药学研究.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,药品标准复核及相关的标准化与规范化问题,李慧芬,北京市药品审评中心,2005.07.25,引言,随着,中华人民共和国药品管理法,及,新药审批办法,药品注册管理办法,的颁布实施，,20,年来我国药品监督管理与注册体系逐步发展健全；一系列药物研究技术指导原则的制定出台，进一步为保证新药研究的科学性提供了支持。但新药研究开发是一个系统工程，涉及多学科多层次的工作，保证每一项实验结果的准确可靠，才能将技术指导原则落到实处，从根本上保证新药研究开发工作的质量。为此，结合药品质量标准复核工作，就实验操作的标准化与质量标准的规范化问题谈几点意见。,内容提要,药品注册检验及常见问题,实验操作的标准化,质量标准的规范化,1.1,注册检验的有关规定,申请药品注册必须进行药品注册检验。,药品注册检验，包括对申请注册的药品进行的样品检验和药品标准复核。,（第一百四十六条）,1.1,注册检验的有关规定,样品检验，是指药品检验所按照申请人申报的药品标准对样品进行的检验。,1.1,注册检验的有关规定,药品标准复核，是指药品检验所对申报的药品标准中检验方法的可行性、科学性、设定的项目和指标能否控制药品质量等进行的实验室检验和审核工作。,1.1,注册检验的有关规定,从事药品注册检验的药品检验所，应当按照药品检验所实验室质量管理规范和国家计量认证的要求，配备与药品注册检验任务相适应的人员和设备，符合药品注册检验的质量保证体系和技术要求。（第一百五十条）,1.1,注册检验的有关规定,申请生产已有国家标准的药品，药品检验所在接到样品后应当按照国家药品标准进行检验，并对由于工艺变化而导致的质量指标变化进行全面分析，必要时应当要求申请人制定相应的质量指标和检验方法，以保证药品质量的可控。（第一百五十二条）,1.1,注册检验的有关规定,药品检验所进行新药标准复核时，除进行样品检验外，还应当根据药物的研究数据、国内外同类产品的药品标准和国家有关要求，对药物的药品标准、检验项目等提出复核意见。（第一百五十三条）,1.1,注册检验的有关规定,要求申请人重新制定药品标准的，申请人不得委托提出原复核意见的药品检验所进行该项药品标准的研究工作；该药品检验所不得接受此项委托。（第一百五十四条）,1.1,注册检验的有关规定,药品检验所认为申报的药品标准无法控制药品质量的，申请人可撤回新药申请，未撤回的，经,SFDA,审核认为药品标准确实无法控制质量的，予以退审。（,58,）,药品检验不符合申请人申报的药品标准的，,SFDA,核实后对该新药申请予以退审。,注册标准,注册标准,：是批准给申请人特定药品的标准，该申请人生产该药品必须执行该注册标准；该标准仅颁布至省级药品监督管理部门供监督检验用；但不以该企业的标准去检验另一企业生产的同一药品，也不能仅以药典标准来检验。,药检所注册检验,1,、按照申报标准对样品进行检验并出具检验报告书；直接寄送国家局和省级药监局。,2,、对申报标准的检测方法的可行性和可靠性进行验证（方法学验证）。,3,、对研制单位申报的质量标准进行审核，就标准的完善性及药品的质量可控性提出技术性意见。,4,、不对申报标准进行修订和规范化整理，也不再另行出具修订后的质量标准。,1.2,注册检验常见问题,1,、申报方法不可行：按申报标准操作，观察不到所述的实验现象或得不到预期的结果,如样品不能溶解；,静置不能分层，无法取上清液；,分离度达不到要求；,滴定终点不易判断；,注册检验常见问题,2,、方法学验证的问题：,含量测定等方法的回收率低,灵敏度、线性范围不够,专属性不强,注册检验常见问题,3,、实验设计缺陷：方法选择不当；实验条件不够合理。如：,取样量,溶剂,浓度,检测波长,1.2,注册检验常见问题,4,、文字表达不规范，检验结果难以判定。,如：,限度不明确：有关物质检查,反应现象描述不正确：化学鉴别的现象；,滴定终点颜色的变化,注册检验常见问题,5,、实验操作方法不规范：振摇、超声时间,不可行：有的内容重复不出来,6,、检测项目设置不当：微生物限度与无菌检查。,7,、标准限度设置不当,9,、文字打印错误,注册检验常见问题,10,、样品检验不合格：,性状,熔点,pH,值,干燥失重,水分,有机溶剂残留量,溶出度,含量测定,例,1,某药物有关物质检查：,配制浓度为,400ug/ml,供试品溶液；,另,取,对照品,配成,5ug/ml,的溶液，调节灵敏度,。,限度：各杂质峰面积之和,不得大于总峰面积的,1.0%,.,问题：预试液用对照品配制，没有必要,预试液浓度相当于供试品的,1.25%,，,与限度,1.0%,不匹配，,归一化法,vs,主成分自身对照法,例,2,某药物有关物质检查：供试品溶液浓度,5mg/ml;,稀释,50,倍作为对照溶液（,2.0%,）。,单个杂质峰面积不得过总峰面积的,2.0%,；,各杂质峰面积之和不得过对照溶液主峰面积的,5.0%,。,问题：,1,、配了对照液，单个杂质还用归一化法计算,2,、杂质总量限度值（,2.0%*5.0%=0.01%,）,根本不可行。,原因分析,样品质量存在问题,实验设计不够科学严谨,研究过程中实验操作不标准,质量标准制定欠缜密，不规范,质量研究必须科学严谨,根据有关技术指导原则并结合研究对象的实际情况设计实验方案,按照标准操作规程认真做好每一项实验,及时、准确、详实、全面地记录实验结果,实事求是、严谨规范的整理申报资料,实验操作标准化的必要性,保证实验结果准确可靠,保证质量标准切实可行,准确反映药品质量信息,实验操作标准化,中国药品检验标准操作规范,1996,年第一版 原卫生部药政局组织全国,38,个药检所的专业技术人员历时,3,年编撰而成是药检工作者多年工作经验的总结，是执行药典标准的重要依据和补充。对于检验操作的标准化、规范化，保证各个实验室检测数据和结论的正确、可靠和统一具有重要意义。,实验操作标准化,主要内容有三部分：,1,、药典附录方法,2,、各论项下的检测方法,3,、仪器设备的使用、校准、操作步骤及注意事项。,实验操作标准化,2000,年进行了全面补充修订：,38,个药检所的,255,位专业技术人员参加编写，共近,200,个操作规程。,实验操作标准化,2005,年版特点：,注重与国际接轨和与国家标准的统一：,“,内容丰富完整，科学性、实用性和可操作性均强，是一部指导药品检验人员进行药品检验工作的工具书,”,。,“将使我国药品检验工作有章可循，同时将对培养药检人才、指导相关专业实验技术和科学发展，确保药品检验工作的科学、准确，发挥重要作用,”,。,新增,TOC,、高分子杂质检查等,5,个检测方法,修订了,65,个附录中的检测方法,实验操作标准化,与,中国药典,2005,版附录条目相对应，共,156,项，概分为,4,部分：,1,、化学分析方法（各类制剂通则检查项目及检测方法）,2,、仪器分析方法（各类仪器分析通法和不同型号仪器的正确使用、校正、操作步骤与注意事项）,3,、生物鉴定和微生物鉴定法（抗生素效价测定等）,4,、其它相关内容（滴定液的配制、天平的使用与维护等）,实验操作标准化,紫外分光光度法,pH,测定法,旋光度测定法,重金属检查法,非水滴定法,有机溶剂残留量,溶出度检查,实验操作标准化,滴定液,分析天平使用与称量,有效数字和数值的修约及其运算规则,色谱数据处理系统,实验操作标准化,1,、紫外分光光度法 基本注意事项,1,）吸收池：在清洁液中长时间浸泡，铬酸钾结晶会损坏光学表面。,2,）溶剂的适用性检查：以空气为空白测定不同波长处的吸收度，确定适用波长范围：,波长：,220240 241250 251300 300,A:0.4 0.2 0.1 0.05,避免不同品牌不同批号的混用。,实验操作标准化,称量与稀释：称量准确稀释转移次数尽量少,份数：含量测定需平行,2,份，均值的偏差,0.5%,。,供试液与对照液的,pH,值应一致,实验操作标准化,紫外吸收系数测定,样品：精制样品，准确称量，平行,2,份,浓度：原液 吸收值,0.60.8,稀释一倍后，吸收值,0.30.4,狭缝：减小狭缝至吸光值不再增加为止，取吸光度不改变的数据。,5,台仪器，每台平行测定,2,份结果均值的偏差应不超过,0.3%,计算：按无水物或干燥品计。,实验操作标准化,pH,值测定,按规定用适当的容器称取样品,溶解：水应新沸放冷，,pH,范围,5.57.0,仪器：预热、校准（适当范围的两种缓冲液，示值误差不得过,0.02pH,单位）,测试：,1,分钟内两次读数相差应不超过,0.05pH,单位；取平均值。,操作标准化,操作要点：,称样后立即测定，以免空气中的二氧化碳影响结果。,测定温度：,540,度内，加温度补偿调节。,仪器状态良好：电极、盐桥、,用 标准缓冲液按规定严格校准,测定时间,数据记录精度,实验操作标准化,例,盐酸罗匹尼罗酸度检查,申报单位自测：,4.25,申报标准中限度,:3.55.0,药检所复核结果：示值不稳，向上飘移超过上限，达,5.5,原因：方法、操作,旋光度测定法,含有某些光学活性的化合物的液体或溶液能使直线偏振光的平面向左或向右旋转，此种旋转在一定条件下有一定的度数，称为,旋光度,。,在,20,度时，当钠光源的,D,谱线（,589.3nm),光通过长,1dm,、每,1ml,中含1g,溶质的溶液时，测得的旋光度即为,比旋度。,是一物理常数,，,反映物质的光学活性和纯杂程度。也可用于某些药物的含量测定。,旋光度测定,仪器校准：标准石英旋光管,比旋度测定：,测定温度：,20,0.5,。,螺帽不宜旋得过紧,以免产生应力造成误差。,配后及时测定*,溶液浓度较低的，应用,2dm,的旋光管测定,读数：重复三次，取平均值，,结果：按无水物或干燥品计算,旋光度测定,D-,葡萄糖分子中有,4,个不对称碳原子，具有旋光性，因有,-,型，,-,型以及醛式,3,种异构体。在未达到平衡前，葡萄糖的旋光度是不稳定的，需放置,4.5h,才能使这一种互变异构体达到平衡。,葡萄糖的测定中配成溶液（,10%),后，要加入,0.2ml,氨试液,可加速达到平衡。对于,10,或,10,以下的葡萄糖注射液因已放置一段时间，故测定含量不需加入氨试液。,遇类似情况应考虑周全。,非水溶液滴定法,以非水溶液为介质，可改变物质的酸碱强度，使在水中不能进行完全的滴定反应得以完成；或可增大有机物的溶解度。,用于测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐或有机酸盐；或有机酸的碱金属盐类的含量。,非水溶液滴定法,10ml,滴定管，分度值要精密，如,0.05ml,所用仪器要充分干燥,滴定液按规定配制、标定、贮存,滴定液需严格标定：平行,3,份，酸滴定液标定与复标的相对偏差均不得过,0.1%,；碱滴定液的不得过,0.2%,高氯酸滴定液的含水量应为,0.010.20%,应在同条件下作空白实验，对滴定结果进行校正。,非水溶液滴定法,配制高氯酸滴定液和溶剂用的冰醋酸含水量对滴定突跃和指示剂变色敏锐度均有影响，在使用前应做空白试验：取,5,10ml,冰醋酸，加结晶紫指示剂,1,滴，应为紫色；加高氯酸滴定液（,0.1mol/L)0.01ml,，,指示剂应转变为黄绿色，若变为蓝色，则表示有水分超标，应测定含水量，然后准确加入计算量的醋酐脱水,冰醋酸有挥发性，滴定液应贮存在棕色瓶中密塞保存。滴定管上部应取一个干燥小烧杯覆盖以防止挥发。,非水滴定法,指示剂不宜多加，,12,滴为宜；终点以点为滴定突跃来确定。,滴定速度不宜太快，到终点后稍待一会儿再读数。,冰醋酸凝点为,18,，滴定温度宜控制在,20,1,。,高氯酸滴定液的膨胀系数为,0.0011,，应注意校正,滴定温度与标定温度相差,10,时应重新标定。,非水溶液滴定法,供试品如为氢卤酸盐，应在加入醋酸汞试液,3,5ml,使形成不解离的卤化汞后，再进行滴定。,如为硝酸盐，需用电位滴定法指示终点。因为硝酸可使指示剂退色，无法观察终点。,非水滴定法,必须记录滴定液标定时的温度、浓度；,记录测定样品时的温度，必要时对滴定度进行校正。,每个供试品应测定两份以上。,原料药测定结果的相对标准偏差应不超过,0.15%0.20%,高氯酸滴定液变黄，系高氯酸分解所致，不可再用。,重金属,含葡萄糖的注射液,:,重金属限度一般以葡萄糖的含量计算，标准铅溶液的用量须根据限度值计算确定，以葡萄糖注射液为例：,取本品适量,(,约相当于葡萄糖,3g),按葡萄糖含量计算，含重金属不得过百万分之五。,标准铅溶液,(10g/ml),用量的计算,:,V=3,5,10,-6,/(10,10,-6,)=1.5(ml),重金属,其他注射液重金属一般以体积计算。例,:,氯化钠注射液：取供试品,50ml,.,含重金属不得过千万分之三。,标准铅溶液,(10g/ml),用量计算,:,V=3,10,-7,50,/(10,10,-6,)=1.5(ml),干燥失重,条件：常压：,105,减压，,20mmHg,以下，干燥剂应保持有效状态,恒重,：连续两次干燥或炽灼后的重量差异,100mg 0.1mg,10100mg 0.01mg,1g 0.05%,最大日服剂量 鉴定限度,10mg2g 0.2%or 2mg TDI,2g 0.10%,最大日服剂量 质控限度,100mg2g 0.2%or2mg TDI,2g 0.15%,TDI:total,Dailly,Intake,仿制药杂质限度,应与已上市药品（首选原开发厂的）进行全面的质量对比及稳定性考察。根据制备工艺和考察结果并参考已有国家标准确定杂质检测方法和限度。,无法获得同品种药品标准的，杂质限度可参考同一药物其它剂型的标准或设定为,已上市产品实测值,的两倍以内。,如发现新的杂质应注意有无安全性隐患，必要时通过安全性研究确定合理的限度。,质量标准的规范化,热原或细菌内毒素检查剂量应合理有据，,应考察细菌内毒素检测方法的可行性，可能的话予以采用。,质量标准的规范化,12,、实验用溶剂的选择与协调,应根据溶解度实验结果合理选择溶剂，避免脱节。原则上应低毒、易得、经济。,质量标准的规范化,13,、供试品取样量：应具代表性并满足精密度的要求；,制剂取样量宜按规格所用成分来表达，如：取本品细粉（约相当于,XXXX 25mg),精密称定,。,质量标准的规范化,14,、溶液的配制：无论振摇还是超声，条件要合理有据，不要随意限定。,如：振摇,30,分,超声,20分,质量标准的规范化,15,、供试液浓度,应使测得值或计量值（峰面积、吸收度、滴定液体积等）可靠、准确。,酸碱度、溶液的澄清度与颜色检查浓度均需合理设计。,质量标准的规范化,16,、溶液的配制,“,精密,”,与否应与检测项目的精度要求相匹配。,17,、进样量：,GC,取顶空气进样，一般,1ml,；,HPLC,用,loop,进样，一般,20ul,质量标准的规范化,热原或细菌内毒素检查剂量或限度均应合理有据，根据临床人用计量折算，并应进行相应的方法学验证。,细菌内毒素法应进行干扰性试验，考察可行性。,微生物限度检查,:,也需进行方法学验证！,质量标准的规范化,规格,每一制剂单位中含有主药的量,如按活性成分表示时，应用中文而不用分子式表示。如：,0.5g(,按头孢吡肟计）,规格在,0.1g,以下的,用,mg,为单位表示；,0.1g,以上,的用,g,为单位表示；如：,50mg,；,0.1g;,质量标准的规范化,液体制剂规格中还应注明每支的装量，如：,2ml:10mg 10ml:0.25g,多剂量的制剂一般应注明浓度，同时加注装量如：,1,，（,1,）,10g (2)15g,或：,10g,：,0.1g,同品种多规格：应从小到大顺序排列,喷雾剂、喷剂等规格内容要标全。,质量标准的规范化,贮藏条件,密闭：防止尘土及异物进入。,密封：防止风化、吸潮、挥发或异物进入。,冷处：,2,10,度。,阴凉处：不超过,20,度。,凉暗处：避光并不超过,20,度。,应根据药品性状并结合稳定性情况确定贮藏条件。,质量标准的规范化,贮藏,原料药一般密闭保存,易吸潮、风化或挥发的药品应密封保存,供直接分装制备注射剂的原料药需严封,书写顺序：包装要求,-,贮存条件，如：,密闭保存；密闭，于阴凉处保存。,密封，冷处保存,。,结语,实验操作的标准化是保证研究结果准确可靠的重要基础，必须引起足够的重视。,质量标准的规范化是一系统工程，需从研究阶段做起。这对保证注册检验、标准复核的顺利进行以及我国药品标准体系的完善都有实际意义。需要大家的努力。,结语,药品是一类特殊的商品，药品注册是以安全有效、质量稳定可控为前提的，质量及各项研究工作都应本着实事求是、科学严谨的原则，要认真地、规范合理地做好每一项试验，为药品注册提供可靠的资料。,谢谢！,