血涂片制备染色及白细胞形态分解.ppt

根据,不同种类细胞,及细胞的,不同成分,，对,酸性及碱性染料,结合能力不同，,而使各种细胞呈现,各自的特点,。,器材,：,载玻片、推片、染架、吸耳球、显微镜、,微量吸管、拭镜纸。,试剂,：,瑞吉氏染液、磷酸盐缓冲液、香柏油、,乙醇,-,乙醚溶液。,标本,：,抗凝血。,左手持载玻片，右手持推片，将推片置血滴前方，向后移动到接触血滴，使血滴沿推片边缘展开成线状。,1.,血 涂 片 制 备,血液充分抗凝。,微量吸管虹吸取血,7-8,l,，置血滴于载玻片一端。,推片与载片呈,30,40,角,，向另一端,匀速地,推出。,血 涂 片 制 备,血 涂 片 制 备,推片,载玻片,血液,将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。,一张满意的血涂片应厚薄均匀,头 体 尾,涂片干燥后用,铅笔,在血涂片的头,部写上姓名和编号,李四,B,1 2 3,2.,血 涂 片 染 色,再加,瑞氏染色,液,5-8,滴，,液和,液充分混匀静置,5,分钟,直接在,无血膜处,流水冲洗,3-5,分钟,血涂片干燥后用油镜分类计数,200,个白细胞,李四,123,涂片干燥后加瑞氏染色,液,5-8,滴覆盖整个血膜,1,分钟,1.,玻片清洗：新玻片,常有游离碱质,因此应用,清洗液或10%盐酸浸泡24h,然后再彻底清洗。,用过的玻片,可放入适量肥皂水煮沸20min,再用热水将肥皂和血膜洗去,自来水反复冲洗,必要时再置95乙醇中浸泡1h,然后,擦干或烤干,备用。,2,.,使用玻片,：,只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁,、,干燥,、,中性、无油腻。,注 意 事 项,玻片,3.,良好的血,涂,片,厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。,血滴越大，角度越大，速度越大，血膜越厚。,4.,血涂片,干透,后方可染色，否则染色过程中血膜容易脱落。,血,涂,片制好后最好,立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。,注 意 事 项,推,片,5.,H,+,影响细胞染色,配制染液必须用,优质甲醇,稀释染液必须用,缓冲液,近中性水,冲洗,否则各种细胞染色反应异常,致使细胞的识别困难,甚至造成错误。6.,染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少有关。,染液越淡、室温越低、细胞越多,染色时间越长或适当增加染液量。,7.,染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血涂片上难冲洗干净。,流水冲去染液,不能先倒掉染液,以免染料沉着于血涂片上。,冲洗时间,不宜过久，以防脱色。,注 意 事 项,染色,3.,血涂片的观察,低倍镜观察,1.,染色情况,(,满意、偏酸、偏碱）,2.,细胞分布情况,油镜下分类计数：体尾交界处。,油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。,李四,123,中性杆状核粒细胞,中性分叶核粒细胞,单核细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞,淋巴细胞,中性杆状核粒细胞,正 常 细 胞 形 态,胞体：,圆形，直径,10-15m,。,胞核：,核形不一，呈,S,形、,U,形等，核凹陷程度大于核直径的,1/2,，核最窄径大于最宽径的,1/3,。核色质粗糙成块。,胞浆：,胞质量丰富，充满浅红色中性颗粒。,中性分叶核粒细胞,体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分,2-5,叶。直径,10-12,m,。,嗜酸性粒细胞,略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为,2,叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成桔红色。直径,10-15,m,。,嗜碱性粒细胞,体积略小于嗜酸性白细胞，细胞中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核,1-2,叶，染成淡蓝色。直径,10-11,m,。,单核细胞,体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径,14-20,m,。,淋巴细胞,小淋巴细胞：,与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成,深紫色。周围细胞质嗜碱性，染成淡蓝。,大淋巴细胞：,较大，核圆形。直径,6-8,m,。,细胞 形态 胞质着色 胞质内颗粒 细胞核型,中性杆 圆形 粉红色 量多 细小 均匀 紫红色 杆状,中性叶 圆形 粉红色,量多 细小 均匀 紫红色,2-5,叶,嗜酸 圆形 不清 粗大整齐均匀橘黄色,2,叶眼镜形,嗜碱 圆形 不清 量少 排列紊乱 不均紫黑色 覆盖核上 核形不清,单核 圆 椭圆 灰蓝色 细小尘土样紫红色 肾型 马蹄形,淋巴 圆 椭圆 透明 淡蓝色 多无 大细胞可有少量 圆 椭圆 肾形,红细胞,淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径,7-8,m,。,血小板,形状不规则，一般呈圆形，比红细胞和白细胞小得多，无细胞核，有质膜。,血小板在长期内被看作是血液中无功能的细胞碎片。,1.,本次实验的关键环节是什么？,2.,同一标本不同组分类是否一致，原因分析。,3.,5,种白细胞形态绘图。,分析讨论,Thank you for,your attention!,