地中海贫血筛查-血液学分析.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,地中海贫血检测,血液学分析,容敏逢,主要内容,筛查方案,血液学分析,地贫基因型与临床表现,地中海贫血筛,查及产前诊断流程,被检对象,（婚前或孕中期）,血液学分析,（,MCV,，,Hb A2,变化）,排除地贫,地贫携带者,遗传咨询，配偶检查,血液学分析,（MCV,Hb A2变化）,地贫携带者,排除地贫,遗传咨询,双亲基因分析,胎儿产前诊断,地中海贫血的临床特征,小细胞低色素性溶血型贫血,(,中、重度,),黄疸,肝脾肿大,(,脾大明显,),骨髓扩增,发育迟缓,合并感染,Barts,水,肿胎,(,地贫,宫内或出生,后数小,时内死亡,),地贫血液学分析,最常用的方法,:,红细胞平均容积,(MCV),、红细胞脆性试验、,Hb,电泳联合检测进行筛查,发现异常者再进行基因诊断。,地中海贫血的血液学表型,特征,RBC,脆性,RBC,参数,MCV,MCH,细,胞形态变化,Hb,电泳分析,Hb A,2,(,),或,(,),Hb Barts,(,),Hb H(,)Hb E(,),贫血实验室诊断程序,贫血的形态学分类,贫血类型,MCV,（,fl,）,MCH(pg,),MCHC(g,/L),特征,小细胞低色素性贫血,80,24,200300,珠蛋白合成异常，缺铁性贫血，慢性失血,小红细胞正色素性贫血,80,32,320360,骨髓呈巨幼红细胞特征,正红细胞正色素性贫血,80100,27,32,320360,急性失血，急性溶血，再生障碍性贫血,人类不同时期血红蛋白的组成,人血红蛋白的组成,胚胎期血红蛋白：,Hb,Gower 1,（,x,2,e,2,）,Hb,Gower 2(,a,2,e,2,),Hb,Portland(,x,2,g,2,),即,Hb,Portland 1,另有少量,Hb,Portland 2(,x,2,b,2,),，,Hb,Portland 3(,x,2,d,2,),胎儿期主要血红蛋白：,HbF,（,a,2,g,2,）,成人主要血红蛋白：,HbA,（,a,2,b,2,）,约占血红蛋白总量96.597.5%,HbA2,（,a,2,d,2,）,约占血红蛋白总量,2.53.5%,HbF,（,a,2,g,2,）,约占血红蛋白总量,1%,以下。,地中海贫血表型阳性诊断参考标准,地中海贫血,MCV,82fL,、,HbA,2,2.5%,、,HbF,2%,、红细胞形态异常，其中一项阳性者。,地中海贫血,MCV,82fL,、,HbA,2,3.5%,、,HbF,3.5%,、红细胞形态异常，其中一项阳性者。,血红蛋白电泳图谱,1 2 3 4 5,1.,正常人,HB,2.,轻型,地贫,3.,异常,HB E,杂合子,4.,新生儿,HB Bart,s,(,4,),(,地贫标准,型,）,5.HB H,(4,),Normal AA,2,AE Barts AF HA,+,-,500V,25min,全自动血红蛋白琼脂糖凝胶电泳图谱,1,、正常成人,HbA2,无,HbF,区带,;,2,、成人,HbA2,升高,但,HbF,碱变性含量正常,图谱中不能扫描出,HbF,区带,;,3,、成人,HbA2,升高,HbF,碱变性含量稍高于正常,图谱中可见浅染,HbF,区带,;,4,、成人,HbA2,升高,HbF,碱变性含量高于正常,图谱中可见一浅染,HbF,区带,;,5,、成人,HbA2,升高,HbF,碱变性含量明显高于正常,图谱中可见一清晰,HbF,区带。,a-,珠蛋白基因突变及其遗传学分型,就遗传单体型而言,a-,珠蛋白基因突变可分成三类：,a-,地贫,2,缺失突变,左缺失（,-a,4.2,），右缺失（,-a,3.7,）、,-a,2.7,a-,地贫,I,缺失突变,基因型为（,-,），包括：,-SEA,、,-THAI,、,-FIL,及,-HW,a-,地贫非缺失突变,基因型为（,a,a,T,），包括：,a,a,CS,，,a a,QS,，,a a,ws,HbH,病基因型可分成缺失型和非缺失型两种：,缺失突变基因型：（,-a,3.7,/-,）、（,-a,4.2,/-,）及,(-a,2.7,/-),非缺失突变基因型：（,aa,T,/-,）和（,aa,T,/,aa,T,）,a-,地中海贫血临床类型,根据临床表现严重程度，可分成以下四种,静止型,a-,地贫,（,aa,a-,）或（,aa,a,a,T,）,出生时脐血血红蛋白含少量,Hb,Barts,，,-,般少于,5,患者无临床症状,轻型（标准型）,a-,地贫,（,a a/-,）或（,a-,a-,）,出生时脐血血红蛋白,Hb,Barts,占,5,-10%,患者多无明显临床症状,实验室检查可小细胞低色素性贫血，,MCH,和,MCV,均较低,血红蛋白,H,病,（,-a/-,），或（,a-/-,），或（,a,a,T,/-,），或（,a,a,T,a,a,T,）,出生时脐血,Hb,Barts,约占,20,-30,，此时,HbH,含量较低；但出生后,Hb,Barts,含量迅速降低，,HbH,含量逐渐增高。通常成年期患者,HbH,含量会持续在,4%-20%,范围内。,终生轻度至中度贫血和肝脾肿大等，但差异较大,.,实验室检查可见小细胞低色素性贫血，红细胞内可见包涵体,HB Barts,胎儿水肿综合征（,-/-,）,Barts,为主,少量,Hb,H,和,HbPortland,患胎多于妊娠晚期（,34,40,周）或产后数小时内死亡,-,珠蛋白基因的突变,-,珠蛋白基因点突变：,-,珠蛋白基因最常见的突变类型。包括单碱基置换和数个碱基缺失或插人突变。,在中国,-,地贫群体中,41/42,（,-TCTT,）、,IV S-654(CT),CD17(AT),-28,AG,）和,CD71/72,（,+A,）等,5,种突变最常见，约占总突变率,90%,以上,大片段缺失：,缺失突变涉及基因组上较大片段的缺失包括,-,地贫和遗传性胎儿血红蛋白持存症,(hereditary,persistance,of fetal,hemoglobin,HPFH,),。此外，,G,-,和,A-,珠蛋白基因启动子区的突变也可导致,HPFH,。,突变类型,编码区的无义突变、移码突变和起始密码突变：,如,CD41-42,，,CD71-72,，,CD17,突变后形成终止子，表现为,0,。,非编码区,IVS-1,和,IVS-2,突变,如,IVS-II-654,突变影响,mRNA,的,拼接，表现为,。,影响转录的突变,：,如,-28,，,-29,的突变影响基因的转录，表现为,。,b,地贫的,基因型与表现型,重型,-,地中海贫血,/,、,0/,0,、,0/,（纯合子或双重杂合子）,所有患者有组织缺氧症状，可出现“地中海贫血面容”，生长发育迟缓。红细胞体积小且低色素。过剩的游离,链形成,链包涵体，引起溶血性贫血，靠输血维持生命。,实验室检查主要可见：血红蛋白定量约为,20-30g/L,或更低；红细胞体积细小，形态不一，靶形红细胞较常见，网织红细胞增高；血红蛋白电泳时,HbA,缺乏或严重缺乏，,HbF,增高达,30,以上（偶可达,90%,以上）。,轻型,-,地中海贫血,A/,、,A/,0,（杂合子）,患者症状较轻，轻度贫血，轻度肝脾肿大。红细胞脆性降低，小细胞，低色素，,MCV,、,MCH,较低。,实验室检查可见：血红蛋白定量约为,90-120g/L,或更低,;,小细胞低色素性贫血，,MCH,和,MCV,分别为,20,22pg,和,50,70fl;,红细胞脆性降低；约,50%,患者,HbF,增高，约为,1,-3%,，甚少大于,5%,；,HbA2,量增高（达,4%-8%,）。,b,地贫的,基因型与表现型,中间型,-,地中海贫血,/,、,/,0,（纯合子或双重杂合子）,患者临床症状介于重型和轻型之间，如中度偏重贫血，生长发育迟缓，黄疸等。血液检查呈小细胞低色素贫血症。,实验室检查呈小细胞低色素性贫血症改变，血红蛋白定量部分患者可低至,60g/L,，但也有患者高达,100-120g/L,本型患者通常属某些,-,地中海贫血变异型纯合子，如日,+,地贫（高,F,）,+(,高,F),地贫或两种不同变异型地中海贫血的双重杂合子，如,+,地贫,+,地贫。,血液学分析的敏感性和特异性,RBC,脆性假阴性,血常规检测,(MCV),对静止型地贫有小概率的漏检,静止型,a-,地贫患者多无临床症状,E,/N,基因型患者的,MCV,十分接近筛查值这部分地贫患者极易漏诊,通过,Hb,电泳可对,-,地贫进行明确诊断,HbA2,轻度增高诊断,-,地贫的敏感性可达,96.8%,特异性可达,97.4%,Hb,电泳对轻型,-,地贫无诊断意义,轻型,-,地贫无,HbBarts(4),和,HbH,-,地中海贫血复合,-,地中海贫血时多表现为,-,地中海贫血的特征,造成,-,地贫漏检,.,地中海贫血合并缺铁性贫血造成地贫漏检,.,谢谢！,亚能生物技术（深圳）有限公司,www.dbs-,