吸光光度法的仪器.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第三节吸光光度法的仪器,一、吸光光度计的基本部件,一般由五部分组成：,光源,单色器,吸收池,检测系统,信号显示系统,（一）光源,作用：,提供一定波长范围的复合光。,要求：,能提供具有足够发射强度、稳定且波长连续的复合光，同时发射光的强度还应不随波长的变化而明显改变。,常用的光源为6,12伏低压钨丝灯，发射的复合光的波长约在400,2500nm。当在近紫外光区测定时应使用氢灯或氘灯作光源，发射的波长为185,375nm。电源由恒温器供给；为了保持光源强度的稳定，以获得准确的测定结果，电压必须稳定。,(1)棱镜是根据不同波长光的折射率不同来分光的。,(1)在可见光区测定时，使用玻璃吸收池；,3200nm范围使用，主要用于可见分光光度计。,（二）单色器（分光系统）,(1)在可见光区测定时，使用玻璃吸收池；,(2)光栅是根据光的衍射和干涉原理来分光的。,要求：能提供具有足够发射强度、稳定且波长连续的复合光，同时发射光的强度还应不随波长的变化而明显改变。,4000nm，适用于紫外-可见分光光度计。,测定时，只要将待测物质推入光路，即可直接读出吸光度值。,一、吸光光度计的基本部件,作用：把复合光中分出所需要的单色光。,（二）单色器（分光系统）,作用：把复合光中分出所需要的单色光。,(1)棱镜是根据不同波长光的折射率不同来分光的。,(2)光栅是根据光的衍射和干涉原理来分光的。,3200nm,范围使用，主要用于可见分光光度计。,4000nm,，适用于紫外-可见分光光度计。,（三）吸收池（比色皿）,作用：,盛装参比溶液、试液溶液。,比色皿是用透明无色的光学玻璃制作的。大多数比色皿为长方形，也有圆柱形的。一般厚度为0.5、1、2和3厘米。,(1)在可见光区测定时，使用玻璃吸收池；,(2)在紫外光区测定时，使用石英吸收池。,（四）检测系统(又叫光电转化器),作用：,检测被吸收的光。,在光度计中，常用的是硒光电池。晒光电池和眼睛相似，对于各种不同波长的光线，灵敏度是不同的，对光的响应范围为300,800nm，对于波长为500,600nm的光线最灵敏，而对紫外线，红外线则不能应用。,光电管和光电倍增管用于较精密的分光光度计中。具有灵敏度高、光敏范围广及不易疲劳等特点。,（五）信号显示系统,作用：,记录、显示测量结果。,早期使用的是检流计、微安表、电位计、数字电压表、自动记录仪等。,现代的分光光度计广泛采用数字显示器、函数记录仪、示波器及数据处理台等。,二、吸光度的测量原理,分光光度计实际上测得的是光电流或电压，通过转换器将测得的电流或电压转换为对应的吸光度A。测定时，只要将待测物质推入光路，即可直接读出吸光度值。,测定步骤：,1.调节检测器零点，即仪器的机械零点。,2.应用不含待测组分的参比溶液调节吸光零点。,3.测定待测组分的吸光度。,三、分光光度计的类型,1.可见分光光度计,2.紫外-可见分光光度计,3.红外分光光度计,作用：盛装参比溶液、试液溶液。,测定时，只要将待测物质推入光路，即可直接读出吸光度值。,由光源(钨丝灯或氢灯)发出的光线由反射镜反射，使光线经狭缝的下半部，经准光镜进入单色器棱镜色散底，由准光镜将光聚焦于狭缝上半部而射出，经液槽照射于光电管上。,比色皿是用透明无色的光学玻璃制作的。,(1)在可见光区测定时，使用玻璃吸收池；,（三）吸收池（比色皿）,(2)在紫外光区测定时，使用石英吸收池。,作用：检测被吸收的光。,(2)棱镜和透镜均由石英材料作成，反光镜和准光镜表面镀铝。,第三节吸光光度法的仪器,4000nm，适用于紫外-可见分光光度计。,比色皿是用透明无色的光学玻璃制作的。,(1)棱镜是根据不同波长光的折射率不同来分光的。,作用：提供一定波长范围的复合光。,(1)在可见光区测定时，使用玻璃吸收池；,由此可见，仪器用同一狭缝作入光和出光狭缝，它们始终具有相同的宽度。,分光光度计实际上测得的是光电流或电压，通过转换器将测得的电流或电压转换为对应的吸光度A。,(一)单光束分光光度计,分为721,、,722,、,751,型。,751,型分光光度计是一种波长范围较宽,(2001000nm),、精密度较高的分光光度计。由光源,(,钨丝灯或氢灯,),发出的光线由反射镜反射，使光线经狭缝的下半部，经准光镜进入单色器棱镜色散底，由准光镜将光聚焦于狭缝上半部而射出，经液槽照射于光电管上。由此可见，仪器用同一狭缝作入光和出光狭缝，它们始终具有相同的宽度。,(1)波长,200-320nm,范围用氢灯作光源，波长,320-1000nm,范围用钨丝灯作光源。,(2)棱镜和透镜均由石英材料作成，反光镜和准光镜表面镀铝。所以全部系统保证紫外光谱通过。,(3)波长,200-625nm,用蓝敏光电管,(GD-5),测量透射光强度，波长,625-1000nm,用红放光电管,(GD-6),测量透射光强度。,(3)吸光度和透光度通过显示屏读出。,(二)双光束分光光度计,精品课件,！,精品课件,！,(三)双波长分光光度计,感谢观看,