地中海贫血及新生儿筛查检测项目介绍.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2013/12/12,#,地中海贫血及新生儿筛查检测项目介绍,王冰冰,博士,广东凯普生物科技股份有限公司,地中海贫血检测技术介绍,地中海贫血,地中海贫血（,Thalassemia,），简称地贫，世界上发病率最高、危害性最大的单基因遗传性疾病，主要分为,-,地贫和,-,地贫。,我国以长江以南各省发病率高，多见于广东、广西、海南、福建、云南、贵州、四川 等地区。,重型,地贫导致孕妇新生儿死亡率增加；,重型,地贫胎儿出生时与正常胎儿无异，到,3-6,个月时就会逐渐出现严重贫血，如果不治疗，一般,5,岁左右死亡；,中间型地贫患儿需长期输血，长大基本丧失劳动力，生存质量明显下降。,地贫难治但可防！,把住“三关”,-,婚检、孕检和产检,地中海贫血,地贫基因携带率不是防控目标，减少了多少中重度地贫的出生才是关键！,地中海贫血,中国南方,和,地贫的人群携带率,地区,携带率（,%,）,地贫,地贫,合计,广西,17.6,6.4,24.0,云南,9.8,7.3,17.1,海南,12.7,2.7,15.4,广东,8.5,2.5,11.0,贵州,4.2,5.1,9.3,江西（南部）,3.5,2.9,6.4,福建,4.1,1.5,5.6,湖南,2.2,2.0,4.2,四川,1.9,2.2,4.1,重庆,1.0,2.3,3.3,J Clin Pathol,2004;Clin Genet,2010;,中华医学遗传学杂志,2012.,地中海贫血,地中海贫血的临床类型,基因类型,临床类型,症状,/,正常人,-,/,或,T,/,静止型,无症状,-/,、,-,/,T,或,T,/,T,或,-,/-,轻型,（标准型）,轻度贫血,-/-,或,-/,T,血红蛋白,H,病,溶血性贫血,-/-,Hb Barts,胎儿水肿综合征,胎儿水肿,-,a,3.7,-,a,4.2,a,2,T,a,1,-,地中海贫血,地中海贫血的临床类型,基因类型,基因产物,临床类型,临床表现,+,/,A,、,0,/,A,能合成适量的,链,静止性及轻型,地贫,贫血不明显或轻度贫血,+,/,+,变异型纯合子,链部分合成,中间型,地贫,介于重型和轻型之间（不需输血）,+,/,+,、,0,/,0,、,+,/,0,链几乎不能合成,链合成相对增加,Hb F,和,Hb A,2,增加,重型,地贫,地中海贫血面容,溶血性贫血（需输血）,+,0,地中海贫血,突变,种类,发生区域,致病原理,突变类型,表型,转录,突变,起始位点,上游启动子,TATA,框,使转录效率降低，,mRNA,生成量减少而产生的,+,地贫,-,28(,A-G),+,-,29(,A-G),+,RNA,加工突变,非,编码区,IVS-1,和,IVS-2,影响,mRNA,剪切等加工过程不能准确进行形成异常的,mRNA,，导致,0,或,+,地贫,IVS-1,nt 1(,G-T),0,IVS-1,nt 5(,G-C),+,IVS-2,nt 654,(C-T),+,RNA,裂解部位（加帽部位）,由于异常的,RNA,加帽部位突变，影响,RNA,转录后不能准确裂解，产生不稳定的,mRNA,，使正常,链生成减少引起,+,地贫,CapM(-,AAAC),+,编码区,外显子突变引起相邻裂解信号被激活，影响,IVS,正常位点的剪接，生成异常,mRNA,，产生,Hb E,CD26/,eM,(,G-A),Hb,E,翻译,突变,编码区,导致,生成的,mRNA,稳定性降低，或形成无功能的,mRNA,，从而不能合成正常的,珠蛋白链，多数为,0,地贫,起始密码突变,IntM(,T-G),0,无义突变,CD17(,A-T),0,CD43(,G-T),0,移码突变,CDs14/15(+,C),0,CDs27/28(+,C),0,CDs31(-,C),0,CDs41/42(-,TCTT),0,CDs71/72(+,A),0,地中海贫血的常见突变类型,凯普地中海贫血核酸检测技术,自主研发,的导流杂交技术平台，,两项,美国专利,主要性能,本试剂盒用于可以快速准确,同步,诊断中国人常见的,3,种缺失型,-,地中海贫血,（,-,SEA,、,-,3.7,和,-,4.2,）,和,3,种突变型,（,CS,、,QS,、,WS,）,及,-,地中海贫血,15,个突变位点,（,16,种突变,类,型,）,分别为：,【,IVS-II-654(C-T),、,-28(A-G),、,-29(A-G),、,CD14/15,（,+G,）、,CD17(A-T),、,CD27/28,（,+C,）、,E(G-A),、,CD41/42(-TTCT),、,CD43(G-T),、,CD71/72(+A),、,IVS-I-1(G-T,G-A),、,IVS-I-5(G-C),、,Cap(-AAAC),、,Int,（,T-G,）、,CD31(-C),】,。,样本采集,EDTA,或枸橼酸钠抗凝全血样本,羊水样本,滤纸血斑（采集卡）样本,绒毛膜样本,操作流程,结果分析,41-42N,17N,654N,71-72N,-28N,eN,41-42M,17M,654M,71-72M,-28M,eM,43M,14-15M,IVSI-1M,IVSI-5M,-29M,CapM,NP,CSN,QSN,3.7,WSM,IntM,SEA,CSM,QSM,4.2,31M,27-28M,注：,NP,指染色体上,基因的正常对照；,-28M,、,-29M,均以,28N,为正常对照；,14-15M,、,17M,以,17N,为正常对照；,41-42M,、,43M,以,41-42N,为正常对照；,QSM,、,WSM,以,QSN,为正常对照；,EM,654M,71-72M,CSM,分别以,EN654N,71-72N,，,CSN,为正常对照；,IVS-1M,IVS1-5M,、,31M,、,CapM,、,IntM,、,27-28M,未设正常对照。,结果分析,-SEA,/,N,/,N,-,SEA,/-,4.2,N,/,N,/,QS,N,/,N,-,SEA,/,QS,N,/,N,/,41-42,/,N,/,41-42,/,41-42,/,41-42,/,654,-SEA,/,41-42,/,N,产品优势,一张芯片同步,检测,-,地贫缺失、突变，,-,地贫突变,首次,实现,缺失型地贫的基因芯片,检测（不需电泳）,导流杂交快速,简便，杂交,时间仅需,30min,产品优势,临床应用,广东省计生地贫免费基因检测工作模式,广东省各地区计生站搜集血样，经,MCV,、,MCH,初筛，夫妻双方,MCV,都小于,82fl,则送样至省计生科研所，两周以内出报告；,血斑样本采集卡的应用，解决了物流问题；,采用最新的筛查流程。,人群筛查,夫妻双方血常规结果,MCV,小于,82fl,免费地贫基因检测,项目去年,8,月启动，,11,月开始送样，迄今为止，已经有近,3500,对夫妇接受了免费的地贫基因检测，其中,38%,的家庭需要进行遗传咨询以及产前检测跟踪。,发现了稀有的,HK,型,地贫以及稀有型别的,地贫，,数据还在进一步整理中。,临床应用,联合广东省梅州妇幼保健院建立全面的地贫防控体系,地贫防控网络体系是一套电子信息管理系统软件，这套软件是利用电子系统平台，对筛查、召回、诊断、治疗、遗传咨询和产前诊断服务的一系列工作进行登记和随访，做到随时跟进患者情况，以及把收集的资源和信息进行共享。在此防控网络体系基础上，可以在全国的任何一个地区查到患者自己的情况，也便于医生对患者情况的跟踪、访问。医院可以通过这套系统软件的电子平台来整理本院的数据，同时可以通过这个平台来申请查阅共享其他成员单位的数据。地贫防控体系系统的数据对临床有一定的指导意义，对了解各地区地贫状况提供参考。,临床应用,联合海南省人民医院开展海南黎族地贫流行病学调查及基因分析课题,该课题主要针对地贫的高发民族黎族开展，进行约,1,万人份的流行病学调查，分析其基因型别,新生儿筛查检测技术介绍,耳聋易感基因检测试剂盒（,PCR+,导流杂交法）,葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶缺乏症基因检测试剂盒,（,PCR+,导流杂交法）,新生儿筛查检测项目,新生儿筛查检测项目,葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶（,G6PD,）缺乏症是最常见的一种遗传性酶缺乏病,俗称蚕豆病。我国是本病的高发区之一，主要分布在长江以南各省，以海南、广东、广西、云南、贵州、四川等省为高。,G6PD,缺乏症发病原因是由于,G6PD,基因突变，导致该酶活性降低，红细胞不能抵抗氧化损伤而遭受破坏，引起溶血性贫血。临床表现为慢性非球形细胞溶血性贫血、蚕豆病、药物性溶血、新生儿黄疸及某些感染性溶血。,本试剂盒针对人外周血样本，用于检测中国人常见的,13,个,G6PD,基因突变位点。可以对,G6PD,缺陷相关疾病进行辅助诊断，指导临床药物使用，指导饮食生活习惯，预防溶血的发生。为优生优育提供疾病的遗传特性分析，预测胎儿患病风险；可用于新生儿,G6PD,筛查和辅助诊断，预防新生儿黄疸。,新生儿筛查检测项目,95N,392N,493N,592N,871N,95M,392M,493M,592M,871M,1004N,1024N,1311N,1360N,1376/1381N,1004M,1024M,1311M,1360M,1376M,1381M,1387/1388N,1387M,1388M,-,注：上表中,95N,392N,493N,592N,871N,1004N,1024N,1311N,1360N,分别为相应位点,95M,392M,493M,592M,871M,1004M,1024M,1311M,1360M,的正常对照。,1376/1381N,为,1376M,，,1381M,的正常对照，,1387/1388N,为,1387M,和,1388M,的正常对照。,新生儿筛查检测项目,正常样本,95M,杂合子,95M,纯合子,392M,杂合子,392M,纯合子,1388M,杂合子,新生儿筛查检测项目,耳聋是一种严重影响人类生活质量的常见先天性疾病，它可以由单一基因突变或不同基因的复合突变引起，也可由环境因素（如医疗因素，环境暴露，创伤，药物等）或基因和环境两者共同作用而致。在中国，先天耳聋的发病率约占中国聋人的,50%,，而遗传聋约占先天聋的,85%,，其大多数为,常染色体,隐性遗传。,我国遗传性耳聋患者所涉及的主要是线粒体,DNA,（,mtDNA,）、,SLC26A4,、,GJB2,和,GJB3,四种基因的突变。其中，,mtDNA,基因突变主要包括,1494M,、,1555M,、,7445M,和,12201M,；,SLC26A4,基因突变主要包括,IVS-M,、,1229M,、,2168M,；,GJB2,基因,突变,主要包括,35M,、,155M,、,176M,、235M,和,299M,；,GJB3,突变,主要以,538M,为主,。,本试剂盒针对人外周血样本，用于检测中国人常见的,4,个耳聋相关基因（,GJB2,GJB3,SLC26A4,和,12S rRNA,）的,13,个突变热点。每个样品需做,A,组和,B,组、两个多重,PCR,反应。可用于耳聋患者的病因诊断、遗传咨询、产前诊断和新生儿听力筛查，还可以帮助和提醒医生慎重使用特定种类的抗生素以避免造成携带基因突变的儿童致聋。,新生儿筛查检测项目,新生儿筛查检测项目,Biotin,35N,155N,176N,235N,299N,35M,155M,176M,235M,299M,1494N,1555N,7445N,G3538N,IVS7N,S2168N,1494M,1555M,7445M,G3538M,IVS7M,S2168M,S1229N,S1229M,S12201N,S12201M,正常样本,1494M,纯合子,1555M,纯合子,良心品质科学管理,Thank you,！,