大规模细胞培养与细胞工厂.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,细胞工厂,细胞工厂,产品与竞争,市场,应用,内容,一）动物细胞培养与细胞工厂,二）生物制品,三）疫苗,四）现代生物技术与基因工程,五）单克隆抗体与抗体药物,六）干细胞与体细胞治疗,我们熟知的细胞培养,动物细胞培养,动物细胞培养技术,1,）无菌环境：超净台、安全柜,2,）生长环境：,CO2,培养箱,3,）营养环境：培养基,4,）,贴壁环境：培养瓶（皿）等、,细胞工厂,动物细胞的形态,贴壁细胞,：,细胞的生长必须有可以贴附的支持物表面，依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长、增殖，当细胞在该表面生长后，一般形成两种形态，即成纤维样细胞型或上皮样细胞型,悬浮细胞：悬浮状态生长，如淋巴细胞、,Namalwa,细胞,兼性贴壁细胞：中国仓鼠卵巢细胞、小鼠,L929,细胞,（一）贴附型：,大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依赖性细胞,贴附,:,是大多数有机体,细胞,在体内,生存,和,生长发育,的,基本存在方式,结果,:,基于贴附特性，使细胞与细胞之间相互结合形成组织，有机体的绝大多数细胞必须,贴附,于一,固相表面,才能,生存,和,生长,。,培养时：,这些细胞被放到体外环境中以后,同样需要贴附于某一固相表面才能生存和生长，因而,属于贴附型细胞,贴附,(,锚定或锚着,),依赖型,(,性,),细胞：唯有贴附于固相表面才能生存的细胞,贴附,生长型细胞,细胞培养常用的培养瓶、培养皿、,6,孔板、,96,孔板,细胞贴附材料与表面,贴附的固相表面材料：,玻璃、塑料（聚苯乙烯）,玻璃：本身具有亲水性，适于细胞贴壁,塑料：没有亲水性，不能使细胞贴壁，所以必须在,塑料表面进行亲水性接枝（等离子处理）,（二）悬浮型：,见于少数特殊的细胞，如某些类型的癌细胞及白血病细胞。胞体圆形，不贴于支持物上，呈悬浮生长。这类细胞容易大量繁殖。,概念：,培养时,不贴附于底物而呈悬浮状态生长,或以机械方法使保持悬浮状态下生长,来源：,自血，脾或骨髓，血中白细胞癌肿细胞,特点：,在,悬浮中生长良好,细胞,圆形,，单个或小细胞团,优点：,生存空间大，,提供数量大，传代方便,(,不需消化,),，,易于收获，,可获得稳定状态,缺点：,纯化不方便，不能通过离心将死、活细胞分离,悬浮生长型细胞,悬浮培养磁力搅拌器,大规模细胞培养,细胞工厂培养技术在大规模细胞培养中的应用,.doc,转瓶培养的缺点,转瓶技术为传统的贴壁细胞培养技术，细胞接种在旋转的圆筒形培养器,-,转瓶中，培养过程中转瓶不断旋转，使细胞交替接触培养液和空气。,缺点：劳动强度大，占地空间大，单位体积提供细胞生长的表面积小，细胞生长密度低，瓶间差异较难控制等，因而难以产业化或规模化生产。,重要的是：转瓶由于不是静止培养，产品质量经常达不到要求或由于细胞易破碎而存在,DNA,毒性潜在危险，据称国家准备淘汰转瓶生产技术。,细胞工厂,用于大规模细胞培养与生产,细胞工厂,关键技术：,贴壁处理：高真空等离子接枝表面处理（,know-how:,接枝材料与接枝技术,）,材料性能：生物相容性（无细胞毒性）,多层焊接技术：密封性与牢固性,灭菌技术：,Y,射线辐照,细胞工厂竞争,Nunc,Corning,DHS,DHS,细胞工厂,DHS,大规模细胞培养系统 单页,.pdf,Nunc Cell Factory,Corning CellSTACK Chamber,Choice of traditional surface treatment(,TC,),new Corning,CellBIND Surface,for enhanced cell attachment,or,Ultra-Low Attachment Surface,for reduced cell attachment,Corning CellSTACK Chamber,三种细胞工厂的比较,材料：均为,PS,塑料,表面处理：各自的,Know-how,顶层：,DHS,同,Nunc,便于显微镜观察细胞生长情况,焊接工艺：,Nunc,采用超声焊接，,Corning,采用特殊胶粘接，,Corning,的更加牢固（不易开裂），所以,DHS,采用,Corning,的粘接工艺,只有,DHS,是可以定制任意层的细胞工厂,细胞工厂的使用,.easyfillNUNC_EasyFill_FINAL_WM_0510.wmv,实验室应用：替代培养瓶及多层培养瓶,细胞培养的评价,贴壁率,细胞生长密度,细胞形态,毒力测定,谢谢！,欢迎交流：,鼎昊源科技,zhonglm,