1、
2025年大学大四（生物科学）分子生物学实验综合测试题及答案
（考试时间：90分钟 满分100分）
班级______ 姓名______
第I卷（选择题 共40分）
答题要求：每题只有一个正确答案，请将正确答案的序号填在括号内。(总共20题，每题2分，每题只有一个选项符合题意)
1. 在分子生物学实验中，用于提取DNA的常用试剂是（ ）
A. 乙醇 B. 氯仿 C. 苯酚 D. 异丙醇
2. 以下哪种酶在PCR反应中用于扩增DNA片段（ ）
A. 限制性内切酶 B. DNA连接酶 C. Taq DNA聚合酶 D. 逆转录酶
3. 进行
2、琼脂糖凝胶电泳时，DNA片段迁移的方向是（ ）
A. 从负极到正极 B. 从正极到负极 C. 随机迁移 D. 不迁移
4. 用于检测蛋白质表达水平的常用技术是（ ）
A. Western blot B. Northern blot C. Southern blot D. PCR
5. 构建基因文库时，常用的载体是（ ）
A. 质粒 B. 噬菌体 C. 人工染色体 D. 以上都是
6. 在基因克隆实验中，蓝白斑筛选的原理是利用了（ ）
A. 抗生素抗性 B. β-半乳糖苷酶活性 C. 荧光蛋白表达 D. 酶切位点
7. 以下哪种技术可用于分析基因的
3、转录起始位点（ ）
A. 染色质免疫沉淀 B. 凝胶阻滞实验 C. 5’-RACE D. 酵母双杂交
8. 进行RNA干扰实验时，常用的干扰分子是（ ）
A. siRNA B. miRNA C. lncRNA D. mRNA
9. 用于蛋白质纯化的亲和层析技术，是利用了蛋白质与（ ）的特异性结合
A. 抗体 B. 配体 C. 离子交换树脂 D. 分子筛
10. 在分子生物学实验中，用于保存DNA样本的常用缓冲液是（ ）
A. TE缓冲液 B. PBS缓冲液 C. Tris-HCl缓冲液 D. 柠檬酸缓冲液
11. 以下哪种方法可用于检测DNA甲基化
4、水平（ ）
A. 亚硫酸氢盐测序 B. 实时荧光定量PCR C. 基因芯片 D. 蛋白质印迹
12. 进行基因编辑时，常用的技术是（ ）
A. CRISPR/Cas9 B. RNAi C. 基因克隆 D. 蛋白质表达
13. 用于分离mRNA的技术是（ ）
A. 亲和层析 B. 离子交换层析 C. 凝胶过滤层析 D. 寡聚dT纤维素柱层析
14. 在蛋白质印迹实验中，封闭的目的是（ ）
A. 防止抗体非特异性结合 B. 增强抗体结合能力 C. 使蛋白质变性 D. 去除杂质
15. 以下哪种技术可用于研究蛋白质与DNA的相互作用（ ）
A.
5、酵母双杂交 B. 凝胶阻滞实验 C. 基因敲除 D. RNA干扰
16. 构建表达载体时，需要考虑的元件不包括（ ）
A. 启动子 B. 终止子 C. 增强子 D. 核糖体结合位点
17. 进行细胞转染时，常用的方法不包括（ ）
A. 脂质体转染 B. 电穿孔转染 C. 显微注射 D. 离子交换
18. 用于检测基因拷贝数变化的技术是（ ）
A. 荧光定量PCR B. 基因芯片 C. 二代测序 D. 以上都是
19. 在分子生物学实验中，用于破碎细胞的常用方法是（ ）
A. 超声破碎 B. 酶解法 C. 冻融法 D. 以上都是
20. 以
6、下哪种技术可用于分析基因的单核苷酸多态性（ ）
A. 测序 B. 基因芯片 C. 质谱分析 D. 以上都是
第II卷（非选择题 共60分）
21. （10分）简述PCR反应的基本原理和反应体系组成。
22. （10分）在蛋白质表达实验中，如何提高目的蛋白的表达量？
23. （10分）请说明RNA干扰的作用机制及应用领域。
24. （15分）材料：研究人员发现某基因在肿瘤组织中表达异常升高。为了进一步研究该基因的功能，进行了以下实验。首先构建了该基因的过表达载体，通过脂质体转染将其导入肿瘤细胞系中。然后检测了转染后细胞的增殖能力、凋亡情况以及相关信号通路的变化。
问题
7、请设计实验检测转染后细胞中该基因的表达水平，并分析该基因过表达对肿瘤细胞增殖、凋亡及相关信号通路的影响。
25. （15分）材料：某实验室对一种新发现的病毒进行研究，发现其基因组为RNA。为了深入了解该病毒的复制机制，进行了一系列实验。
问题：请设计实验确定该病毒RNA的复制起始位点，并分析参与病毒RNA复制的关键蛋白及作用机制。
答案：
1. C
2. C
3. A
4. A
5. D
6. B
7. C
8. A
9. B
10. A
11. A
12. A
13. D
14. A
15. B
16. C
17. D
18. D
19. D
20. D
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