1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验,11,植物的组织培养,实验目的：,1.,进行菊花的组织培养,2.,尝试植物激素的应用,快速繁殖,植物组织培养技术有何意义？,我国用花药培养法先后培育出优质高产的经济作物、粮食和蔬菜等新品种，广泛应用于果树和花卉的快速繁殖。,借助于组织培养生产人工种子，解决某些作物品种繁殖力差、结子困难或发芽率低等问题。,生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如：紫杉醇，生物碱、紫草素等。,转基因植物的培育,植物去
2、病毒,基础知识回顾,（一）植物组织培养的基本过程,1.,细胞全能性,2.,细胞分化的概念；,3.,离体植物细胞的脱分化和再分化。,植物组织培养的基本过程,基础知识回顾,（二）影响植物组织培养的因素,培养基配制,外植体的选取,消毒接种,培养,移栽和栽培等。,1,、外植体的选取,不同植物的组织培养难度不同,同一种植物的不同组织培养难度不同,2,、培养基的配制,(MS,培养基,),大量元素：,C,、,H,、,O,、,N,、,P,、,K,、,Ca,、,Mg,、,S,微量元素：,B,、,Mn,、,Cu,、,Zn,、,Fe,、,Mo,、,I,、,Co,有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等,植物激素：
3、生长素、细胞分裂素、赤霉素等,3,、不同植物激素使用顺序和使用量,影响植物组织培养的因素,4,、消毒,在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：,5,、,pH,、温度、光照,菊花：,pH=5.8,温度控制在,1822,每日光照,12h,植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要的各种营养物质，这些营养物质同样为细菌等微小的生物提供了适合的营养。在这种培养基上，细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培养要想取得成功，必须有效地防止细菌等的污染，保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌
4、为了达到这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。,实验材料用具,培养瓶、镊子、超净台、灭菌锅、封口膜和橡皮圈、有棉球的广口瓶、酒精灯、三角漏斗、培养皿,MS,培养基,萘乙酸、苄基腺嘌呤,发芽培养基,生根培养基,制备,MS,固体培养基,外植体消毒,接种,生芽,栽 培,实验过程,移 栽,冲洗,酒精,无菌水冲洗,氯化汞,无菌水冲洗至少三次之上,生根,此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养。,在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程。,1,
5、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？,2,、培养过程中为什么需要进行光照,思 考,？,1,、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）,2,、外植体的消毒（酒精、氯化汞）,3,、接种的无菌操作（酒精、酒精灯,灼烧）,4,、无菌箱中的培养；,5,、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,3,、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？,4,、,激素使用的先后顺序对细胞分裂和分化的影响。,使用顺序,实验结果,先生长素，后细胞分裂素,有利于分裂但不分化,先细胞分裂素，后生长素,细胞既分裂也分化,同时使用,分化频率提高,生长素细胞分裂素比值,结果,比值高时,促根分化，抑芽形成,比值低时,促芽分化，抑根形成,比值适中,促进愈伤组织生长,5,、激素的用量比例对细胞分裂和分化的影响,结果分析与评价,（一）对接种操作中污染情况的分析,（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化,（三）是否进行了统计、对照与记录,（四）生根苗的移栽是否合格,
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