黄酮2溶剂提取法.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,三 黄酮的提取与分离,黄酮的提取与分离,提取,分离,pH,梯度萃取法,溶剂萃取法,柱色谱法,HPLC,色谱法,溶剂提取法,检识,理化检识,色谱检识,知识链接与拓展,溶剂提取法,基本原理,操作形式,影响因素,浸渍法,煎煮法,渗漉法,回流法,连续回流法,基本原理,根据中药化学成分与溶剂间“极性相似相溶”的原理，依据各类成分溶解度的差异，选择对所提成分溶解度大、对杂质溶解度小的溶剂，依据“浓度差”原理，将所提成分从药材中溶解出来的方法。,影响因素,-,溶剂、方法、粉碎度、温度、时间等,1,药材粉碎度：药粉越细、表面积越大，提取效率越高。但太细，药粉对成分,的吸附也越强。因此水提取宜用粗粉；用有机溶剂可细些,以,20,目为好。,2,提取温度：一般热提效率高，但要考虑有些成分温度高易破坏，应选择适宜,温度。,3,提取时间：一般提取时间长提出量大。但被提成分在细胞内外溶解一旦平衡，,时间长即无意义。一般热水提以,1/2hr,为宜，乙醇提,1hr,为宜。,4,提取溶剂的选择,:,遵循,“,相似者相溶,”,规律，选择对有效成分溶解度大，对无,效成分溶解度小的溶剂做为提取溶剂,;,溶剂沸点要适中、低毒安全、环保。,5,提取方法的选择,:,见后面,（一）化学成分的极性：被提取成分的极性是选,择提取溶剂最重要的依据。,1,、影响化合物极性的因素：,(1),化合物分子母核大小（碳数多少）：分子大,、碳数多，极性小；分子小、碳数少，极性大。,(2),取代基极性大小：在化合物母核相同或相近,情况下，化合物极性大小主要取决于取代基极性,大小。,常见基团极性大小顺序如下：酸酚醇胺醛酮酯醚烯烷。,举例：判断下列各组化合物极性大小。,A B C,常见中药化学成分类型的极性：,极性较大的：苷类、生物碱盐、糖类、蛋白,质、氨基酸、鞣质、小分子有机酸、亲水性色素。,极性小的：游离生物碱、苷元、挥发油、树,脂、脂肪、大分子有机酸、亲脂性色素。,溶剂的选择,1,、溶剂的分类,水,：,极性大，渗透力强，介电常数大；,亲水性溶剂,：,极性较大，介电常数较大，,常用的有甲醇、乙醇、丙酮；与水任何比,例互溶；,亲脂性溶剂,：,极性较小，介电常数小，常,用的有乙酸乙酯、氯仿、乙醚、苯、石油,醚。不溶或微溶于水。,2,、极性大小,水,(H,2,O),甲醇,(,MeOH,),乙醇,(,EtOH,),丙酮（,Me,2,CO,）,正丁醇,(,n-BuOH,),乙酸乙酯,(,EtOAc,),乙醚,(Et,2,O),氯仿,(CHCl,3,),苯（,C,6,H,6,),四氯化碳,(CCl,4,),正己烷石油醚,(Pet.et),。,亲水性溶剂,亲脂性溶剂,问题：,1,、比水重的有？,2,、不溶于水的有？,3,、不溶于水极性最大的是？4,、与水互溶的有？,5,、极性最大的有机溶剂是？,6,、极性最小的有机溶剂是？,7,、溶解范围最广的是？,8,、是混合物的有？,9,、不同浓度乙醇极性大小比较？,（,1,）水：最常用。可溶解苷类、生物碱盐、糖类、蛋白质、氨基酸、鞣质、小分子有机酸、有机酸盐、亲水性色素、无机盐。其中蛋白质不溶于热水。,缺点：,用水提取易酶解苷类成分，且易霉坏变质。某些含果胶、粘液质类成分的中草药，其水提取液常常很难过滤。沸水提取时，中草药中的淀粉可被糊化，而增加过滤的困难。故含淀粉量多的中草药，不宜磨成细粉后加水煎煮。,（,2,）亲水性的有机溶剂：以乙醇最常用。乙醇,的溶解性能比较好。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外，大多能在,乙醇中溶解。,优点：应用范围广，易过滤，不霉变，易浓,缩回收。,缺点：价高、不安全，需回流设备。,如：不同浓度乙醇能最大限度溶出的成分,20,30,生物碱盐、蒽醌及其苷,40,50,强心苷、鞣质,60,70,皂苷、黄酮苷,80,95,游离生物碱、挥发油,（,3,）亲脂性的有机溶剂：这些溶剂的选择性能强，用于亲脂性成分的提取，如,游离生物碱、苷元、挥发油等。,优点：提取专属性强，易回收浓缩。,缺点：价高、易燃、有毒，穿透性差；对设,备要求高。,提取,溶剂的选择原则,：,（,1,）要对所提取成分溶解度大；对杂质溶,解度小。,（,2,）要与所提取成分不起意外的化学变化。,（,3,）要廉价、易得、安全。,溶剂提取过程,提取过程：指溶剂进入药材组织，溶解其中的化学成,分，并将其提出的过程。,通过,扩散,、,渗透,、,细胞内外的浓度差,，使细胞内的浓溶液不断向外扩散，细胞外的溶剂不断渗透进入细胞内，如此反复。,（三）常用的提取方法,浸渍法,渗漉法,煎煮法,回流提取法,连续回流提取法,1.,浸渍法：,常用溶剂：水、乙醇,仪器装置：有盖的容器,操作过程：,将药材粗粉置容器中 加入适量的溶剂 常温或加热（,4080,）浸泡（浸泡时应将容器盖严，并经常搅拌振摇），一般浸泡,35,日或按规定时间倾取上清液过滤得提取液。（药材可重复浸泡,2-3,次）。,药材粗粉,置于有盖的容器中，,加入适量溶剂（水或有机溶剂）,每次浸泡一日以上，提取,2-3,次使有效成分大部分浸出,倾取上清液，过滤,药液,提取范围：,适宜含,淀粉,、,树胶等成分,较多的药材以及,含挥发性,成分，或,遇热不稳定易分解或被破坏成分,的提取。,提取优缺点：操作简便。,缺点：提取时间长、溶剂用量大，提取效率不高，,水为溶剂易发霉、变质，必要时加适量防腐剂。,2.,渗漉法,常用溶剂：水，乙醇。,仪器装置：渗漉装置,提取范围：适宜对热不稳定且易分解的成分的提取。,提取优点：由于有较大的浓度差，提取效率较高。,缺点：溶剂用量大，操作较繁。,药材粗粉,加入适量溶剂，装入渗漉筒内,在渗漉筒上端不断添加溶剂，,在渗漉筒的上端不断添加溶剂，,使其渗过药粉，溶出可溶性成分,提取液,渗漉法,（,1,）溶剂：水、乙醇,（,2,）仪器装置及操作：渗漉装置,（,3,）适于：成分易挥发或受热不稳定药材。,不适于：,无组织结构的药材：乳香、没药、儿茶等。,（,4,）特点：,溶剂用量大，提取时间长，但提取效率较浸渍法高。,装筒时注意：,先用脱脂棉垫底部防药粉泄漏,分次装筒，层层压平，约,2/3,容积,上部覆盖滤纸或纱布加重物压住防药粉浮冲,开活塞加溶剂至流出，排除筒内空气再关活塞，加溶剂至高出药粉数,cm,操作：,药材粉碎润湿装筒排气浸渍渗漉。,工业生产渗漉器示意图：,3,.,煎煮法,常用溶剂：水,仪器装置：砂锅、铝锅等。,操作范围：,对含挥发性即遇热不稳定的成分的药材不宜用此法。,提取优缺点：,本法简便易行，提取效率比冷浸法高，但水溶性杂质多，易发霉。,步骤：,将中药饮片或粗粉置适当容器中，加水浸过药面，直火加热,23,次，每次煎煮的时间可根据药材量而定。,注意：煎煮中要不断搅拌。少量药材可用砂锅、搪瓷器具，忌用铁锅或铁器。,工业上常用多功能提取罐：,多功能提取罐生产操作注意事项：,a,、,多功能提取罐开车前应全面检查电气线路及控制系统是否正,常，为避免出渣门开启时自重而产生的冲力使活塞杆受损，,控制箱中针形阀开度必须合适，应使出渣门缓缓平稳打开。,b,、当设备带压操作或压力没有恢复常压之前严禁开启投料们,及出渣门。当关闭加料门时，必须是定位销进入沟槽内。罐,内加料加液后必须检查出渣门保险气缸是否处于锁定保险状态。,c,、使用乙醇提取时，要采用真空操作，或经冷却器后流入提取,罐内，不能采用水泵强制循环。,d,、通蒸汽进入夹套时，缓慢开启蒸汽阀门，蒸汽压力不能超过,2.0,Mpa,，安装时必须设有减压阀、安全阀、压力表。,4.,回流提取法,常用溶剂：有机溶剂。,仪器装置：回流加热装置。,提取范围：不适用于对热不稳定及易分解的,成分。,提取优缺点：提取效率比冷浸法高。但装置,较复杂。,操作过程：将药材粗粉装于园底烧瓶中 加入适量溶剂 水浴中加热回流提取,1 h,过滤（残渣重复提取两次，合并提取液）,提取液。,回流提取装置图,常用溶剂：有机溶剂。,仪器装置：连续回流提取装置,提取范围：不适于对热不稳定成分的提取。,提取优缺点：溶剂用量少，提取效率高。但,装置设备要求高。,5.,连续回流提取法,操作过程：,将药材置于铝纸袋中，放入提取器内 连接装置 水浴加热回流提取适当时间 提取液。,提取器,冷凝管,虹吸管,冷凝管,提取器,烧瓶,电热套,操作形式,方 法,常用溶剂,优 点,缺 点,浸渍法,水和醇,室温提取不易破坏成分，设备简单，适合提取含淀粉或黏液质多的药材。可配合,超声波,处理提高提取效率。,时间长次多，提取效率低。提取液易发霉,渗漉法,水和醇,室温提取不易破坏成分，设备简单，保持较,高浓度差,提取效率高。,溶剂用量较多,煎煮法,水,设备简单，提取较全面,加热提取易破坏成分，挥发性成分易损失，不适合提取含淀粉或黏液质多的药材,回流法,有机溶剂,加热提取效率较高,易破坏热敏性成分，操作较繁,连续回流法,有机溶剂,保持较,高浓度差,提取效率高，操作,简便,，溶剂,用量少,提取液受热时间长，成分易破坏,黄酮类成分提取方法,溶剂法,溶剂法,关键,溶剂的选择,选择依据,黄酮类成分的存在状态（游离、苷）及溶解性,溶剂的溶解性能,提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的选择,溶剂 提取原理 游离黄酮 黄酮苷 备 注,乙醇 溶解范围广,+,（甲醇）苷、苷元均可溶 （,9095%60%,）甲醇毒性大,沸水 多糖苷易于水,+,成本低、安全,水溶性杂质多,碱性水或 稀氢氧化钠溶出能力强,碱性乙醇 酚羟基的酸性,+,石灰水除杂质效果好,碱溶酸沉法注意：,（,1,）碱性不宜过强，尤其在加热时易破坏黄酮。,（,2,）酸沉淀时，酸性不宜过强，否则，黄酮形,成烊盐而损失。,（,3,）用,Ca(OH),2,可沉淀杂质，有利于纯化。,稀,NaOH,：,浸出能力强，杂质多，酸化后需迅速过滤除杂,石灰水：浸出能力中，能形成钙盐沉淀除去鞣质、羧基多,糖等杂质（如：芦丁的提取）,5%NaOH/EtOH,：,浸出效果好，但收率降低,浓碱：破坏母核。具邻二酚羟基加硼酸保护,课堂活动,播放录像 回流法,索氏提取法,