实验四.青贮饲料氨态氮含量.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,实验五青贮饲料氨态氮含量的测定,准备工作：,两种试剂的配制：,试剂,A,:,称取,9.976,克苯酚，,50.65mg,亚硝基铁氰化钠，用去离子水定容至,1000ml,。,试剂,B,:,称取,5.0,克氢氧化钠溶于去离子水，再加,13.5ml,次氯酸钠，最后定容至,1000ml,。,一、实验仪器及试剂,仪器,:,分光光度计，水浴锅，移液枪（,1ul),及移液管,(10ml,5ml),容量瓶，烧杯，试管若干。,试剂,A,B,，,0.2mol/l,的盐酸溶液（取,12ml,盐酸定容至,1000ml,），氯化铵,二、实验步骤,取待测液,2.0ml,（空白加蒸馏水）放入试管中，每个样,3,个重复，加入,8ml0.2mol/l,的盐酸溶液混匀。,取混合液,0.4ml,于另一试管中，以次加入,A,B,液各,5.0ml,。,60,恒温水浴,10min,，反应结束后于冷水中冷却。,在,560nm,处测溶液的吸光度值。,三、标准曲线的绘制,称取,1.00,克,NH,4,Cl,用去离子水溶解后定容至,100ml,，配制成浓度为,10mg/ml,的标准母液。,分别取,0.0,，,1.0,，,2.0,，,3.0,，,4.0,，,5.0,，,6.0,，,7.0ml,母液于,100ml,容量瓶中，配成一个系列的标准液。,。,取各标准液,2.0ml,于试管中，每个标准,3,个重复，加入,8.0ml,0.2mol/l,盐酸混匀再取,0.4ml,混合液于另一试管中，依次加入,A,液,5.0ml,和,B,液,5.0ml,，,60,恒温水浴箱中反应,10min,。,反应结束后，立即取出于冷水中冷却，在,560nm,波长处测,OD,值。,以,NH,4,Cl,浓度为横坐标，,OD,为纵坐标，绘制,NH,4,Cl,标准曲线。,四、计算方法,将待测液所得的吸光度值带入标准曲线中，得出氯化铵的浓度，将其转化为氨态氮的浓度，然后根据浸出液所取得样品重量以及加入水的重量，计算出青贮料单位干物质中含的氨态氮量。,氨态氮含量,(g/kg DM)=,所得的氯化铵的浓度,17/53.5/1ml,待测液对应青贮料干物质的量,五、注意事项,每一步加完溶液都要摇匀，使其反应完全。,水浴后冷却摇匀再比色。,计算结果注意单位。,