实验一 显微镜油镜的使用和细菌形态的观察.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验一 显微镜油镜的使用和细菌形态的观察,目的要求,显微镜油镜使用的原理,实验材料,实验程序,思考题,目 的 要 求,学习并掌握显微镜油镜的使用技术及维护的基本知识,使用油镜观察细菌的几种基本形态,用悬滴法在高倍镜或油镜下观察细菌的运动,显微镜油镜使用的原理,普通光学显微镜,欧林巴斯,（,OLYMPUS,）,生物显微镜,欧林巴斯,（,OLYMPUS,）,相差显微镜,普通光学显微镜,显微镜的构造,1.,光学部分,:,接目镜、接物镜、照明装置(聚光镜、虹彩光圈、反光镜等),.它使检视物放大,造成物象.,2.,机械部分,:,镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件.它起着支持 调节 固定等作用.,普通光学显微镜,显微镜的放大倍数和分辨率,1.,放大倍数,=接物镜放大倍数接目镜放大倍数,2.,显微镜的分辨率 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力，可用公式表示为：,D=,/2nsin(/2),式中,D：,物镜分辨出物体两点间的最短距离。,：,可见光的波长（平均0.55,m),n:,物镜和被检标本间介质的折射率。,：,镜口角（即入射角）。,普通光学显微镜,油镜使用的原理,油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（,其折射率与玻片的相近,），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。,实 验 材 料,显微镜（显微镜灯）、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸等。,细菌三种形态的染色标本。,培养,1218,h,的枯草杆菌（,B.,subtilis,),盖玻片、凹玻片、接种环、酒精灯。,实验程序,（显微镜的使用）,主要是油镜的使用,1.,用前检查：零件是否齐全，镜头是否清洁。,2.,调节光亮度,3.,低倍镜观察：粗调、细调,4.,依次再进行中倍、高倍观察,5.,油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。,6.,换片：另换新片，必须从第三条开始操作。,7.,用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原。,实验程序,（显微镜的使用）,显微镜保养和使用中的注意事项：,1.,不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。,2.,镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度,3.,观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。,4.,观察时，两眼睁开，养成两眼能够轮换观察的习惯，以免眼睛疲劳，并且能够在左眼观察时，右眼注视绘图。,5.,拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，更不可倾斜拿。,6.,显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片,。,实验程序,III,细菌三种基本形态的观察：,菌落形态观察和个体形态观察，这里主要指个体形态的观察。,1.,结合油镜的使用，观察三张细菌染色片（球状菌、杆状菌、和螺旋状菌），边观察边绘图。,2.,看示范镜：观察双球菌、四联球菌，并绘图。,实验程序,细菌运动性的观察（示范）：,一般采用水浸片法、悬滴法、半固体培养法，常用水浸法和悬滴法来观察细菌的运动性。,1.,水浸片法,2.,悬滴法,欧林巴斯（,OLYMPUS生物显微镜,OLYMPUS,生物显微镜是由日本进口的一种双筒光学显微镜，它使用方便，分辨率高，并且有立体感。是目前研究微生物的良好工具。,显微镜的结构,录像演示,欧林巴斯（,OLYMPUS,）,生物显微镜,（显微镜的使用方法）,1.,接通电源。,2.,打开主开关。,3.,移动电压调整旋，使亮度适中。,4.,把标本固定在再物台上。,5.,放松粗调锁挡。,6.,用低倍物镜，旋转粗调和微控制钮来进行对焦。,7.,调节双目镜筒间距和视度差。,8.,再适当调节照明度。,9.,使焦点正确地对准标本。,10.,锁紧粗调锁挡。,11.,调节孔径光栏。,12.,依次用低、中、高倍镜观察。,13.,油镜观察与普通光学显微镜方法一致。,14.,观察完毕，复原：先将电压调节旋钮复原，关闭主开关，切断电源，放开粗调锁挡。油镜的处理与普通光学显微镜方法一致。,15.,放入保存箱中。,欧林巴斯（,OLYMPUS,）,相差显微镜,相差显微镜的工作原理,相差显微镜具有一个特殊的由环状光圈与聚光镜组合的转盘聚光镜，通过这个特殊的装置，就可把光波的相位差异变为振幅差异，从而使人们肉眼即能观察到活细胞的细微结构，并有立体感。常用来观察活细胞结构，鞭毛的运动等。,相差显微镜的装置,1.,环状光圈,2.,相差物镜（具有环状相板）,3.,定中心望远镜（亦称辅助目镜）,4.,辅助固定扳手,5.,绿色滤光片,欧林巴斯（,OLYMPUS,）,相差显微镜,相差显微镜的使用方法,1.,相差装置的安装：转盘聚光镜 绿色滤光片,2.,相差物镜的安装,3.,安放标本,4.,对光,5.,调焦：用粗调控制钮和微调控制钮调节焦，看清物象时为止,6.,旋转相差转盘,7.,中心调节,8.,相差观察,思 考 题,油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？,使用油镜时，为什么必须用镜头油？,镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？,实,验,一,结 束,