乙肝标志物检测.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,乙型肝炎病毒标志物检测,概述,乙型肝炎病毒（,HBV,）是一种嗜肝脱氧核糖核酸病毒,属于包膜病毒。,在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被,HBV,感染过，5%的人口为,HBV,慢性感染,中国：乙肝高发区，人群,HBsAg,的检出率达9.8%,HBV,形态与基因结构,嗜肝,DNA,病毒科,(,Hepadnaviridae,),电镜：,3,种形态,乙型肝炎病毒,小球形颗粒,空心包膜，不含核酸,管形颗粒,两者均为过剩的病毒外壳，仅含,HBsAg,，,无感染性,“空心汤团”,形态与基因结构,Dane,颗粒（完整的病毒）形态,HBsAg,HBcAg,HBV DNA,DNAP,（外膜蛋白）,（核衣壳蛋白）,HBeAg,HBV Viral Genome Organization,HBsAg,HBcAg,HBeAg,3200 Base Pair Genome,Hepatocyte,receptor,bindng,site,HBV DNA Polymerase,Protein that,transactivates,transcriptional,promotors,图,4-2,血清中的,Dane,颗粒和外膜颗粒毒粒有双层外,膜,(),含核心（）,乙型肝炎病毒（电镜）,DANE,氏颗粒直径,42NM核心直径,27NM,乙肝六项检测,参考值：,ELISA,法为阴性,放射免疫分析（,RIA,）法为阴性,HBV,抗原抗体系统,HBsAg,：表面抗原，是,HBV,的外壳，不含,DNA,其本身不具有传染性，但常与,HBV,同时存在，常被,作为传染性标志之一。是,HBV,感染的基本标志，,也是最早出现的血清学标志之一。,HBsAg,阳性见于：,乙肝的潜伏期、急性期,慢性乙肝,病毒携带,与,HBV,感染有关的肝硬化和原发性肝细胞癌,注意,HBsAg,阴性并不能完全排除,HBV,感染,HBV,抗原抗体系统,抗,-,HBs,：特异性中和抗体、保护性抗体，可阻止,HBV,穿过细胞膜进入新的肝细胞。,抗,-HBs,阳性：可提示对乙肝病毒有一定程度的免疫力,见于：注射乙肝疫苗或乙肝高效价免疫球蛋白,(HBIG),后，产生的主动或被动免疫。,乙型肝炎恢复期，,隐性感染的健康人，自身产生了免疫力,HBV,抗原抗体系统,HBcAg,（核心抗原）：一般情况不易从血清中检测到,游离的,HBcAg,。,HBcAg,阳性提示患者血清中有感,染的,HBV,存在，其含量较多表示复制活跃，传染,性强，预后较差。,抗,-,HBc,：非中和抗体，分,IgM,、,IgG,和,IgA,三型,抗,-,HBc,IgM,：通常在出现症状时即可检出，一般持续约,6,个月，提示,HBV,复制，是急性感染的重要指标，也是,慢性活动性肝炎,的重要标志,抗,-,HBc,IgG,：在抗,-,HBc,IgM,下降及消失后出现，可伴随感染者终生存在，是既往感染过,HBV,的指标。,HBV,抗原抗体系统,HBeAg,阳性：与,HBsAg,平行出现，较,HBsAg,消失早,意义：表示乙肝处于活动期，并有较强的传染性。,HBsAg,持续阳性可转为慢性或肝硬化。孕妇阳,性可垂直传播。,抗,-,HBe,阳性率：慢性乙肝为,48%,，肝硬化为,68.3%,，肝,癌为,80%,在,HBeAg,消失后出现 表示,HBV,在体内复制减少或传染,性减弱或消失。,乙肝急性期即出现阳性者，易进展为慢性乙肝。,血清学检测的临床意义,HBsAg,抗-,HBs,HBeAg,抗-,HBe,抗-,HBc,临床意义,急性或慢性感染(大三阳),+,-,+,-,+,+,+,+,乙肝后期或慢性感染(小三阳),-,-,+,+,-,-,-,潜伏期或急性乙肝早期,-,-,+,+,+,痊愈或恢复期,有免疫力,-,-,-,-,-,+,+,+,-,-,痊愈,有免疫力,疫苗接种或曾经感染过,有免疫力,乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前,S,1,和前,S,1,抗体测定,概念：,乙肝病毒表面抗原蛋白前,S,1,位于,HBV,病毒颗粒的表面，是乙肝病毒识别肝细胞表面特异性受体的主要成分，是乙肝病毒复制和活动的标志物。,参考值：,ELISA,法或放射免疫分析（,RIA,）法：,Pre S,1为阴性 抗,Pre S,1,为阴性,临床意义：,1,、非常重要的传染性指标，作为病毒复制的标志较,HBeAg,敏感。,2,、前,S,1,抗原阴转越早,、,抗,Pre S,1,阳转越早，患者病程,越短、预后越好。,乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前,S,2,和前,S,2,抗体测定,概念：,乙肝病毒表面抗原蛋白前,S,2,（,Pre S,2,）位于,HBV,病毒颗粒的表面蛋白成分，是乙肝病毒侵入肝细,胞的主要结构成分；乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前,S,2,抗体,是乙肝病毒,HBV,的,中和抗体,。,参考值：,ELISA,法或放射免疫分析（,RIA,）法：,Pre S,2,为阴性 抗,Pre S,2,为阴性临床意义：,1,、,Pre S,2,为阳性提示,HBV,复制异常活跃，有传染性。,2,、抗,Pre S,2,为阳性，见于乙肝急性期及恢复早期，,提示,HBV,已被清除，预后较好。,乙型肝炎病毒,DNA,测定,概念：,乙型肝炎病毒,DNA,（,HBV-DNA,）呈双股环形，是,HBV,的基因物质，也是乙型肝炎的直接诊断证据。,参考值：,实时荧光定量,PCR,法,:,阴性,临床意义：,1,、,HBV-DNA,阳性：是诊断乙肝的佐证，提示,HBV,复,制及有传染性。,2,、也用于监测应用,HBsAg,疫苗后垂直传播的阻断效,果，若,HBV-DNA,阳性，表明疫苗阻断效果不佳。,乙型肝炎病毒,YMDD,变异测定,概念：,YMDD,（酪氨酸,-,蛋氨酸,-,天门冬氨酸,-,天门冬氨酸）位点是,HBV,反转录酶的活性部分，属高度保守序列。在,HBV,的反转录过程中，,YMDD,位点中的,YM,能与模板核苷末端糖基相作用，影响寡核苷酸与模板链的结合。,参考值：,实时荧光定量,PCR,法、基因芯片分析、焦磷酸测序法和基因克隆与测序法：,该位点序列为酪氨酸,-,蛋氨酸,-,天门冬氨酸,-,天门冬氨酸,临床意义：,临床意义：,YMDD,是,HBV,反转录酶发挥催化活性所必需的关键结构。,目前临床上广泛使用的,胞苷类似物拉米夫定,等抗病毒药物，作用靶位主要是,HBV,反转录酶，通过与底物,dNTP,竞争结合以抑制,HBV,的反转录和复制。,当病毒,YMDD,中,M,突变为异亮氨酸（,I,）或缬氨酸（,V,），就可能引起抗,HBV,类药物的药效丧失，从而产生耐药性。,YMDD,测定结果为临床抗,HBV,类治疗用药提供了实验室诊断依据。,结束,