+酚 红色醌类化合物,HK,G-6-PD,GOD,POD,方法学评价：,1.GOD对-D-葡萄糖呈高特异性。,2.本法不必去除样品中的蛋白质，可直接用作血浆或血清测定。,3.过氧化酶催化的反应可受到尿酸、维生素C、胆红素和谷胱甘肽等干扰。,4.严重黄疸、溶血及乳糜混浊血清应先制备无蛋白滤液，再进行测定。,【参考范围】3.96.1mml/L,【临床意义】,1.生理性或暂时性高血糖,2.病理性高血糖,多见于胰岛素相对或绝对不足。如糖尿病。其它内分泌系统的疾病，如垂体前叶功能亢进，肾上腺皮质功能亢进，甲亢等。严重的肝病；胰腺病变。,3.生理性或暂时性低血糖,4.病理性低血糖,胰岛素分泌过多；严重肝病；对抗胰岛素的激素分泌不足。,二、糖耐量试验,是一种葡萄糖负荷试验，常用于了解机体对葡萄糖的调节能力。,（一）葡萄糖耐量试验,口服或静脉注射一定量的葡萄糖后，血糖急剧升高，且持久不能恢复到原来水平，称为糖耐量降低。如给予大量葡萄糖后，血糖升高不明显，或缓慢地轻度上升，称糖耐量增加。口服或注射一定葡萄糖后，每间隔一定时间测定血糖水平，称为糖耐量试验（GTT）。,适应证：,1.空腹血糖水平在临界值而又疑为糖尿病患者；,2.空腹或餐后血糖浓度正常，但有发展为糖尿病可能的人群；,3.以前耐量试验异常的危险人群；,4.妊娠性糖尿病的诊断；,5.临床上出现肾病、神经病变和视网膜病而又无法做出合理解释者；,6.作为流行病学研究的手段。,病人准备：,1.试验前三天，病人每日饮食含糖量不低于150克，并维持正常活动；,2.影响试验的一些药物应在3天前停用；,3.受试前应空腹1016小时；,4.试验前和试验中，病人精神和身体都处于休息状态；,5.整个试验期间，不可吸烟、喝咖啡和进食等。,葡萄糖负荷量：,成人将75克葡萄糖溶于250ml左右的温开水中，于5分钟内饮入；妊娠妇女用量为100克；儿童按1.75g/kg体重给予，最大值不超过75克，同样于5分钟内服,完。,标本收集：,受试者在服糖前静脉抽血测空腹血糖。服糖后，每隔30分钟抽血样一次，共四次。若疑为反应性低血糖症的病例，可酌情延长抽血时间（口服法可延长至6小时）于抽血同时，每间隔1小时留取尿液作尿糖试验。,影响OGTT的因素主要有：,应激状态；运动量的大小；糖的摄入量；禁食的程度；损伤；药物；内分泌疾病等。,【参考范围】,空腹血糖6.1mmol/L；服糖后3060分钟血糖生高达峰值，一般10 mmol/L；服糖后2小时内恢复至空腹血糖水平。,【,临床意义,】,（1）糖尿病性糖耐量：空腹血糖浓度7.8 mmol/L 葡萄糖峰值超过10 mmol/L，同时出现尿糖；服糖2小时后，血糖水平仍超过7.8 mmol/L，则有助诊价值。若空腹血糖7.8 mmol/L，而2小时的血糖水平在8.09.0 mmol/L 之间者，也可诊断为糖尿病。,（3）糖耐量受损：,表现为轻度糖耐量降低。空腹血糖7.8 mmol/L,但空腹葡萄糖后,30、60、90分钟血糖水平可11.0 mmol/L,而2小时的血糖水平仍在8.011.0 mmol/L之间，称为亚临床或无症状的糖尿病。这类病人往往后期有1/3恢复正常，1/3转为明确的糖尿病，1/3仍为糖耐量受损。,妊娠性糖尿病,由于妊娠性糖尿病致先天性胎儿畸形及胎儿死亡增多，所以对孕妇是否有糖尿病的检测应予重视，尤其对肥胖、直系亲属有糖尿病、有流产、滞胎或畸胎病史的孕妇，宜进行OGTT，以发现糖尿病并即使进行治疗。其方法是在妊娠2428周内，测定口服50克葡萄糖1小时后的血糖浓度。若为7.0 mmol/L以上者，则提示有妊娠性糖尿病的可能性，这些妇女应进一步作OGTT。,三、血清糖化血红蛋白测定,成人红细胞的血红蛋白（Hb）主要是HbA（占90%以上）其它还有HbA,1,（约7%）、HbA,2,（2.5%)和Hb F（0.5%）。,GHb是Hb与糖结合的形成过程称为糖基化作用，是HbA,1,合成后化学修饰的结果。GHb形成取决于血糖浓度及血糖与Hb的接触时间，其次生成量与血中葡萄糖浓度成正比，且反应不可逆。其测定可反映测定前12个月内血糖的平均水平。,【测定方法】,GHb测定方法有层析法、电泳法、比色法、放免法等。最初使用较多的是阳离子交换层析法，现主要使用商品化的微柱法。,【临床意义】,1.糖尿病的诊断,随机检测，8%者多不考虑糖尿病，9%时，预告糖尿病的灵敏度为68%，特异性94%；10%者则有89%为糖尿病。,2.糖尿病患者疗效判断,不能评价近期疗效，但可作为糖尿病长期控制的良好指标，尤以型糖尿病和妊娠性糖尿病的治疗监控更为有效。,3.判断预后,糖尿病合并视网膜病者，如GHb为8%10%，提示病变为中等程度，可用激光治疗；10%为严重程度，预后较差。,四、尿糖测定,（一）定性测定,1.班氏定性实验,2.葡萄糖氧化酶试纸法,（二）尿中糖的鉴定,1.果糖检测 2.戊糖检测,（三）定量测定,常用邻甲苯胺法,【参考范围】,尿糖定性试验阴性；,尿糖定量2.78mmol/24h尿,【临床意义】,1.血糖增高性糖尿：如糖尿病、甲亢、肢端肥大症等。,2.血糖正常性糖尿：肾糖阈降低；妊娠；肾小管重吸收功能受损。,3.暂时性糖尿：食入糖过多；应激性：如脑外伤、急性心肌梗死等。,4.其它糖尿,