毒物分析第八章-.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,*,第8章 农药、毒鼠药及其它毒物分析,2026/2/14 周六,1,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,第八章 农药、毒鼠药及其它毒物分析,第一节 农药,1,，农药分类,根据农药的来源，可分成化学农药、植物农药、微生物农药等；化学农药又可分成:有机氯杀虫剂(,Organochlorine pesticides,OPCs),、有机磷杀虫剂(,OPPs),及拟除虫菊酯(,pyrethroids),类农药等，种类繁多。其中,有机磷杀虫剂中毒案例较多,。,2,，农药的危害,(1),急性中毒作用,(2),慢性中毒作用,(3),对酶的影响,(4),对神经系统的作用,(5),对免疫功能的影响,(6),对生殖功能的影响,(7),致畸、致突变和致癌作用,2026/2/14 周六,2,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,一，,有机磷农药,1,，,有机磷农药,概述,有机磷农药是一类作用强，使用广泛的农药，如管理或使用不当易发生中毒案例。,有机磷农药进入人体后迅速分散到各器官和组织，与胆碱脂酶结合而使其失活。导致神经递质胆碱脂酶的代谢紊乱。使胆碱能神经过度兴奋，乙酰胆碱浓度增加，心率减慢、血管扩张、大汗淋漓、流涎、恶心呕吐、全身抽搐、血压下降、瞳孔扩大、死亡。,应及时用大量阿托品或解磷定解救。,2026/2/14 周六,3,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,2,，有机磷农药的类型,3,，检体及处理,唾液、胃内容物、血、组织均可作检体。,溶剂萃取：因有机磷农药在碱性条件下易分解，需要在中性或弱酸性条件下用苯、氯仿等有机溶剂提取。,固相萃取：若组分特别复杂时可用层析柱分离纯化。,2026/2/14 周六,4,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,4,分析方法,（,1,）化学方法,常用的化学方法有溴化法、定卤素法和碘量法。,（,2,）分光光度法,可以检测自身带有颜色的农药或通过化学反应产生颜色而测定。几乎所有的有机磷农药都可以用磷钼杂多酸或磷钼蓝来检测，此法灵敏度高且不需要农药的标准品。,（,3,）,TLC,法,条件：胶硅,G-CMC,固定相,二氯醌氯亚胺-溴试液显色。,正己烷/丙酮=4:1展开，,Rf,值乐果=0.05，敌百虫=0.28，马拉硫磷=0.70；,正己烷/丙酮=2:1展开，,Rf,值乐果=0.30；,正己烷/二恶烷=9:1展开，,Rf,值乐果=0.32。,（,4,）,GC,或,HPLC,2026/2/14 周六,5,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,三，,拟除虫菊酯类农药,1,，概述,拟除虫菊酯是模拟天然除虫菊酯的化学结构而合成的有机物，多数以无色晶体形式存在，一部分为比较粘稠的液体。在水中的溶解度较小，可溶于多数有机溶剂。,拟除虫菊酯类农药是广谱高效和低毒的农药，使用时对人畜比较安全。但是与有机磷农药混合中毒临床表现严重，死亡率高。,2,，拟除虫菊酯类农药的检测,从化学结构上来看，拟除虫菊酯类农药分子中有发色基团和助色基团可以吸收紫外光，可用紫外或薄层色谱法检测。,2026/2/14 周六,8,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,四，,有机氯农药,有机氯农药是第一代农药，由于其化学性质稳定，在环境和机体中不易被分解和破坏，在生态中有较长的残留期，我国早已经规定停止生产和使用。主要分为氯化苯类（如六六六、六氯苯、滴滴涕）以及环戊二烯类（如氯丹狄试剂）物质。,与有机磷农药相比该类农药为低毒试剂。,五，,有机硫农药,有机硫农药主要作为杀菌剂，属于低毒类农药。一般口服可引起急性中毒，在生产和使用过程中也会对人体造成危害。,2026/2/14 周六,9,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,第二节 杀鼠药分析,毒鼠药物品种较多，无机类杀鼠药主要是磷化物、碳酸钡、氟化钠等；有机杀鼠药有硫脲类衍生物如安妥；有机氟化物如氟乙酰胺，氟乙酸钠；抗凝血类杀鼠药敌鼠、氯敌鼠等。,一、磷化物,1,、磷化物的特点,作为杀鼠药的磷化物主要是磷化锌、磷化钙和磷化铝。这些磷化物在酸性条件或潮湿环境中回产生剧毒的磷化氢气体。磷化物的毒性作用主要与其产生的磷化氢气体有关。,磷化物中毒时可用,1,硫酸铜每隔,5-10,分钟一次服,5mL,催吐，催吐后用,1,：,5000,的高锰酸钾液洗胃。,2026/2/14 周六,10,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,、磷化物的检测,（,1,）磷化锌的检测,磷化锌可以被高锰酸钾氧化，剩余的高锰酸钾用草酸反应掉，用高锰酸钾的颜色变化来指示终点。,（,2,）磷化氢的检测,用硝酸银试纸检测，磷化氢与银离子反应生成黑色的磷化银。,2026/2/14 周六,11,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,二、含氟杀鼠药,1,、含氟杀鼠药的特点,含氟杀鼠药里使用较多的有氟乙酰胺，氟乙酸钠等几种，引起中毒的多是氟乙酰胺。氟乙酰胺在体内代谢排泄缓慢，易导致蓄积中毒，由于有二次药害，早已禁止使用。,氟乙酰胺口服中毒者应立即催吐，继之用1,：,5000,的高锰酸钾液洗胃，再用硫酸镁或硫酸钠导泻。,、磷化物的检测,（,1,）氟乙酰胺，氟乙酸钠为含氟乙酰基的化合物，在强碱性条件下和硫代水杨酸作用后，与铁氰化钾生成红色化合物，红色化合物溶于氯仿可用于定性和定量检测。,（,2,）氟离子选择性电极测定无机氟化物。,2026/2/14 周六,12,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,三、常见的其他杀鼠药,毒鼠药中毒案例为：毒鼠强和安妥,1,、毒鼠强（,Tetramine,）,又名没鼠命、四二四，化学名,:2,6-,二硫,-1,3,5,7-,四氮三环，,C,4,H,8,N,4,O,4,S,2,，,MW=240.27,。,白色粉末，化学性质稳定。,255-256,分解。不溶于水，难溶于乙醇,易溶于丙酮等有机溶剂。在环境中不宜降解。,2026/2/14 周六,13,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,，毒性作用,毒鼠强经消化和呼吸道粘膜吸收。0.5-1,h,发病,LD50=0.1mg/kg,致死剂量约为12,mg。,毒性主要为兴奋中枢神经,强烈致惊厥作用,导致呼吸衰竭而死亡。以原形存留体内,通过肾脏以原形排出。中毒10,d,后血中仍可检出毒鼠强。,，分析方法,目前对毒鼠强浓度的分析测定方法主要有:漫反射,FT-IR,光谱法、,气相色谱测定法、气相色谱-质谱联用法等。,固相萃取-,GC/NPD(,氮磷检测器)法检测速度快而简便、准确。,该方法30分钟内可得结果，血中最低检测限为0.002,m,g/ml，,也用于检,出水中毒鼠强浓度。,2026/2/14 周六,14,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,2,、安妥,(,a,-,萘基硫脲，,a,-Naphthylthiourea),白色结晶性粉末，,MP:198,。工业品为蓝灰色粉末，,MP:182,。难溶于水。损害鼠肺毛细血管，形成肺水肿，死于洞外。,，人中毒症状：中毒缓慢，出现胃内发热，恶心呕吐，重者呼吸困难、痉挛、昏迷。,，分析：检体捣碎，适量丙酮温热提取。过滤蒸干，残渣备用。,，显色反应,:,残渣少许溶于,80%,醋酸，加,20%,铁氰化钾数滴，出现绿色然后变成稳定的兰色。,，偶氮染料法,:,加稀硫酸,水解，加亚硝酸钠试剂重氮化，,加,-,萘酚显红色。,2026/2/14 周六,15,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,第三节、金属毒物分析,一、砷：,Arsenic，As，,原子量74.9,，性状,有灰、黄、黑三种同素异形体。沸点：616、熔点：817、相对密度：5.73(克/立方厘米)、不溶于水。硝酸、王水等将砷氧化成砷酸。,灰砷(,Grcy arsenic),又称金属砷(,Metallic arsenic),具有金属光泽的斜方六面体。在干燥空气中和常温下稳定，性脆。,黄砷(,Yellow arsenic),黄色透明，有蒜臭味，呈软蜡状小结晶(等轴晶系)，与水蒸气同时挥发，还原性强。常温下不稳定，微热或光照易变成灰色砷。,黑砷(,Black arsenic),硬如玻璃的无定型块状体，脆。具有灰砷，黄砷的中间性质。,2026/2/14 周六,16,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,，毒理,砷及其化合物的毒性，与在水中的溶解度有关，元素砷不溶于水，故无毒。短期接触对眼睛，皮肤和呼吸道有刺激性。长期或反复接触可引起皮炎，皮肤、肝和神经损伤。,，诱变性：砷是一种强染色体畸变剂，可造成染色体断裂，易位，形成基因重排，激活酶基因而致癌。云南锡矿矿工肺癌患者染色体畸变率和微核率均高于对照。砷可引起,DNA,损伤并导致蛋白质交联及,DNA,链断裂。,，致癌性：1979年国际癌症研究中心根据罗得西亚长期饮用含砷污染河水及台湾某地4万余名饮用含砷水居民的皮肤癌显著高发的事实，确认无机砷化物是人类皮肤及肺的致癌物。此外长期服用亚砷化钾(,Flower,液)等治疗牛皮癣、白血病、风湿热的患者，也可诱发皮肤癌。,2026/2/14 周六,17,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,，体内代谢,无机砷及其化合物经呼吸道、消化道，皮肤和粘膜进入人体血液，9599%在红细胞内与血红蛋白结合，随血液分布到全身各个器官，大部分贮存在肝脏、肾、脾、胃肠道壁及肌肉处，从而导致神经系统、肝、肾、消化道、毛细血管损害。,，中毒机制,砷对蛋白质的巯基具有很大亲合力。尤其与,丙酮酸氧化酶,的巯基结合成复合体，使酶失去活性，导致细胞死亡。砷还能,抑制磷酸酯酶,，损害染色体，影响细胞的有丝分裂。,砷还影响,6,-,磷酸葡萄糖脱氢酶,，,乳酸脱氢酶、细胞色素氧化酶,，使细胞呼吸及氧化过程减低。由於组织代谢和营养障碍，损害神经细胞，引起中毒性神经衰弱综合征和多发性神经炎及肾、肝、心等实质脏器病变。,2026/2/14 周六,18,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,，分析方法,，总砷：,AAS ，,尿砷：尿砷检验时尿砷波动范围较大，需有本地区尿砷正常值。不同地区的正常值不同：上海：02.94,mol/L（00.22mg/L）；,北京：01.17,mol/L（00.088mg/L）。,元 素,As Ba Hg Cr Pb,测定波长(,nm)193.7 553.6 253.7 357.9 217.0,火焰类型*,n N A A A,灵敏度(,m,g/ml)0.5 0.5 1.0 0.03 0.2,*,n:,非火焰,N:,氧化亚氮-乙炔,A:,空气-乙炔,2026/2/14 周六,19,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,二，钡（,Ba）,（,1,）钡的特点,BaCl,2,BaCO,3,Ba(NO,3,),2,等可溶性钡盐进入体内引起中毒。如重晶石(混有,BaCl,2,的粗,BaSO,4,),作钡餐透视造成急性中毒而死亡。,BaCl,2,中毒量为0.20.5,g.,急性中毒症状为:口腔、咽喉部干燥,恶心呕吐、腹痛腹泻、头痛头晕、口周发麻、继而肌肉麻痹(臂肌颈肌舌肌膈肌)，心率不齐、血压升高、心肌麻痹而死亡。,（,2,）钡的检测,1,、形成沉淀反应,2,、玫瑰红酸钠法鉴定钡离子,3,、分光光度法测定：偶氮磺,与钡离子有灵敏的显色反应。,2026/2/14 周六,20,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,三，汞（,Hg）,（,1,）汞的特点,汞蒸汽、汞盐可引起汞中毒，,HgCl,2,中毒量为0.10.2,g,毒性由汞离子引起，和血液蛋白质的巯基有极强的亲和力，使多种酶失活、蛋白质凝固、组织坏死。损坏肾脏，造成血尿、蛋白尿等症状。急性中毒数分钟即可出现:口腔金属味、恶心、呕吐、腹痛、腹泻、便血、发冷、无力、血压下降、体温下降、呼吸困难、尿毒症、休克、死亡。,（,2,）汞的检测,1,、汞的常规检测,砷、锡常常影响汞的测定，用硫化氢沉淀上述混合物，在沉淀中加入浓盐酸并加热，硫化汞与三氧化二砷没有变化，锡的硫化物则生成氯配合离子而溶解。在剩余的沉淀中加入过量碳酸胺，微热，此时若有黑色残渣初步说明有汞存在。,2026/2/14 周六,21,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,2,、雷因需实验,原理：以纯铜为还原剂，将一些化合物还原成金属单质。,3,、亚汞离子的鉴定,3.1,氨法鉴定,3.2 NaNTU,法,在硝酸,-,磷酸的混合介质中，亚汞离子与对苯磺酸钠硫脲（,NaNTU,）产生灰黑色沉淀，是鉴定亚汞离子的特效方法。,4,、微量汞的分析测试,4.1,吸光度法 以双硫腙为显色剂,4.2,原子吸收法,2026/2/14 周六,22,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,四，铅（,Pb）,，性状,银灰色重金属，质柔软，延性弱，展性强。空气中表面易氧化而失去光泽，变灰暗。溶于硝酸，热硫酸、有机酸和碱液。不溶于稀酸和硫酸。具有两性：既能形成高铅酸的金属盐，又能形成酸的铅盐,。,，毒理,被吸收的铅主要通过与蛋白质分子中的巯基结合，一直多种酶的活性而发挥其毒性作用铅对中枢和外周神经系统都有作用，一般认为这种作用与自由基存在密切关系,2026/2/14 周六,23,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,（,3,）铅的检测,1,、铅的常规检测,铅离子与硫酸生成白色的硫酸铅沉淀，沉淀溶于热的浓醋酸胺或氢氧化钠溶液中，将此溶液以醋酸酸化并加入重铬酸钾，得到黄色的重铬酸铅沉淀。,2,、铅的分光光度法分析,铅与显色剂双硫腙产生颜色后，用分光光度法测定其含量。,3,、大气中微量铅用火焰原子吸收光谱法测定,4,、全血或尿样中的铅用示波极谱法测定,5,、水中的铅用石墨炉原子吸收光谱法测定,2026/2/14 周六,24,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,分析测定方法,2026/2/14 周六,25,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,第四节、食品中残留有害物质分析一、亚硝胺类化合物,1,、亚硝胺的形成,亚硝酸盐是亚硝胺类化合物的前体物质。亚硝酸盐广泛存在于自然界环境中，尤其是在食物中。因此，亚硝酸盐每天都会随着粮食、蔬菜、鱼肉、蛋奶进入人体。在自然界中，亚硝酸盐极易与胺化合，生成亚硝胺。在人体胃的酸性环境中，亚硝酸盐也可以转化为亚硝胺。在人们日常膳食中，绝大部分亚硝酸盐在人体内像“过客”一样随尿排出体外，只是在特定条件下才转化成亚硝胺。所谓特定条件，包括酸碱度、微生物和温度。所以，通常条件下膳食中的亚硝酸盐不会对人体健康造成危害，只有过量摄入亚硝酸盐，体内又缺乏维生素,C,的情况下，才会对人体引起危害。此外，长期食用亚硝酸盐含量高的食品，或直接摄入含有亚硝胺的食品，有可能诱发癌症。,2026/2/14 周六,26,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,2,、亚硝胺的检测,气相色谱,-,热能分析仪法,可测定啤酒中挥发性的亚硝胺。,GC-MS,本法可用于酒类、肉及肉制品、蔬菜、豆制品、调味品、茶叶等食品中,N-,亚硝基二甲胺、,N-,亚硝基二乙胺、,N-,亚硝基二丙胺、,N-,亚硝基吡咯烷含量的测定。,2026/2/14 周六,27,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,二、亚硝酸盐和硝酸盐,1,、亚硝酸盐的特点,亚硝酸盐主要指亚硝酸钠，亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。食入,0.3,0.5,克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡。亚硝酸盐中毒是指由于食用硝酸盐或亚硝酸盐含量较高的腌制肉制品、泡菜及变质的蔬菜可引起中毒，或者误将工业用亚硝酸钠作为食盐食用而引起，也可见于饮用含有硝酸盐或亚硝酸盐苦井水、蒸锅水后，亚硝酸盐能使血液中正常携氧的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，因而失去携氧能力而引起组织缺氧。,2026/2/14 周六,28,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,2,、亚硝酸盐中毒症状：,2.1,头痛、头晕、无力、胸闷、气短、心悸、恶心、呕吐、腹痛、腹泻及口唇、指甲、全身皮肤、粘膜紫绀等,2.2全身皮肤及粘膜呈现不同程度青紫色（高铁血红蛋白血症引起的紫绀）。,2.3,严重者出现烦燥不安、精神萎靡、反应迟钝、意识丧失、惊厥、昏迷、呼吸衰竭甚至死亡。,3,、亚硝酸盐和硝酸盐的检测,3.1,比较常用的亚硝酸盐检测法是重氮偶合比色法,3.2,溴酸钾为氧化剂催化光度法,利用亚硝酸根离子催化某中氧化剂氧化有机染料，使其吸光度减弱，吸光度的变化与浓度有定量关系。,3.3 GC-MS,3.4,化学发光法,2026/2/14 周六,29,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,三、真菌毒素,真菌毒素是一些真菌,(,主要为曲霉属、青霉属及镰孢属,),在生长过程中产生的易引起人和动物病理变化和生理变态的次级代谢产物，毒性很高。按化学结构计算，估计有,300,种真菌代谢产物对人类和动物是有毒的。代表性的真菌毒索有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、展青霉素、单端孢霉烯族毒素、玉米赤霉烯酮、伏马毒素、杂色曲霉菌素、串株镰刀菌素、桔霉素等。,1,、黄曲霉素,这是一类毒性极强的物质，其毒性是氰化钾的,10,倍，具有强致癌性和强免疫抑制性，即使在含量极低时仍具有很大的毒性。黄曲霉素中毒症状主要为发热、呕吐、食欲减退、黄疸，严重的出现腹水、下肢浮肿、肝脾肿大。急性中毒主要损害肝脏，表现为肝细胞坏死和胆管上皮细胞增生等；慢性中毒则表现为发育迟缓、肝细胞变性甚至肝硬化等。,黄曲霉素的检测：,TLC,2026/2/14 周六30,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,2,、杂色曲霉菌素,杂色曲霉菌素在自然界中广泛存在，因结构与黄曲霉素相,似，可以转化为黄曲霉素。急性中毒的病变特征是肝、肾坏死；亚急性与慢性毒性中毒特征性病变是皮肤和内脏器官高度“黄染”，马属动物“黄肝病”实质就是杂色曲霉菌素中毒。许多试验已经证明，杂色曲霉菌素是继黄曲霉素之后具有较强致癌作用的因子。,2026/2/14 周六,31,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,四、二,恶,英,1,、二恶英的结构和性质,二噁英（,dioxin,），俗又称二恶因。属于氯代三环芳烃类化合物，是由,200,多种异构体、同系物等组成的混合体。其毒性以半致死量,(LD50),表示。比氰化钾要毒约,100,倍，比砒霜要毒约,900,倍。为毒性最强，非常稳定又难以分解的一级致癌物质。它还具有生殖毒性、免疫毒性及内分泌毒性。,2,、二恶英的来源,1,、在制造包括农药在内的化学物质，尤其是氯系化学物质,象杀虫剂、除草剂、木材防腐剂、落叶剂（美军用于越战）、多氯联苯等产品的过程中派生；,2,、是来自不完全燃烧与热解。,3,、光化学和生化反应,2026/2/14 周六,32,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,3,、二恶英的毒性,3.1,、致死与废物综合症,3.2,、胸腺萎缩,3.3,、氯痤疮,3.4,、肝毒性,3.5,、免疫毒性,3.6,、生殖和发育毒性,2026/2/14 周六,33,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,4,、二恶英的检测,4.1,、提取和净化,1.1,碱分解法,1.2,丙酮,/,正己烷振荡提取法,1.3,草酸钠,-,乙醇,-,乙醚,-,正己烷提取法,4.2,、,GC-MS,法 可进行定量定性分析,2026/2/14 周六,34,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,五、食品添加剂,1,、瘦肉精,又称盐酸克伦特罗,(Clenbuterol Hydrochloride),羟甲叔丁肾上腺素。,C,12,H,18,C,l2,N,2,O.HCl=313.65,）。,、由来,80,年代初，美国意外发现，将一定量的盐酸克伦特罗添加在饲料中，可明显促进动物生长，并增加瘦肉率。首先被用于赛马的饲养。,随后，国内外部分大专院校、科研院所将其作为开发项目向饲料加工及养殖专业户推广这种新型饲料添加剂。饲料中添加适量盐酸克伦特罗，可使猪等畜禽生长速率、饲料转化率、瘦肉率提高,10,以上。因此又称,瘦肉精。,2026/2/14 周六,35,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,、毒性作用,西班牙发现有,43,个家庭的成员在一次吃了牛肝后，发生集体食物中毒。经查证，该头牛用添加盐酸克伦特罗的饲料喂养。,1998,年,5,月，香港居民因食用猪内脏，造成,17,人中毒。广东高明市人民医院在一周内接诊,7,例因喝猪肺汤而中毒的患者。,毒鼠强经消化和呼吸道粘膜迅速吸收。人进食后,0.5-1h,内发病，,LD50:0.1mg/kg,，致死剂量约为,12mg,。毒性主要为兴奋中枢神经，强烈的致惊厥作用。导致呼吸衰竭而死亡。以原形存留体内。通过肾脏以原形排出。中毒,10d,后血中仍可检出毒鼠强。,、分析方法,有气相色谱法、气象色谱,-,质谱联用、漫反射,FT-IR,光谱法等。其中以固相萃取,-GC/NPD,法检测速度较快而简便、准确。该方法,30,分钟内可得结果，血中最低检测限为,0.002,m,g/ml,。,2026/2/14 周六,36,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,2,、孔雀石绿,二甲氨基三苯基甲烷，,C,23,H,25,N,2,CI,，,MW:365.,易溶于水和乙醇，深绿色结晶状固体。,1936,年开始，许多国家的水产养殖业曾经采用孔雀石绿杀虫及杀灭鱼体外的寄生虫和鱼卵中的霉菌。孔雀石绿还广泛用做丝绸、羊毛、皮革和纸张的染料。,孔雀石绿在鱼体内长时间残留。进入人或动物机体后，代谢成脂溶性无色孔雀石绿。研究发现，给小鼠无色孔雀石绿,104,周，其肝脏肿瘤明显增加。还能引起动物肝、肾、心脏、脾、肺、眼、皮肤等脏器和组织变性。美、欧及我国于,2002,年规定，禁止在渔场中使用孔雀石绿。,2026/2/14 周六,37,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,HPLC,测定水产品中孔雀石绿残留量,【,原理,】,以乙酸胺盐溶液和乙腈提取样品中的孔雀石绿和无色孔雀石绿，经液,-,液萃取，固相萃取，,HPLC-C18,柱，,HPLC,外标法定量。,【,仪器,】,高效液相色谱仪,:uv,检测器、匀浆机；离心机；振荡器；旋转蒸发器、固相萃取柱、,PRS,柱、中性氧化铝柱、柱后氧化柱。,【,操作方法,】,样品处理,：鱼去鳞、皮，沿背脊取肌肉；虾、蟹、甲鱼等取可食部分；样品切块、混匀。称取适量，依次加盐酸羟胺溶液、对甲苯磺酸溶液和乙酸铵溶液，匀浆。转移到三角瓶，加碱性氧化铝，振荡，离心，分出上清液。,分离纯化,液,-,液萃取,:,上清液移入分液漏斗，加入水、二氯甲烷，剧烈振摇，静置,1 h,。收集下层液体，再加入二氯甲烷，振摇，静置，分层后收集下层液体。在,35,下减压旋转蒸发浓缩。固相柱萃取：中性氧化铝柱在前，,PRS,柱在后,两柱串联。用乙腈预洗，然后将浓缩液加乙腈混匀后缓慢加入柱中。洗脱收集,:,弃去中性氧化铝柱，用水洗,PRS,柱，洗脱液弃去；加入乙腈,:,乙酸铵溶液,=11(pH4.5),，收集洗脱组分，经聚四氟乙烯膜,(,孔径,0.45um),过滤，备用。,2026/2/14 周六,38,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,样品测定,测定条件,：色谱柱：,C18,柱，,250mm4.6mm,；柱后氧化柱,:35mm 4.6mm,；乙腈,:,乙酸铵溶液,(0.125mol/L,，,pH4.5)=8020,流动相；流速,:2mL/min,；柱温,:35,；进样量,:50L,；检测波长,:588nm,或,618nm,。,测定方法,：分别注入,50L,浓度为,0.1g/mL,的孔雀石绿溶液、无色孔雀石绿工作溶液及样品提取溶液于液相色谱仪中，按上述色谱条件进行色谱分析，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内。根据标准样品的保留时间定性，外标法定量。,【,结果,】,方法回收率,70,；,检测限：孔雀石绿为,2g/kg,；无,色孔雀石绿为,4g/kg,；批间方法,变异系数,15,；线性范围：孔,雀石绿标准液,0.01,0.40 g/ml,；,无色孔雀石绿标准液,0.02,0.40,g/ml,。,2026/2/14 周六,39,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,1.,下列各种检材中,属体内检材的是,(c)A.,胃内容物,呕吐物,排泄物,B.,排泄物,呕吐物,组织,C.,血液,组织,尸体腐泥,D.,呕吐物,胃内容物,血液,2.,下列毒物中不能用,NaOH,反提净化的毒物是,(D)A.,巴比妥,B.,吗啡,C.,敌鼠,D.,敌敌畏,3.,在,毒物分析,中直接应用光谱法常常受到限制,其主要原因是,(C)A.,直接应用光谱法无法定量,B.,直接应用光谱法检测需要标准对照品,而其他方法不用,C.,毒物分析检材常很复杂,而光谱法本身不具有分离能力,D.,光谱法所需仪器极其昂贵,练习题,2026/2/14 周六,40,新疆医科大学药学院药分/分析教研室,