实验二基础培养基、细菌接种及其常用生化反应.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,实验二基础培养基、细菌接种及其常用生化反应,实验目的,了解细菌常用培养基,掌握细菌的分离培养技术及纯种移种法,熟悉细菌各种生长现象,熟悉细菌常用生化反应,实验内容,操作-细菌接种法,分离培养法平板划线法（,葡萄球菌/大肠埃希菌,）,纯种培养法,斜面培养基接种法（葡萄球菌/大肠埃希菌）,半固体培养基接种法-穿刺接种法（大肠埃希菌/痢疾杆菌）,液体培养基接种法（葡萄球菌/大肠埃希菌/痢疾杆菌）,示教,细菌的生长现象,液体、固体、半固体培养基,常用生化反应,乳糖发酵试验,Indol试验,硫化氢试验,尿素分解试验,细菌生长繁殖的条件,充足的营养物质,水，碳源，氮源，无机盐，生长因子,合适的外界环境,温度,酸碱度,气体,渗透压,适合于细菌生长繁殖需要的各种营养物质及在PH(7.27.6)条件下配制而成的基质。,培养基配成后灭菌,培养基,培养基（按物理性状分类）,液体培养基,固体培养基:,2,3%of agar,平板：划线分离，菌落计数，分离纯化,斜面：纯种移种,半固体培养基:,0.,1,0.5%,of agar,观察穿刺线、保存菌种,斜面接种法,（1）用左手握住菌种管和斜面培养基管，右手持接种环或接种针。,（2）用右手小指与手掌、小指与无名指分别拔出两管的棉塞，将管口通过火焰灭菌。,（3）用接种环或接种针伸入菌种管内，挑取用来接种的菌苔。,（4）伸入斜面培养管内，先从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上蜿蜒划线。,（5）接种完成之后，用火焰灭菌培养管口，并塞上棉塞，置于37培养。,半固体培养基接种法,（1）用左手握住菌种管和半固体培养管，右手持接种针,（2）用右手小指与手掌、小指与无名指分别拔出两管的棉塞，将管口通过火焰灭菌。,（3）用接种针伸入菌种管内，挑取用来接种的菌苔。,（4）垂直刺入半固体中心，至近管底部，然后沿穿刺线退出。,（5）塞回棉塞，接种针重新灭菌。接种完毕，于37培养1824h，观察生长情况。,液体培养基接种法,（1）用灭菌接种环挑取用来接种的菌苔。（2）在试管内壁与液面交界处轻轻研磨，使细菌均匀得散落在液体培养基中。,示教：,细菌在培养基中的生长情况,In liquid medium,菌膜,菌沉淀,均匀浑浊,对照,On solid medium,：,菌落,菌苔,In semisolid medium,：,1、3：有动力,2：无动力,葡萄糖糖发酵试验,大肠埃希菌产酸产气,产碱杆菌 不发酵 ,伤寒沙门菌产酸不产气 ,Indol试验,大肠杆菌 出现红色,肖氏沙门菌不出现红色-,硫化氢试验,大肠杆菌：不变色者为 阴性,变形杆菌：穿刺线部位呈黑褐色者 阳性,尿素分解试验,痢疾杆菌：不变色者为 阴性,变形杆菌：红色 阳性,