分枝杆菌,梭菌属 2.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,第十八章 分枝杆菌属,Department of Microbiology,Harbin Medical University,主讲教师：陈思佳,第二篇 致病性细菌,第十八章 分枝杆菌属,Mycobacterium,医学微生物学教研室,哈尔滨医科大学,结核分枝杆菌,形态、染色及培养特性 抵抗力和变异性 致病物资及特点 所致疾病 免疫性及超敏反应 郭霍现象 结核菌素试验 卡介苗 治疗和预防原则,麻风分枝杆菌,形态染色特点 致病特点及分型 防治原则,非结核分枝杆菌,非结核分枝杆菌的分组及致病性,主要内容分枝杆菌属（,Mycobacterium,）,共同特性,细长略带弯曲的杆菌,生长速度慢,无鞭毛、无芽孢、不产生内外毒素,细胞壁含有丰富的脂质成分（分枝菌酸）,致病性与菌体成分相关,抗酸杆菌（,acid-fast bacillus,）,分枝杆菌属,分类,结核分枝杆菌复合群,结核分枝杆菌,牛型分枝杆菌,非洲分枝杆菌,田鼠分枝杆菌,麻风分枝杆菌,非结核分枝杆菌,根据生长速度,快生长菌,慢生长菌,第一节 结核分枝杆菌,Mycobacterium tuberculosis,(TB),流行病学,结核病的病原菌,1882,年德国细菌学家,Koch,证明,全球性卫生问题,是艾滋病高发区人群的首要死因,世界防治结核病日,3,月,24,日,结核病的国际形势,WHO,统计,世界,1/3,的人口感染结核,世界范围每年死亡人数为,200,万人,140,万（,2010,年）,90%,以上在发展中国家,每年新病例为,800,万,-1000,万人,我国结核病人,450,万人，每年死亡人数约,25,万,生物学形状,形态染色,培养特性,抵抗力,变异性,形态与染色,细长略弯,分枝状杆菌,无芽胞无鞭毛,无内外毒素,抗酸染色阳性,(Zeihl-Neelsen acid-fast stain),齐,-,尼氏抗酸染色法,Ziehl-Neelsen method for acid fast bacteria,涂片、固定、干燥,初染：石炭酸复红,脱色：,3%,的盐酸酒精,复染：美篮染液,干燥、镜检,培养特性,专性需氧，最适,pH6.5-6.8,生长缓慢：代时,18h,营养要求高,罗氏培养基：甘油、天门冬素、蛋黄、马铃薯、无机盐类、孔雀蓝,液体培养基,吐温,-80(Tween 80),抵抗力,Resistant to,干燥,酸碱,碱性染料,青霉素等,Sensitivity,紫外线,酒精,湿热,抗结核药物,异烟肼,利福平等,变异性,形态,L,型,Much,颗粒,菌落,耐药性,毒力变异,卡介菌,-,卡介苗（,Bacilli Calmette-Gurin,，,BCG,）,是毒力变异株，将有毒的牛型结核分枝杆菌培养于含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，,经,230,次传代,，,历史,13,年,而获得的,减毒活菌株,，目前广泛应用于结核病的预防,致病性,致病物质,类脂,蛋白质,多糖,致病物质,类脂（,lipid,）,分枝菌酸（,mycolic acid,）,.,抗酸染色特性,索状因子（,cord factor).,慢性肉芽肿,磷脂（,phosphatide,）,.,结核结节，干酪样坏死,蜡质,D,（,wax-D,）,迟发型超敏反应,硫酸脑苷酯（,sulfatide,）,.,细胞内寄生,蛋白质,结核结节形成、全身中毒,多糖（,polysaccharide,）,.,胞内寄生,所致疾病,感染类型,肺部感染：肺结核（原发感染、继发感染）,肺外感染,传播途径,呼吸道,消化道,破损皮肤黏膜等,侵犯多种组织器官,肺结核,-,原发感染(primary infection),多发生于儿童,原发灶,（渗出性炎性病灶）,淋巴管,肺门淋巴结,原发综合征,胸透为哑铃形阴影,原发结核,原发综合征：原发灶、淋巴管炎、肺门淋巴结肿大,致病性,原发型肺结核,正,肺结核,-,继发感染：成人多发,诱发因素,原发病灶中潜伏的结核分枝杆菌引起,外界的结核分枝杆菌再次入侵,感染特点,病灶局限，不累及临近淋巴组织,易发生慢性肉芽肿和干酪样坏死和空洞,肺结核,-,继发感染,病程呈慢性渐进性，伴有乏力、体重减轻、咳嗽、盗汗、午后潮热、胸痛等。病灶多局限呈干酪样结节，若结节破溃，则可形成空洞，传染性强。,致病性,右上干酪样肺结核,右下干酪样肺结核,右下干酪性肺炎并空洞形成,肺外感染,免疫力低下患者,形成全身粟粒性结核或播散性结核,临床表现,咳嗽，咳痰,(,血痰）,全身倦怠感,微热,盗汗,胸痛,食欲低下,体重减少,感染结核菌的过程,感染不发病,（既往感染）,初次感染发病,原发感染,抵抗力下降时发病,继发感染,成人多发,数月,-2,年之内发病,儿童多见,80%-90%,5%-10%,5%-10%,免疫机制：,主要是细胞免疫,感染免疫、有菌免疫（,infection immunity,）,感染,TB,或接种,BCG,后，机体可产生对该菌特异性免疫力，维持依赖于,TB,在体内的存在,细胞免疫,迟发型超敏反应,结核菌,初次感染（,10-14d),既往感染,(1-2d),皮下注射,红肿、溃疡、坏死,红肿、浅表溃烂,淋巴结肿大,全身播散,死亡,病灶局限,无播散，无死亡,获得免疫力,郭霍现象,结核菌素试验,结核菌素试剂,旧结核菌素,（,old tuberculin,，,OT,),纯蛋白衍化物,(purified protein derivative,，,PPD,),结核菌素试验,方法,取两种,PPD 5,单位,注入两前臂,皮内,48,72,小时后观察红肿直径,结果,阴性：,5mm,阳性：,5mm,强阳性：,15mm,结核菌素试验结果、临床意义,阳性,强阳性,阴性,硬结、红肿直径,5,15mm,之间,既往感染过结核分枝杆菌,卡介苗接种成功,硬结直径超过,15mm,以上,表明可能有活动性结核，应进一步检查,注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于,5mm,原发感染的早期,严重结核病或其他传染病（麻疹）,老年人,免疫力低下病人,微生物学检查,标本取材和处理,涂片染色镜检：抗酸染色,须与非结核分枝杆菌进行鉴别,加热法：非结核分枝杆菌加热,2,分钟即失去抗酸性，而结核分支杆菌则不然,结核菌素皮肤试验：检测潜伏结核感染的唯一的方法,细菌学基因诊断：,PCR,动物试验,结核分枝杆菌痰标本抗酸染色,结核分枝杆菌尿标本抗酸染色,荧光金胺染色,结核分枝杆菌,结核病快速诊断方法,全自动核酸扩增试验（,NAAT,）被世界卫生组织认可,约,100,分钟内可为多名病人做出准确诊断,特异性防治,卡介苗预防,接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童,免疫时间：,3,5,年,药物治疗,五项原则,早期、联合、规则、足量、全程,第二节 麻风分枝杆菌,Mycobacterium leprae,麻风分枝杆菌（,M.leprae,）,麻风病的病原菌,慢性传染病,主要侵及皮肤、粘膜和神经,引起关节的畸形性病变,世界各地均有报道,主要分布在亚、非洲,拉丁美洲,生物学形状,形态与染色,细长略弯曲,无芽胞，无荚膜，无鞭毛,抗酸染色阳性,典型的胞内寄生菌,麻风细胞,抵抗力,抗干燥：可存活,7,天,低温环境生存良好,紫外线及加热敏感,培养特性,不能在人工培养基中生长,小鼠足垫：传代,动物模型：犰狳（,armadillo),致病性,易感人群：人,传播途径：密切接触和呼吸道传播,潜伏期：平均,2-5,年,发病慢、病程长,麻风分为,3,种类型,瘤型麻风,结核样型,界线类、未定类,瘤型麻风,传染性强,病情严重,侵犯部位,皮肤和粘膜,神经,眼睛及内脏,镜检病变部位,麻风细胞,肉芽肿,结核样型,传染性小,侵犯部位,皮肤,外周神经,很少累及内脏,Mycobacterium leprae,结核样型麻风皮肤损害,界线类麻风引起的手变形,微生物学诊断,显微镜检查，抗酸染色,PCR,：尚在研究阶段,麻风细胞抗酸染色,麻风分枝杆菌组织切片（,Triff,染色）,防治原则,特异的预防,尚无有效的菌苗,早期发现、早治疗,目前多采用二三种药联合治疗,氨苯砜（,dapsone,，,DDS,）,Lepromatous Leprosy Pre-and Post-Treatment,非结核分枝杆菌,除人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌菌群,海分支杆菌,(,M.marinum,),耻垢杆菌,(,M.smegmatis),多存在于自然界，是条件致病菌,与结核分支杆菌鉴别,小结,生物学性状,形态大小、培养、染色特点及抵抗力,致病性,致病物质及引起的疾病,郭霍现象、结核菌素实验及判定标准,微生物学检查,抗酸染色及快速检测方法（核酸检测）,治疗与预防：,BCG,问题,简述结核分枝杆菌的主要生物学特性,简述结核菌素试验原理、结果判断及意义,简述结核病的预防及抗结核药物的治疗原则,何为卡介苗？简述卡介苗在实际工作中的应用及对其效果的评价,简述麻风分枝杆菌的生物学特性及致病特点,参考文献,普通高等教育,“,十一五,”,国家规划教材医学微生物学,(,第二版,),谷鸿喜主编，北京大学医学出版社,2009,年,7,月,普通高等教育,“,十一五,”,国家规划教材医学微生物学(第六版,),李凡主编，高等教育出版社,2011,年,5,月,WHO,：,www.who.int/en/US CDC:www.cdc.gov,NIH:www.nih.gov,China CDC:,China Ministry of Health:,维基百科：,www.wikipedia.org,第,十九章 梭菌属,第二篇 致病性细菌,第十九章 梭菌属,Clostridium,医学微生物学教研室,哈尔滨医科大学,主要内容,破伤风梭菌,芽,胞,及抵抗力,破伤风痉挛毒素 致病机制,所致疾病,特异性防治,产气荚膜梭菌,形态及培养特点 致病物质,所致疾病,微生物检查法,肉毒梭菌,形态特点,肉毒毒素,致病机制 肉毒中毒 毒素检测,艰难梭菌,毒素及致病性,梭菌属,（Clostridium）,一群专性厌氧、革兰阳性的粗大杆菌,形成,芽胞,，细菌膨胀呈梭形,产生外毒素,广泛分布于自然界,破伤风梭菌破伤风,产气荚膜梭菌气性坏疽,肉毒梭菌肉毒中毒,艰难梭菌假膜性结肠炎、抗生素相关腹泻,Drawing of a Soldier dying of Tetanus,第一节 破伤风梭菌,(C.tetani),生物学性状,形态与染色,G,+,1,mx5,m，粗大杆菌,芽胞位于顶端，菌体呈鼓槌状,芽胞抵抗力强,专性厌氧,周身鞭毛,破伤风梭菌,致病性,感染途径,创伤、不洁接生,疾病,引起破伤风、新生儿破伤风,感染条件,厌氧微环境,伤口深而窄,混有泥土、异物,局部组织缺血或同时伴有需氧菌混合感染,致病性,致病物质,破伤风痉挛毒素（tetanospasmin）,强毒性蛋白质,对人的致死量是1,g,轻链具有毒性作用,重链能与神经细胞表面受体神经节苷脂结合,0.3%甲醛作用4周后脱毒成为类毒素,破伤风痉挛毒素对脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲和力,局部感染,毒素,脊髓前角神经细胞,与神经节苷脂结合,封闭抑制性突触,阻止抑制突触,释放介质(甘),兴奋性增高,全身肌肉痉挛,血、淋巴,外周神经间隙,阻断上下神经元间正常抑制性神经冲动传递,致病机制,破伤风痉挛毒素作用,嚼肌痉挛，牙关紧闭和吞咽困难。,躯干及四肢肌肉强直，,角弓反张体征。,膈肌痉挛、呼吸困难窒息而死。,免疫性,破伤风免疫是典型的抗毒素免疫,微量毒素即发病，且与神经迅速结合，不能引起有效免疫应答,有效地获得抗毒素的途径是：,主动免疫：注射类毒素,被动免疫：注入大剂量抗毒素,微生物学检查法,临床诊断主要结合创伤史和特有体征,微生物学检查对早期诊断意义不大,必要时可取伤口渗出物涂片染色镜检及厌氧菌培养，并以培养物滤液做动物试验，以确定有无毒素产生,防治原则,人工主动免疫,制剂：精制破伤风类毒素,对象：婴幼儿、部队战士、建筑工人及其他易受伤人群,方法：基础免疫1年后加强免疫,对36个月儿童可采用白百破（DPT）三联疫苗,人工被动免疫,制剂：注射破伤风抗毒素（TAT）,用途：,紧急预防 1500-3000u,特异治疗 早期、大量注射破伤风抗毒素,注意事项：注射前应做皮肤过敏试验，脱敏疗法,抗生素的使用,大量青霉素或甲硝唑,第二节 产气荚膜梭菌,革兰阳性大杆菌,卵圆形芽胞,荚膜,无鞭毛,厌氧培养：繁殖极快,分解乳糖产气多,凝固酪蛋白,A-E 5型 A型常见,汹涌发酵实验,所致疾病,多种毒素和酶：,-毒素,气性坏疽,（gas gangrene）,局部组织坏死、水肿、气肿、,肿胀剧痛，触摸有捻发感,特殊的臭味,全身中毒,食物中毒：A型产肠毒素,微生物学检查法,直接涂片镜检,分离培养与动物实验,血平板或疱肉培养基,厌氧培养,涂片镜检,生化鉴定,取细菌培养液给小鼠或家兔静脉注射,防治原则,及时处理伤口,扩创、清创、手术器械灭菌,早期可用多价抗毒素血清,抗生素使用,第三节 肉毒梭菌,（C.botulinum）,革兰阳性粗大杆菌,周鞭毛,无荚膜,椭圆形芽胞,专性厌氧,透明溶血,致病物质,肉毒毒素,对人致死量为0.1g,嗜神经性,所致疾病,食物肉毒中毒（豆制品、牛羊肉）神经麻痹,婴儿肉毒中毒（蜂蜜）,创伤肉毒中毒（伤口）,致病性,微生物学检查法,检出毒素,动物实验：1组注上清发病；2组注煮沸上清不发病；3组注上清和抗毒素不发病。,防治原则,加强食品管理和监督，定期抽样检查,食品进食前加热煮沸即可破坏毒素,治疗应尽早注射A、B、E三型多价抗血清,第四节 艰难梭菌,（C.difficile）,革兰阳性粗大杆菌,芽胞呈卵圆形位于菌体近极端,专性厌氧,营养要求较高,可产生4种毒素 A为肠毒素,人类肠道中的,正常菌群,抗生素相关性腹泻和假膜性结肠炎,小 结,重要厌氧性细菌的种类及主要特点,破伤风梭菌,致病条件,特异性防治原则,产气荚膜梭菌、肉毒梭菌,致病物质,所致疾病,本章图片均来自网络,问 题,简述破伤风梭菌的致病条件。,简述破伤风梭菌的防治原则。,