C57BL／6小鼠金紫菱.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,C57BL/6,小鼠,一、来源,小鼠为生物医学研究中最常用的小鼠品系之一。,年立特（）用艾比,拉特洛坡,（）的小鼠株，雌鼠号与雄鼠号交配而得。,年从分离出和两个亚系。,年从引到中国医学科学院实验动物研究所。,二、基本特性,品系名称：,C57BL/6,类别：近交系小鼠,毛色：黑色,成熟期（雄性）：,8-10,周,成熟期（雌性）：,8-10,周,交配比例：,1:2,发情周期：,4-5,天,妊娠期：,19-21,天,平均每窝产仔数（第一胎）：,6,只,平均每窝产仔数（第二胎）：,7,只,哺乳期,:21,天,平均日饲料消耗量,:5g/8,周龄,平均日饮水消耗量,:6-7ml/8,周龄,三、饲养条件,1.,温度：,2026,。,2.,湿度：,4070,。,3.,光照：,12,小时亮,12,小时暗。,4.,饲育盒更换频度：配种鼠：每周,1,次。带仔鼠：每周,1-2,次。离乳鼠：每周,1-2,次。,5.,水瓶更换频度：每周,1-2,次,四、主要特性,、乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。,、有眼部缺陷；雌仔鼠,.,，雄仔鼠为小眼或无眼。,用可的松可诱发腭裂，其发生率达。,、对放射物质耐受力中等；补体活性高；较易诱发免疫耐受性。,、对结核杆菌敏感。对鼠痘病毒有一定抵抗力。,、干扰素产量较高。,嗜酒精性高，肾上腺素类脂质浓度低。对百日咳组织胺易感因子敏感。,五、主要用途,是肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究中常用的品系。,与其他品系相较，,C57BL/6,最适合动脉粥状硬化伤害的研究。,六、,C57BL,6,小鼠,CIA,模型的建立,目的：建立稳定的,C57BL,6,小鼠胶原诱导关节炎,(CIA),模型，构建进一步进行类风湿关节炎,(RA),发病机制及治疗研究的体系。,实验动物：近交系,C57BL,6(H-2),小鼠,40,只，雄性，,4,5,周龄，体重,15,00+0,32g,。,三级环境实验观察。,随机配对分为,CIA,模型组,20,只，对照组,20,只。,主要试剂与器材：鸡,型胶原蛋白、弗氏完全佐剂,(complete Freund s adjuvant,，,CFA),购自美国,Chondrex,公司；,抗小鼠,CD4-PE,CY5,、,IFN-,-FITC,、,IL-4,一,PE,及同型对照抗体均购自美国,Biolegend,公司；佛波酯,(PMA),、离子菌素,(,Ionomycin,),、莫能菌素,(,Monensin,),购自美国,Sigma,公司。,匀浆器为德国,IKA,公司产品；,流式细胞仪为美国,BD,公司产品。,模型建立方法：,鸡,型胶原蛋白,溶解于,0,05mol,L,冰醋酸,中，浓度为,2mg,ml,，将溶解的胶原与,CIA,等体积混合，,冰浴中使用匀浆器充分乳化。,免疫动物时，在小鼠尾根部多点皮内注射,0,1ml,乳剂,(,含,100mg,鸡,型胶原蛋白,和,200mg,结核分支杆菌,),。基础免疫后第,21,天以同样方法重复，避开初次免疫部位，进行加强免疫。同时，对照组用,CFA,与,0,05mol,L,冰醋酸等体积充分乳化后按上述方法进行免疫及,21,天加强免疫。,关节和关节外病变观察及关节炎评分,:,各关节病变程度按,5,级评分法,“,0,”,：无红肿；,“,1,”,：关节红不肿；,“,2,”,：关节轻度红肿；,“,3,”,：关节中度红肿；,“,4,”,：关节重度红肿伴功能障碍。,关节炎分数,(arthritis scoreAS),为每只小鼠所有病变关节分数的总和，最高分为,16,分。各剂量组所有小鼠关节炎分数之总和除以该组小鼠的只数，即为该组平均关节炎指数,(mean arthritic index,，,MAI),结果：对照组小鼠均未发病。,模型组小鼠在,5O,天的发病率达,7O%,，关节炎评分在,3,8,分，持续时间大约,100,天；,病理切片显示典型的炎性细胞浸润，滑膜增生，软骨及软骨下骨破坏；外周血,Th1,Th2,比值升高。,结论：应用,型胶原能在,C57BL,6,小鼠上成功建立,CIA,模型，该模型是进行,RA,研究的良好动物模型。,胶原诱导关节炎,(collagen induced arthritis,，,CIA),模型是一种免疫炎症模型，,CIA,的特征是多发性关节炎，发病机制和病理特征与人类风湿性关节炎,(rheumatoid,ar,thritis,，,RA),类似。,意义,：,CIA,的建立极大地推进了,RA,发病机制、治疗等方面的研究。目前对,RA,发病机制的研究已深入到蛋白质及基因水平，需要进一步明确分子及酶类在自身免疫反应各环节中的精确作用口,，建立稳定的,CIA,模型及检测体系对,RA,研究具有重要意义。,