血液细胞形态学检查.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,血液细胞形态学检查,北京协和医院血液科,葛昌文,工作步骤,1.,登记,(1),收到标本后，登记患者姓名、性别、年龄、病历号，并告知病人取报告的时间和日期；,(2),标本要登记化验号及分类号、标本采取日期穿刺部位、标本来源（如：病房、门诊、外院）。,.,染色,(1),在玻片血膜头部标明姓名或编号，并将其平置于染色架上；,(2),加瑞氏染液,6-8,滴覆盖全部血膜，随后加缓冲液,(PH6.4)10-12,滴，用洗耳球吹匀；,(3),血片染色,10-15min,，骨髓片染,15-20min(,根据有核细胞的多少而定,),，必要时用低倍镜观察染色效果；,(4),手摇玻片数次，使染液渣上浮，用自来水先缓后急冲去染液，晾干待检。,3.,镜检,外周血涂片检查法,1.,复习申请单的临床诊断、送检目的和要求。,2.,肉眼观察涂片血膜大小、厚薄程度、染色好坏。,3.,低倍镜检查,（,1,）涂片的厚薄及染色情况。,（,2,）估计白细胞数（可大体核对,WBC,直接计数是否正确）。,（,3,）了解白细胞大致分布及片尾部有无异常细胞、特大细胞及细胞团。,（,4,）选择具有代表性的镜检区域（多介于涂片体尾之间，细胞分布均匀，互不重叠、挤压）。,4.,油镜检查,(1),进行,WBC,分类计数：一般计数,100,个有核细胞,(,若,WBC1.010,9,/L,，,WBC,分类计数不足,100,个，则注明有核细胞少见，全片分类多少个,WBC,；特殊情况如骨髓移植后，则注明有核细胞少，无法分类,),，观察细胞形态、比例及有无巨大或异常细胞。,(2),白细胞分类计数：计数中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞比例，注意各类细胞形态有无异常。,(3),注意片尾部有无不成熟细胞或异常细胞,(,如中晚幼粒、有核红细胞、淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等,),。,(4),红细胞形态（群体、个体）及排列（重叠、缗钱状）,(5),血小板数量、形态及聚集性。,(6),寄生虫。,5.,外周血涂片报告单内容：,(1)WBC,数及主要成分、各类白细胞比例及形态是否 正常。,(2),有无不成熟白细胞、有核红细胞及异常细胞情况。,(3),成熟红细胞大小、形态、色素状态,(,中心淡染、核 残余物、多嗜性,RBC),及排列等情况。,(4),血小板数量、形态及聚集性。,(5),寄生虫。,骨髓细胞形态检查法,1.,复习患者病历资料、实验室检查结果及治疗情况,2.,肉眼观察,涂片在染色前均需用肉眼观察；以确定标本的取材、涂片是否“合格”，血膜厚薄，有无脂肪珠及“骨髓小粒”。,3.,低倍镜检查,(1),取材、涂片、染色的好坏。,(2),有核细胞多少,(,判定增生程度,),及其分布；粒与红系的比例及各阶段比例的初步印象。,(3),寻找异常细胞如转移癌细胞等。,(4),选择油镜检查区域：要求能代表此涂片细胞的基本情况，有核细胞多，分布均匀，形态舒展、清晰易辨认。,4.,油镜检查,观察细胞形态及进行有核细胞分类计数。一般油镜观察区域在涂片血膜的体尾交界部位，分类计数时标本上下移动，验证低倍镜检查所得的初步印象。通常计数,200,个有核细胞，特殊情况可计数,400,或,500,个有核细胞，增生低下或有核细胞甚少时，可分类计数,100,个有核细胞。在油镜观察中，通过血细胞工作站对有代表性的细胞区域采集图象并入库保存（见血细胞工作站操作程序）。具体内容如下：,(1),骨髓有核细胞分类计数，以百分率,(%),表示，计算各系所占百分比和粒红比例,(M/E),。,(2),粒系：计算粒系所占,%,及各阶段比例；观察核移向,(,左移、右移,),及形态的改变,(,巨幼变、双核、,P-H,畸形、胞浆颗粒多少或有无,),。,(3),红系：计算红系所占,%,及各阶段比例；观察形态有无异常,(,巨幼变、类巨幼变及双核、多核、核分裂等残余物,),、多嗜性红细胞多少、成熟红细胞形态及排列等。,(4),淋巴细胞及单核细胞比例及形态有无异常,(5),巨核系：外周血血小板数量正常时,(100-30010,9,/L),一般不做巨核细胞计数；当,PLT,50010,9,/L,时，应计数全片的巨核细胞数量，但无需分类；当,PLT,10010,9,/L,，要计数全片巨核细胞，分类,50,个巨核细胞,(,或换算成,%),，并注明有无血小板生成。注意病理性巨核细胞,(,巨大异常巨核、亚小型、小型、微型巨核,),计数,100,个有核细胞中的病理性小型、微型及亚小型巨核细胞的数量。注意血小板量与质,(,形态、大小、聚集性等,),的改变。,(6),非造血细胞的种类和数量：此类多在涂片尾部或边缘处，分类计数结果可能比实际低。,(7),异常细胞：如 转移瘤细胞、高雪氏细胞、,N-P,细胞、恶组细胞等。,5.,骨髓涂片检查报告单内容：,(1),取材涂片及染色情况。,(2),骨髓增生程度及主要成分，一般用,M/E,表示。,(3),粒系：增生情况及所占,%,，各阶段比例，核移向,(,左移、右移,),形态发育与异常改变，嗜酸性及嗜碱性细胞情况。,(4),红系,:,增生情况及所占,%,各阶段比例，形态有无异常,(,如巨变、类巨幼变、分裂相、核残余物、双核、多核等,),及成熟红细胞形态。,(5),淋巴及单核细胞：数量和形态是否有异常。,(6),巨核系：数量、分类及形态有无异常，产血小板情况；血小板形态和数量。,(7),浆细胞：形态与数量，有无不成熟或病理性浆细胞。,(8),造血与非造血细胞岛及非造血细胞增生情况。,(9),涂片中有无巨大异型及肿瘤细胞等。,(10),寄生虫。,(11),结论,:,诊断、印象和建议。,附录,:,1.,骨髓增生程度标准,:,增生度标 准,红,(,无核,),细胞,:,有核细胞,增生极度活跃,增生明显活跃,增生活跃,增生尚活跃,增生低下,增生极度低下,1-5 :1,6-10 :1,11-20 :1,21-40 :1,41-100 :1,100,以上,:1,2.,骨髓细胞正常值,:,粒,系,原始,0-1.0,红,系,原始,0-0.5,淋巴系,原始,早幼,0.1-2.5,早幼,0-2.0,幼稚,0-0.6,中,性,中幼,3.18-13.2,中幼,3.77-13.0,淋巴,8.4-32.4,晚幼,5.22-20.2,晚幼,3.44-10.0,其,他,组织,0-1.0,杆状,8.47-24.4,巨,核,系,原始,吞噬,0-0.1分叶,6.12-25.0,幼稚,内皮,0-0.2,嗜酸性,早幼,颗粒巨,0-0.2,组碱,0-0.1,中幼,0-1.1,产板巨,组酸,0-0.1,晚幼,0-2.1,裸核巨,浆,0-1.2,杆状,0-1.1,小原,成纤,分叶,0-3.4,小幼,脂肪,0-0.1,嗜碱性,早幼,小巨,中幼,0-0.1,单核系,原始,晚幼,0-0.1,幼稚,杆状,0-0.1,单核,0-3.0,分叶,0-0.3,3.,说明,:,(1,),本室采用国联,M99-M,型医学图象工作站，参阅其使用手册。,(2),本室骨髓分类采用全骨髓计数方法,(ANC),，当红系大于,50%,时，采用非红细胞计数法,(NEC),；,(3),诊断标准采用张之南主编,血液病诊断及疗效标准,第二版，其中白血病及,MDS,的诊断采用,FAB,分型标准。,