第三章显微鉴定的基本操作技能.ppt

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,Page,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,Page,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,Page,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,*,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,第三章,显微鉴定,的基本操作,利用显微技术对药材进行显微分析，以确定其品种和质量的一种鉴定方法。,包括：,组织鉴定,粉末鉴定,第一节 显微标本片的制作,一、组织透化剂及应用,（一）定义,（二）作用,（三）常见的透化剂,二、组织封藏剂及应用,三、显微标本片的制法,四、粉末标本片,五、表面标本片,六、切片制片法,七、解离组织标本片,第二节 显微测量法,一、目镜测微尺,二、载物台测微尺,三、两尺的关系及应用,四、目微尺的标定,五、测量方法,一、目镜测微尺,放在目镜筒内的一种标尺，为一个直径,1820mm,的圆形玻璃片，中央有相互垂直的两条线，其上刻有精确的刻度，常为,50,格或,100,格，如图（,a,）,二、载物台测微尺,在特制的载玻片中央粘贴一刻有精细尺度的圆形玻片，通常将长,1mm,（或,2mm,）精确等分成,10,（或,20,）大格，,100,（或,200,）小格。,每小格长为,0.01mm,即,10m,，用以标定目镜测微尺,，如图（,b,）,三、两尺的关系及应用,台微尺是,标定目微尺,的，不能直接用来测量显微镜下物体。其,每小格,10m,，是定值。目微尺是测量尺。每一格的长度是变值，是随目镜和物镜的倍数变化而改变的，只有在放大倍数固定之后才能比量出目微尺每一格的相当长度因此，必须借助于台微尺才能比量出目微尺每格的相当长度。标定好的目微尺才是在标定的倍数下测量物体的尺子。,四、目微尺的标定,用以确定使用同一显微镜及特定倍数的物镜目镜和镜筒长度时，目微尺上每一格所代表的长度。,1.,将台微尺放置在载物台上、将目微尺（正面向上）放入目镜镜筒内,2.,低倍物镜下，将台微尺刻度移至视野中央,3.,旋转目镜，使两尺平行。,4.,移动台微尺，使目微尺零端与台微尺的某刻度线相重合,5.,再找两尺的第二条重合刻度线，数二条重合线间两尺的小格数，记录。如图（,c,）,6.,计算出目微尺每一格在该物镜条件下相当的长度（,m,）。,7.,计算公式：,标定值,=,两重合线间台微尺小格数,X10m/,两重合线间目微尺小格数,8.,高倍物镜下标定（进入高倍物镜只调细调）,当测定时要用不同的放大倍数时，应分别标定。,五、测量方法,1.,将需测量的目的物显微制片置显微镜载物台上,2.,旋转目镜，使目微尺与测量目的物平行；数小格数，记录。,3.,计算,实际长度（,m,）,=,测得小格数,X,标定值,通常是在高倍镜下测量，但欲测量较长的目的物，如纤维、导管、非腺毛等的长度时，需在低倍镜下测量。记录最大值与最小值（,m,），允许有少量数值略高或略低于规定。,例：,目镜为,10*,，物镜为,40*,时，测得淀粉粒直径占目微尺,9,小格，则该淀粉粒直径为,3.8m*9=34.2m,第三节 显微绘图法,一、平描,二、纤维描绘器描绘,1,、木栓层,2,、石细胞,3,、皮层,4,、中柱鞘纤维,5,、韧皮部,6,、形成层,7,、木质部,8,、射线,9,髓部,10,、髓部石细胞,味连,雅连,黄连（味连）粉末图,黄柏（关黄柏）粉末图,扫描电镜图,1.,花粉粒,2.,草酸钙簇晶,3.,种脐,4.,气孔,5.,花丝非腺毛,6.,导管,第四节 常用显微化学分析,一、细胞壁性质的鉴别,二、细胞内含物性质的鉴别,人参显微,图,1-4-4,八珍丸,1.,党参,(a.,乳汁管,b.,木栓石细胞,)2.,白术,(,草酸钙针晶,)3.,茯苓,(a.,多糖团块,b.,菌丝,)4.,甘草（,a.,木栓细胞,b.,晶鞘纤维）,5.,当归（纺锤形韧皮薄壁细胞，示斜向交错网状纹理）,6.,白芍（草酸钙簇晶）,7.,川芎（草酸钙圆簇状结晶）,8.,熟地（薄壁细胞，示核状物典型的植物细胞的构造图,1.细胞壁,2.叶绿体,3.晶体,4.细胞质,5.液泡,6.线粒体,7.纹孔,8.细胞核,9.核仁,10.核质,11.细胞间隙,细胞核,质体,：,叶绿体、有色体、白色体,线粒体,高尔基体,核糖体,溶酶体,贮藏的营养物质：,淀粉、蛋白质,、脂肪和脂肪油,液泡：细胞液及其内含物,细胞器,细胞质,后含物,生理活性物质,：,酶、维生素、植物激素、杀 菌剂等,原生质体,细胞后含物和生理活性物质,细胞壁,典型的植物细胞,一、,细胞壁,性质,的,鉴别,1.木质化细胞壁,间苯三酚+浓盐酸红色或紫红色。,例：导管、木纤维、石细胞。,甘草的导管和纤维,肉桂的纤维和石细胞,2.木栓化或,角质化,苏丹试液桔红色。,例：蓖麻的种子、甘蔗的茎皮。,女贞叶表皮角质化,3.,粘液质化,：,钌红试剂红色；玫红酸钠醇试剂玫瑰红色。例：车前子、亚麻子的表皮细胞中。,4,.,矿质化,硅质能溶于氟化氢，但不溶于醋酸或浓硫酸（区别于碳酸钙和草酸钙）。,例：禾本科植物的茎和叶，木贼茎和硅藻的细胞壁内含有大量硅质。,二、细胞内含物性质的鉴别,草酸钙结晶体、碳酸钙钟乳体、淀粉粒、菊糖、油脂及类脂化合物、糊粉粒、粘液,皆是一些显微镜下常见的一些有形而有鉴别意义的植物细胞内含物。,淀粉粒的形状、大小、脐点与层纹是否显著，以及彼此间的复合状况，皆随种属而有所不同。常见的有,单粒淀粉、半复粒淀粉、复粒淀粉,。,1.,淀粉粒,鉴 别,：含有直链淀粉的淀粉粒遇稀碘液显蓝紫色，,支链淀粉则显紫红色。,图淀粉粒,1，2，3为山药的淀粉粒，三角状卵圆形或矩圆形，脐点短缝状和人字形。4，5为绞股蓝的淀粉粒，4单粒不规则椭圆形，5为复粒。,2.,菊糖,可把观察材料放在乙醇中浸渍数天，使之结晶析出，然后以甘油装片进行显微观察。这样，就很易看到,球状,、,半球状或扇状,或由,数个辐射瓣,组成的菊糖结晶。,3.脂肪油、挥发油、树脂,加,苏丹溶液,或紫草试液，均显橘红色、红色或紫红色。,在大多数情况下，多呈细小结晶或无定形粒状，并密集充斥于细胞中（如：玉蜀黍种子中的糊粉粒）。由于,蛋白质遇碘呈黄色,，如加入,碘甘油,溶液不但糊粉粒各部更加清晰，同时可进一步确证糊粉粒为蛋白质组成。,糊粉粒和淀粉粒常在同一细胞中互相混杂,。,4.,糊粉粒,.豌豆的子叶细胞 1.细胞壁 2.糊粉粒 3.淀粉粒 4.细胞间隙,.小麦颍果外部的构造 1.果皮 2.种皮 3.糊粉层 4.胚乳细胞,.篦麻的胚乳细胞 1.糊粉粒 2.蛋白质晶体 3.基质 4.球晶体,粘液（,mucilage,）多含于单子叶植物及锦葵目等类植物地下部份的一些细胞中。常为一折光性较强的粘稠状液体，无特定形状。它也是植物体糖类的一种积贮形式。常与草酸钙针晶束同时并存。,5.,粘液,6.,草酸钙结晶体,常见的,草酸钙,晶体有,簇晶、砂晶、块晶、棱晶、针晶,以及由针状结晶集合而成的,针晶束,。,1.簇晶（大黄根茎）2.针晶（半夏块茎）3.方晶（甘草）,4.砂晶（颠茄根）5.棱形及菱形晶体（买麻藤）,碳酸钙钟乳体,碳酸钙沉积物多存在于植物表皮细胞或毛茸中。常呈钟乳状或其它不规则形状（如：穿心莲叶片细胞中的碳酸钙钟乳体）。,7.,碳酸钙钟乳体,无花果叶内的钟乳体,.切面观,1.表皮及皮下,2.栅栏组织,3.钟乳体和细胞腔,.表面观,第五节 常见显微试剂的配置及其用途,22种试剂,