药品检验.pptx

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,药品检验,第一页，共75页。,第八章 注射剂的质量检测,精品课程配套电子教案,第二页，共75页。,学习目标,知识目标,掌握常用注射剂的质量检测方法,熟悉注射剂常规检查项目,掌握注射剂中常见附加剂对含量测定的干扰及其排除方法,掌握维生素,C,注射液、盐酸普鲁卡因注射液、甲硝唑注射液质量检测的方法。,能力目标,能对注射剂进行质量检查,第八章 注射剂的质量检测,第三页，共75页。,第一节 注射剂的质量检测,注射剂的定义,注射剂的,分类,注射剂的,检,测步骤,注射剂的常规检查,第二节 常用注射剂的检测,第八章 注射剂的质量检测,第四页，共75页。,一、注射剂的定义,注射剂,是指,药物,与适宜的溶剂或分散介质制成的供注入体内的,溶液,、,乳状液,或,混悬液,，及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的无菌,粉末或浓溶液,的,无菌制剂,。,返 回,第八章 注射剂的质量检测,第五页，共75页。,二、注射剂的分类,（一）注射液,1,、溶液型注射液,2,、乳状液型注射液,3,、混悬型注射液,（二）注射用无菌粉末,（三）注射用浓溶液,返 回,第八章 注射剂的质量检测,第六页，共75页。,1,、外观及性状检查,2,、鉴别,3,、常规检查及杂质检查,4,、含量测定,三、注射剂的检测步骤,第八章 注射剂的质量检测,第七页，共75页。,装量检查,装量差异检查,可见异物检查,不溶性微粒检查,无菌检查,热原或细菌内毒素检查,返 回,四、注射剂的常规检查,第八章 注射剂的质量检测,第八页，共75页。,取样数量,不大于,2ml,者取供试品,5,支,标示装量,2ml,以上至,50ml,者取供试品,3,支,50ml,以上的注射液照,最低装量检查法,返 回,1,、装量检查,第八章 注射剂的质量检测,第九页，共75页。,检查法,将内容物分别用相应体积的,干燥注射器及注射针头,抽尽，然后注入,经标化的量具,内，在室温下检视。,测定油溶液或混悬液的装量时，应先加温摇匀，再用干燥注射器及注射针头抽尽后，同前法操作，放冷，检视。,结果判断,每支的装量均不得少于其,标示量,。,返 回,1,、装量检查,第八章 注射剂的质量检测,第十页，共75页。,检查法,取供试品,5,瓶,(,支,),，除去标签、铝盖，容器外壁用乙醇擦净，干燥，开启时注意避免玻璃屑等异物落入容器中，分别迅速精密称定，倾出内容物，容器用水或乙醇洗净，在适宜条件下干燥后，再分别精密称定每一容器的重量，求出每瓶,(,支,),的装量与平均装量。每瓶,(,支,),装量与平均装量相比较，应符合规定。,返 回,2,、装量差异检查,注射用无菌粉末,第八章 注射剂的质量检测,第十一页，共75页。,结果判断,平均装量 装量差异限度,0.05g,至,0.05g,以下,15%,0.05-0.15g 10%,0.15-0.50g 7%,0.5g,以上,5%,如有,l,瓶,(,支,),不符合规定，应另取,10,瓶,(,支,),复试，应符合规定。,返 回,2,、装量差异检查,第八章 注射剂的质量检测,第十二页，共75页。,定义,可见异物是指在规定条件下目视可以观测至的不溶性物质，其粒径或长度通常大于,50m,检查方法,灯检法,光散射法,返 回,3,、可见异物检查,最常用,第八章 注射剂的质量检测,第十三页，共75页。,返 回,伞棚式检查灯,1,白色底板,2,黑色背景,3,日光灯,伞棚式检查灯,3,、可见异物检查,装置,第八章 注射剂的质量检测,第十四页，共75页。,检查法,取供试品,20,支,(,瓶,),，除去容器标签，擦净容器外壁，轻轻旋转和翻转容器使药液中存在的可见异物悬浮,(,注意不使药液产生气泡,),，置供试品于遮光板边缘处，在明视距离,(,指供试品至人眼的距离，通常为,25cm),，分别在黑色和白色背景下，手持供试品颈部使药液轻轻翻转，用目检视。,返 回,3,、可见异物检查,灯检法,第八章 注射剂的质量检测,第十五页，共75页。,结果判定,（,1,）,溶液型静脉用注射液、注射用浓溶液,20,支,(,瓶,),供试品中，均不得检出可见异物。如检出可见异物的供试品超过,1,支,(,瓶,),，应另取,20,支,(,瓶,),同法检查，均不得检出。,（,2,）混悬型注射液,20,支,(,瓶,),供试品中，均不得检出色块、纤毛等可见异物。,返 回,3,、可见异物检查,灯检法,第八章 注射剂的质量检测,第十六页，共75页。,本法系在可见异物检查符合规定后，用以检查,溶液型静脉用注射剂,中不溶性微粒的大小及数量。,包括光阻法和显微计数法。,返 回,4,、不溶性微粒检查,不适用于黏度过高和易析出结晶的制剂，也不适用于进入传感器时容易产生气泡的注射剂。,第八章 注射剂的质量检测,第十七页，共75页。,操作条件,在洁净度,10000,级条件下的局部,100,级单向流空气区域内或隔离系统中进行。,全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。,检查方法,直接接种法和薄膜过滤法,返 回,5,、无菌检查,第八章 注射剂的质量检测,第十八页，共75页。,（,1,）直接接种法,非抗菌作用的供试品,检查法,即每支,(,或瓶,),供试品按规定量分别接种至好氧菌、厌氧菌和真菌培养基的容器中。除另有规定外，好氧菌、厌氧菌培养基每管装量不少于,15ml,，真菌培养基每管装量不少于,10ml,，每种培养基接种的管数同供试品的检验数量。另取供试品,1,支（瓶）作阳性对照；取溶剂和稀释液同法操作，作阴性对照,。,返 回,5,、无菌检查,第八章 注射剂的质量检测,第十九页，共75页。,（,1,）直接接种法,非抗菌作用的供试品,培养与观察,阳性对照管培养,48,72,小时,好氧菌、厌氧菌,30-35,，真菌,23-28,培养,14,天。培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。,返 回,5,、无菌检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十页，共75页。,（,1,）直接接种法,非抗菌作用的供试品,结果判断,阳性对照混浊并确定有菌生长；阴性对照应,澄清。,供试品管均澄清，或虽显浑浊但经确证无菌生长，判供试品符合规定，若供试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长，判供试品不符合规定,。,返 回,5,、无菌检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十一页，共75页。,（,2,）薄膜过滤法,抗菌作用的供试品,检查法,取规定量，直接过滤，或混合至含适量稀释液的无菌容器内，混匀，立即过滤。用适量的冲洗液冲洗滤膜，冲洗次数不得少于三次。,返 回,5,、无菌检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十二页，共75页。,（,2,）薄膜过滤法,抗菌作用的供试品,检查法,（,1,）如用封闭式薄膜过滤器，分别将,100ml,好氧、厌氧菌培养基及真菌培养基加入相应的滤筒内。,（,2,）如用一般薄膜过滤器，取出滤膜，将其剪成,3,等份，分别置于含,50ml,好氧、厌氧菌培养基及真菌培养基的容器中，其中一份做阳性对照用。,结果判断同直接接种法,返 回,5,、无菌检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十三页，共75页。,热原检查法,家兔法,本法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。,返 回,6,、热原或细菌内毒素检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十四页，共75页。,试验前准备,（,1,）,75,酒精、脱脂棉、甘油或凡士林、注射用水,（,2,）设备及用具：台秤、兽用温度计；注射器、针头等应置烘箱中用,250,加热,30,分钟除去热原,（,3,）供试用家兔，测体温,正常体温,（,4,）供试品溶液,返 回,6,、热原或细菌内毒素检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十五页，共75页。,检查法,取适用的家兔,3,只，测定其正常体温后,15,分钟以内，自耳静脉缓缓注入规定剂量并温热至约,38,的供试品溶液，然后每隔,30,分钟测量其体温,1,次，共测,6,次，以,6,次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温的升高温度,(),。,接下页,6,、热原或细菌内毒素检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十六页，共75页。,结果判断,在初试的,3,只家兔中，体温升高均低于,0.6,，并且,3,只家兔体温升高总和低于,1.4,；或在复试的,5,只家兔中，体温升高,0.6,或,0.6,以上的家兔不超过,1,只，并且初试、复试合并,8,只家兔的体温升高总和为,3.5,或,3.5,以下，均判为供试品的热原检查符合规定。,接下页,6,、热原或细菌内毒素检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十七页，共75页。,返 回,6,、热原或细菌内毒素检查,细菌内毒素检查,本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。,细菌内毒素检查包括两种方法：即凝胶法和光度测定法。,第八章 注射剂的质量检测,第二十八页，共75页。,凝胶法,试验前准备,（,1,）细菌内毒素工作标准品,（,2,）鲎试剂,（,3,）细菌内毒素检查用水,（,4,）试验所用器皿等：,250,干烤至少,60,分钟,（,5,）供试品溶液,（,6,）鲎试剂灵敏度复核及供试液干扰试验,返 回,6,、热原或细菌内毒素检查,第八章 注射剂的质量检测,第二十九页，共75页。,操作方法,（,1,）检验用内毒素溶液,（,2,）鲎试剂原安瓿,8,支,，,2,支供试品管，,2,支阳性对照管，,2,支阴性对照管，,2,支供试品阳性对照管。,（,3,）封闭管口，垂直放入,371,适宜恒温器中，保温,60,分钟,2,分钟。,接下页,6,、热原或细菌内毒素检查,第八章 注射剂的质量检测,第三十页，共75页。,结果判断,将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转,180,时，管内凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性，记录为（,+,）；凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性，记录为（,-,）。供试品管,2,支均为（），应认为符合规定。,接下页,6,、热原或细菌内毒素检查,第八章 注射剂的质量检测,第三十一页，共75页。,五、注射剂中常见附加剂的干扰及其排除,1抗氧剂,常用的抗氧剂有：,亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素等。,干扰：,氧化还原法；维生素C干扰紫外分光光度法。,第八章 注射剂的质量检测,第三十二页，共75页。,排除的方法：,加酸分解,NaHSO,3,+HCl NaCl+H,2,O+SO,2,第八章 注射剂的质量检测,第三十三页，共75页。,排除的方法：,加入掩蔽剂法,加丙酮法,加甲醛法,第八章 注射剂的质量检测,第三十四页，共75页。,2等渗调节剂,等渗调节剂：,氯化钠,干扰：,离子交换法；银量法。,五、注射剂中常见附加剂的干扰及其排除,第八章 注射剂的质量检测,第三十五页，共75页。,干扰机制：,如：复方乳酸钠注射液,离子交换,RSO,3,H+CH,3,CHOHCOONa RSO,3,Na+CH,3,CHOHCOOH,RSO,3,H+NaCl RSO,3,Na+HCl,氢氧化钠滴定,CH,3,CHOHCOOH+NaOH CH,3,CHOHCOONa+H,2,O,HCl+NaOH NaCl+H,2,O,五、注射剂中常见附加剂的干扰及其排除,第八章 注射剂的质量检测,第三十六页，共75页。,排除的方法：,先用银量法测定氯化钠的量，再从消耗氢氧化钠的体积中，减去氯化钠消耗硝酸银的体积，据此可计算供试品待测主药的量。,五、注射剂中常见附加剂的干扰及其排除,第八章 注射剂的质量检测,第三十七页，共75页。,L,抗坏血酸,第二节 常用注射剂的质量检测,一、维生素,C,注射液的质量检测,（一）结构与性质,1.,结构,第三十八页，共75页。,1,、易溶于水,2,、水溶液呈酸性,性质,2,（,1,）,溶解性,第三十九页，共75页。,二烯醇结构,二酮基结构,二烯醇结构,（,2,）,还原性,第四十页，共75页。,有活性,有活性,无活性,第四十一页，共75页。,C,3OH,的,pKa=4.17,C,2,OH,的,pKa=11.57,酸性,（,3,）,一元酸,第四十二页，共75页。,L(+),抗坏血酸,活性最强,手性,C,（,C,4,、,C,5,）,（,4,）,光学活性,*,*,第四十三页，共75页。,与碱反应,（,5,）,水解性,第四十四页，共75页。,第四十五页，共75页。,与氧化剂的反应,1.,鉴别试验,（二）,去氢抗坏血酸,O,VitC,第四十六页，共75页。,（,1,）与,AgNO,3,反应,（,2,）与,2,，,6-,二氯靛酚反应,(ChP2000),氧化型,玫瑰红色,还原型,蓝色,OH,(ChP2000),第四十七页，共75页。,（,玫瑰色）无色）,第四十八页，共75页。,（三）杂质检查,1.,溶液的颜色：分光光度法,取本品，加水稀释成每,1ml,中含维生素,C50mg,的溶液，照紫外,-,可见分光光度法（附录,A,），在,420nm,的波长处测定，吸光度不得过,0.06,。,第四十九页，共75页。,2.pH,值,应为,5.07.0,3.,细菌内毒素,取本品，依法检查，每,1ml,中含内毒素量应小于,2.5EU,（三）杂质检查,第五十页，共75页。,指示剂 淀粉指示液,原理,（,1,）,碘量法,1.,含量测定,（四）,第五十一页，共75页。,H,+,第五十二页，共75页。,精密量取本品适量（约相当于维生素,C0.2g,），加水15ml,与丙酮,2ml,，摇匀，放置,5,分钟，加稀醋酸,4ml,与淀粉指示液,1ml,，用碘滴定液（,0.05mol/L,）滴定，至溶液显蓝色并持续,30,秒钟不褪。每,1ml,碘滴定液（,0.05mol/L,）相当于,8.806mg,的,C,6,H,8,O,6,方法,（,2,）,第五十三页，共75页。,酸性环境 稀,HAC,新沸冷,H,2,O,减慢,VitC,被,O,2,氧化速度,讨论,（,3,）,立即滴定,赶走水中,O,2,减少,O,2,的干扰,加丙酮,减少亚硫酸氢钠干扰,第五十四页，共75页。,二、盐酸普鲁卡因注射液的质量检测,芳伯氨基,酯键,易水解,脂烃胺,Cl,反应,第五十五页共75页。,（一）,结构与性质,1.,芳伯氨基,可用重氮化,-,偶合反应鉴别和亚硝酸钠滴定法测含量,2.,酯键,易水解,引入特殊杂质,对氨基苯甲酸,第五十六页，共75页。,3.,脂烃胺侧链,弱碱性,（,1,）可与生物碱沉淀试剂发生,沉淀反应进行鉴别,（,2,）可用非水碱量法测定含量,（,3,）可与酸成盐,4.,溶解性,游离碱易溶于有机溶剂,其盐易溶于水,第五十七页，共75页。,（二）鉴别,1.,芳香第一胺反应,（重氮化,-,偶合反应）,HCl,橙黄,猩红色,第五十八页，共75页。,HCl,OH,橙黄,猩红,重氮盐,偶氮化合物,第五十九页，共75页。,2.,水解反应,二乙氨基乙醇,红石蕊试纸变蓝,HCl,第六十页，共75页。,+,使湿润的红色,石蕊试纸变蓝,HCl,第六十一页，共75页。,3.,氯化物的,反应,ChP,附录“,一般鉴别试验,”,1.,沉淀反应,第六十二页，共75页。,使碘化钾,-,淀粉试纸显蓝色,4.,氧化还原反应,第六十三页，共75页。,（三）特殊杂质检查,对氨基苯甲酸,-CO,2,O,有色,溶血,第六十四页，共75页。,本品干燥时较稳定，但其水溶液,易水解和氧化，故中国药典规定其注,射液应检查,对氨基苯甲酸,检查方法,TLC,（杂质对照品法）,杂质来源,中间体、水解产物,第六十五页，共75页。,（四）含量测定,亚硝酸钠滴定法,中国药典指示终点方法,永停法,第六十六页，共75页。,（1）如用封闭式薄膜过滤器，分别将100ml好氧、厌氧菌培养基及真菌培养基加入相应的滤筒内。,（3）细菌内毒素检查用水,取本品，加水稀释成每1ml中含维生素C50mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录A），在420nm的波长处测定，吸光度不得过0.,50g 7%,第八章 注射剂的质量检测,6、热原或细菌内毒素检查,（1）可与生物碱沉淀试剂发生,取本品适量，用水稀释制成每1ml中约含甲硝唑0.,第四十一页，共75页。,（2）为含氮的杂环化合物，与三硝基苯酚反应生成黄色盐，熔点150；,取本品适量（不少于10ml),用薄膜过滤法处理后，增加无孢核菌菌液阳性对照管，依法检查（附录 H),应符合规定。,取本品适量（不少于10ml),用薄膜过滤法处理后，增加无孢核菌菌液阳性对照管，依法检查（附录 H),应符合规定。,取本品，依法检查（E），每1ml中含内毒素量应小于0.,三、甲硝唑注射液的质量检测（三）杂质检查,第四十二页，共75页。,50g 7%,（一）,性质与结构,1.,结构,甲硝唑结构,返 回,第八章 注射剂的质量检测,三、甲硝唑注射液的质量检测,第六十七页，共75页。,三、甲硝唑注射液的质量检测,2.,性质,（,1,）有硝基，在锌粉、盐酸作用下，还原生成氨基，可发生重氮化或重氮化,-,偶合反应；,（,2,）为含氮的杂环化合物，与三硝基苯酚反应生成黄色盐，熔点,150,；,（,3,）有紫外吸收。,第八章 注射剂的质量检测,第六十八页，共75页。,（二）鉴别,（,1,）取本品适量（约相当于甲硝唑,l0mg,），加氢氧化钠试液,2ml,微温，即得紫红色溶液；滴加稀盐酸使成酸性即变成黄色，再滴加过量氢氧化钠试液则变成橙红色。,返 回,第八章 注射剂的质量检测,三、甲硝唑注射液的质量检测,第六十九页，共75页。,三、甲硝唑注射液的质量检测,（,2,）取本品适量（约相当于甲硝唑,0.1g,），置水浴上蒸干，残渣加硫酸溶液（,3100,）,4ml,，应能溶解；加三硝基苯酚试液,10ml,，放置后即生成黄色沉淀。,第七十页，共75页。,三、甲硝唑注射液的质量检测,（三杂质检查,1.2-,甲基,-5-,硝基咪唑,取本品适量，用水稀释制成每,1ml,中约含甲硝唑,0.lmg,的溶液，作为供试品溶液。用高效液相色谱法检查，应符合规定。,返 回,第八章 注射剂的质量检测,第七十一页，共75页。,三、甲硝唑注射液的质量检测,（三）,杂质检查,2.,氯化物,精密量取本品适量,(,约相当于甲硝唑,50mg),，加水至,50m1,，加,2%,糊精溶液,5ml,，碳酸钙,0.1g,与荧光黄指示液,5-8,滴，摇匀，用硝酸银滴定液,(0.lmol/L),滴定至浑浊液由黄绿色变为微红色。消耗硝酸银滴定液,(0.lmol/L),应为,13.2-14.6m1,或,35.1-388m1(250m1,：,500mg),。,返 回,第八章 注射剂的质量检测,第七十二页，共75页。,三、甲硝唑注射液的质量检测,（三）杂质检查,3.pH,值,应为,4.57.0,4.,不溶性微粒,取装量为,100ml,的本品,1,瓶，依法检查,(C),，应符合规定。,第七十三页，共75页。,三、甲硝唑注射液的质量检测,（三）杂质检查,5.,细菌内毒素,取本品，依法检查（,E,），每,1ml,中含内毒素量应小于,0.35EU,6.,无菌,取本品适量（不少于,10ml),用薄膜过滤法处理后，增加无孢核菌菌液阳性对照管，依法检查（附录,H),应符合规定,。,第七十四页，共75页。,（四）含量测定,精密量取本品适量，加盐酸溶液,(91000),定量稀释制成每,1ml,中约含甲硝唑,12.5g,的溶液，照紫外,-,可见分光光度法,(,附录,A),，在,277nm,的波长处测定吸光度，按,C,6,H,9,N,3,O,3,的吸收系数,(),为,377nm,计算，即得。,返 回,第八章 注射剂的质量检测,三、甲硝唑注射液的质量检测,第七十五页，共75页。,