细胞培养的必备设施常用器材和培养基.ppt

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,细胞培养的必备设施常用器材和培养基,（优选）细胞培养的必备设施常用器材和培养基,二、超净台,三、恒温培养箱,恒温培养箱,CO,2,培养箱,四、其他设备,倒置显微镜,电热鼓风干燥箱,电子天平,恒温水浴箱,离心机,压力蒸汽消毒器,冰箱,待上述两溶液中的“溶质”全溶后，将它们混合，再用双蒸水补至1000mL，向其中加2mL氯仿作为防腐剂，置4保存。,待上述两溶液中的“溶质”全溶后，将它们混合，再用双蒸水补至1000mL，向其中加2mL氯仿作为防腐剂，置4保存。,橡皮器材的消毒处理方法,1000mL,其中加氯仿2mL作防腐剂，置40保存,氯化钠(NaCl)8g,加去离子水或双蒸水至1000mL,氯化钾(KCl)0.,橡皮器材的消毒处理方法,待上述两溶液中的“溶质”全溶后，将它们混合，再用双蒸水补至1000mL，向其中加2mL氯仿作为防腐剂，置4保存。,77g加去离子水或双蒸水至1000mL,(2)母液乙(20)配法,细胞培养的必备设施常用器材和培养基,氯化钾(KCl)0.,04g，KH2PO4(A.,77g加去离子水或双蒸水至1000mL,1000mL,其中加氯仿2mL作防腐剂，置40保存,细胞培养的必备设施常用器材和培养基,第三节 常用溶液、培养液及其配制,待上述两溶液中的“溶质”全溶后，将它们混合，再用双蒸水补至1000mL，向其中加2mL氯仿作为防腐剂，置4保存。,（二)几种常用溶液的配制方法,橡皮制品(最好是硅制品)主要是各种瓶或试管的塞子、盖子。,（一）配液时的注意事项,氯化钾(KCl)0.,取母液甲和母液乙各一份，加双蒸水18份，分装后，塞好瓶塞，挂上标志。,橡皮器材的消毒处理方法,R)8g，MgSO4.,磷酸氢二钠(无水)28.,（优选）细胞培养的必备设施常用器材和培养基,第三节 常用溶液、培养液及其配制,04g，KH2PO4(A.,第二节 细胞培养常用器材及处理方法,一、玻璃器材,培养皿,滴流瓶,刻读吸管、离心管等,培养瓶,烧杯、量筒等,三角烧瓶,玻璃器材的消毒处理方法,清洁液浸泡，自来水冲,10,次，单蒸水洗,2,次，培养瓶再用三蒸水浸泡过夜，烘干，包装，灭菌,二、塑料器材,多孔培养板,培养皿,培养瓶,塑料器材的消毒处理方法,用,3%HCl,或,2%NaOH,溶液浸泡过夜（单用或交叉处理）-水洗,10,次-单蒸水,2,次-三蒸水浸泡过夜-烘干-紫外线或辐射灭菌,三、橡皮器材,橡皮制品,(,最好是硅制品,),主要是各种瓶或试管的塞子、盖子。,橡皮器材的消毒处理方法,5%NaOH,煮-水洗-,4%,盐酸煮-水洗,810,次-单蒸水洗三次、二蒸水洗一次。,四、金属器材,剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头等,金属器材的消毒处理方法,纸擦去表面的油脂-洗衣粉煮沸，或用,1%,碳酸氢钠煮沸,15,分钟-水洗-,95%,酒精纱布擦干-包装灭菌,五、其他物品纱布,注射器和针头,第三节 常用溶液、培养液及其配制,一、平衡盐溶液,细胞培养中常用的基本液体。,（一）配液时的注意事项,1）称量要准确,2）物质的纯度,3）物质的可溶性,4）物质的不稳定性,5）贮存液,（二)几种常用溶液的配制方法,1、无钙、镁离子溶液,2、磷酸盐缓冲液,3、Hanks液,1、无钙、镁离子溶液(1000ml),氯化钠(NaCl)8g,磷酸二氢钠 0.05g,氯化钾(KCl)0.2g,碳酸氢钠 1g,柠檬酸三钠,葡萄糖1g,加去离子水或双蒸水至1000mL,2、磷酸盐缓冲液,甲液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液,磷酸氢二钠(无水)28.4g 氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL,乙液：0.2 mol/L磷酸二氢钠溶液,磷酸二氢钠(无水)2.4g 氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL,甲、乙液于4保存，使用时按比例，配制成所需pH浓度，高压灭菌后室温保存。,3、Hanks液,(1)母液甲(20 x)配法,NaCl(A.R)160g，KCl(A.R)8g，MgSO4.7H,2,O（A.R)2g，MgCl.6H,2,O(A.R)2g，依次溶于800mL双蒸水中，前一物质溶后再加后一种。,CaCl,2,(A.R)2.8g溶于100mL双蒸水中，溶时不断搅拌（此液应单配，单溶）。,待上述两溶液中的“溶质”全溶后，将它们混合，再用双蒸水补至1000mL向其中加2mL氯仿作为防腐剂，置4保存。,2 mol/L磷酸二氢钠溶液,77g加去离子水或双蒸水至1000mL,待上述各“溶质”完全溶解后，用双蒸水补至,04g，KH2PO4(A.,橡皮器材的消毒处理方法,氯化钾(KCl)0.,2 mol/L磷酸二氢钠溶液,细胞培养的必备设施常用器材和培养基,2mol/L磷酸氢二钠溶液,(3)使用液（1）配法,（二)几种常用溶液的配制方法,待上述各“溶质”完全溶解后，用双蒸水补至,1000mL,其中加氯仿2mL作防腐剂，置40保存,R)160g，KCl(A.,第三节 常用溶液、培养液及其配制,(2)母液乙(20)配法,Na,2,HPO,4,.12H,2,O(A.R)3.04g，KH,2,PO,4,(A.R)1.20g，葡萄糖(A.R)20.0g溶于800ml双蒸水中。,待上述各“溶质”完全溶解后，用双蒸水补至,1000mL,其中加氯仿2mL作防腐剂，置40保存,(3)使用液（1）配法,取母液甲和母液乙各一份，加双蒸水18份，分装后，塞好瓶塞，挂上标志。以115高压灭菌25分钟(以免葡萄糖破坏)，置室温后4保存，可使用几个月。临用前，用7.5%NaHCO,3,调至所需pH。,二、其他溶液,（一）pH调节液,（二）消化液,（三）抗生素溶液,（四）0.5%台盼兰(Trypan blue)液,（五）0.1%结晶紫,