糖化血红蛋白-专业知识课件.ppt

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病,*,截肢,第3,位,致死原因,60%-70%,的患者,存在神经损害,糖化血红蛋白,葡萄糖G-6-P,果糖,血红蛋白,血红蛋白,糖,糖化血红蛋白和,HbA,1c,糖化血红蛋白（,GHb,）：,血红蛋白氨基酸残基与糖的氨基化合而成,的,产物,。,HbA,1c,：血红蛋白两条链N端的缬氨酸残基与葡萄糖的氨基化合而成,的,产物,。,。,HbA1c,糖,糖,血红蛋白及糖化血红蛋白的种类,糖,糖化,HbA,HbA,两条,链,两条,链,+1,6,二磷酸果糖,+6,磷酸果糖,+,丙酮酸,+,葡萄糖,HbA1a1,HbA1a2,HbA1b,HbA1c,HbA0,在,HbA1,中主要的成分是,HbA,1c,，约占,60%,糖化血红蛋白的术语应为,HbA,1c,，,可缩写为,A1C,HbA1,HbA1c,的形成过程,Amadori,缓慢的,非酶促的,不可逆的,2,糖化血红蛋白比例高低的决定因素：,血糖浓度,血糖与血红蛋白的接触时间,红细胞的存活时间,HbA,1c,形成的影响因素,HbA,1c,与糖尿病,（,Diabetes Control and Complications Trial,）,试验简介：,在美国和加拿大以,1441,名,1,型糖尿病 患者为对象（,29,家医疗机构），分为,2,组治疗，一组是传统治疗法，一组为强化胰岛素疗法，进行了,9,年的跟踪调查。,结 论：,进行严格的血糖管理，可以有效地控制糖尿病并发症的发生和发展。,DCCT,研究,（,1984-1993,）,当,HbA,1c,测定值降低,1%,：,使糖尿病相关并发症发生的风险降低,21%,，,相关死亡降低,25%,，,患者总死亡率降低,17%,；,患者心肌梗死的风险降低,18%,，,脑卒中风险降低,15%,，,眼和肾继发性疾病的风险降低,35%,。,血糖,糖化血红蛋白,采血时的血糖值,血红蛋白的寿命,120,天,2-3,个月的平均血糖值,反映血糖期间,现在,过去,HbA,1c,在糖尿病中的作用,监测,2,3,个月血糖控制的总体水平,平均血糖估计值=30,.,9HbA,1c,值-60.6,DCCT：,临床意义,：,ADA,建议,HbA,1c,控制目标是,0.5%,临床有意义的变化,指导临床医生药物的选择,不同的,HbA,1c,水平,空腹和餐后血糖对,HbA,1c,影响不同。,餐后血糖,空腹血糖,HbA,1c,糖尿病与,HbA,1c,糖尿病诊疗指南,HbA,1c,检测,HbA,1c,检测标准化进程,我国,HbA,1c,检测现状及标准化,小结,内容,ADA,、,EASD,、,IDF,专家委员会,2008,共识,糖尿病的诊断标准,2008,2010,年,ADA,糖尿病诊治指南,增加糖化血红蛋白（,HbA,1c,)6.5%,作为糖尿病的诊断标准,source,：,www.care.diabetesjournals.org,2011,年,-WHO,同意将,HbA,1c,作为糖尿病辅助诊断指标,HbA,1c,从治疗监控转型为诊断指标,中国糖尿病诊治指南,采用,WHO,（,1999,）,诊断标准,因,HbA,1c,6.5,的切点是否适合我国人群尚未在我国人群中验证，且我国,HbA,1c,检测方法的标准化程度不够，测定的仪器和质量控制尚不能符合目前糖尿病诊断标准的要求，因此目前暂不推荐应用,HbA,1c,诊断糖尿病,-,中国血糖监测临床应用指南（年版）,中国血糖监测临床应用指南,-2011,中国成人,2,型糖尿病,HbA,1c,控制目标的专家共识（,2010,年）,虽然目前,HbA,1c,尚未纳入,中国糖尿病诊疗指南,中，但,HbA,1c,在治疗中的重要性日益彰显。,糖尿病与,HbA,1c,糖尿病诊疗指南,HbA,1c,检测,HbA,1c,检测标准化进程,我国,HbA,1c,检测现状及标准化,小结,内容,HbA,1c,的检测方法,所带电荷不同,高效液相色谱法,电泳法,结构不同,免疫法,亲和层析法,酶 法,HbA,1c,的检测方法,方法学,原 理,检测物质,厂家,亲和层析法,所有糖化血红蛋白与硼酸结合而非糖化的即被洗脱,GHb,Primus(,普莱默斯）,离子交换色谱法,HbA,1c,与,HbA,所带电荷不同,HbA,1a,HbA,1b,HbA,1c,Bio-Rad(,伯乐）,Tosoh(,东曹）,Arkray(,爱科来）,酶 法,酶 法,HbA,1c,积水,科华,免疫法,免疫比浊法,HbA,1c,Roche(,罗氏,),电泳法,HbA,1C,与,HbA,所带电荷不同,HbA,1a,HbA,1b,HbA,1c,离子交换,HPLC,法,-ADA,推荐参考方法,厂家,仪器,/,试剂,最快检测速度,Bio-Rad,（伯乐）,D-10,Variant II,Variant II TURBO,20/h,17/h,37/h,Sysmex/Tosoh,（东曹）,G7,G8,47/h,55/h,Arkray,（爱科来）,ADAMS HA-8160,ADAMS HA-8180,40/h,74/h,非糖化血红蛋白（,HbA,0,),链,N-,端带正电荷,当被糖基化,(HbA1c,），正电荷减少,Val,His,Leu,Thr,Gluc,Val,His,Leu,Thr,+,HbA,1,HbA,0,离子交换,HPLC,洗脱原理,：按照电荷差异性,离子交换,HPLC,洗脱原理,：按照电荷差异性,His,Leu,Thr,Val,HbA,1B,-chain,?,Val,His,Leu,Thr,Val,His,Leu,Thr,HbA,1A1,-chain,HbA,1A2,-chain,Fru,G6,Val,His,Leu,Thr,HbA,0,-chain,Val,His,Leu,Thr,Gluc,HbA,1C,-chain,HbF,慢,快,亲和层析法,厂家,仪器,/,试剂,最快检测速度,Primus,（普莱默斯）,PDQ,PDQ plus,25/h,Ultra2,25/h,Val,His,Leu,Thr,Gluc,NH,B,OH,OH,OH,O,O,亲和层析法检测的是总糖化血红蛋白（,GHb),包括,HbA,1c,和在其他位点被糖基化的血红蛋白。,Val,His,Leu,Thr,固相,(,苯基硼酸柱,),亲和层析图谱,亲和层析法检测原理,检测总糖化血红蛋白（,GHb,）,酶法,厂家,仪器,/,试剂,积水医疗,科华,全自动生化分析仪使用,酶法检测原理（积水医疗）,蛋白酶酶切,Val,His,Leu,Thr,Pro,Glu,Glu,Lys,Ser,Glucose,第一步：,Hb,浓度测定第二步：,HbA,1c,浓度测定,果糖基肽氧化酶,（,FPOX,）,H,2,O,2,过氧化氢酶,（,POD),显色剂,显 色,需要采集血球标本再进行溶血处理,半自动操作，速度慢,全血直接检测,比色法检测,Hb,免疫竞争抑制法检测,HbA,1c,检测的高特异性和精确性，检测,IFCC,参考系统定义的真正的,HbA,1c,.,HbA,1c,-peptide,Glc,Val,His,Leu,Thr,Pro,Glu,抗体识别,免疫法,反应原理,Reaction kinetics of the twin test mode on INTEGRA and cobas c systems with Tina-quant HbA1c reagents,“双胞试验”，同一比色杯同时检测,Hb,和,HbA,1c,，,计算或转换为,NGSP,或,IFCC,数值,提高精密度,优化通量,免疫法原理,检测技术,电泳法,原理,各种蛋白质都有其等电点，蛋白质在一定条件下带有不同电荷，在电场中泳动不同,优点,：干扰少,不足,：,1.,需成批进行，无法进行实时检测，速度比较慢,2.,自动化程度低，急诊插入、自动维护等功能比较欠缺。,3,.,商品化产品少，用于科研。,Hb,A,0,Hb,A,1,c,Hb,A,1a,Hb,A,1,b,+,-,影响,HbA,1c,测定结果的因素,38,HbA,1c,的测定结果取决于血糖水平,Tahara Y et al.Diabetes Care,1993,16(9):1313-1314.,Fitzgibbons,et al.J Clin Invest,1976,41:820-824.,39,数学模型预测和体内研究证实：近期血糖对糖化血红蛋白值的影响最大,50%,75%,326,6311,时间（天）,HbA,1c,变化比例（,%,）,等共,10,个符号代表,10,个患者,糖化血红蛋白水平反映的是在检测前,120,天内的平均血糖水平，,HbA,1c,的测定结果取决于血糖水平,HbA,1c,与空腹血糖及餐后血糖有很好线性相关,Ito C,et al.Diabetes Research and Clinical Practice,2000,50:225-230.,40,OGTT,研究中,HbA,1c,与,FPG,的相关性,（,60,岁以下年龄组）,OGTT,研究中,HbA,1c,与,2h-PG,的相关性,（,60,岁以下年龄组）,HbA,1c,随年龄而变化,目前,HbA,1c,未因年龄差异制定不同的控制目标,Pani LN,，,et al.Diabetes Care,，,2008,，,31,：,1991-1996.,41,：所有个体,：女性,：男性,年龄（岁）,年龄每增加,1,岁，,HbA,1c,将增加,0.012%,FOS,非糖尿病人群,P0.0001,年龄（岁）,NHANES,非糖尿病人群,年龄每增加,1,岁，,HbA,1c,将增加,0.010%,P0.0001,年龄（岁）,FOS,中,NGT,人群,P 2.15;,女性,2.07),；对照组：,Quintile 1,（低,HbA,1c,）,社会经济状况和心理状态,自我控制能力低、合作能力差、社会支持少的人,HbA,1c,水平较高,Daniel M,，,et al.Prev Med,，,1999,，,29,（,5,）：,405-413.,Feldman PJ,，,Steptoe A.Health Psychol,，,2003,，,22,（,4,）：,398-405.,46,男性,女性,高层,中层,基层,HbA,1c,（,%,）,Pamela,等研究：纳入,234,名英国公务员，研究社会经济地位和社会心理因素对,HbA,1c,的影响,职业级别,土著,非土著,非糖尿病,土著,非土著,土著,非土著,糖耐量受损,糖尿病,Daniel,等多元分层分析：研究社会变化、较低控制、生存条件等心理压力指标对,HbA,1c,的影,响,HbA,1c,水平存在种族差异,Herman WH,，,et al.Diabetes Care,，,2007,，,30,：,2756-2758.,Saaddine JB,，,et al.Diabetes Care,，,2002,，,25,（,8,）：,1326-1330.,47,Herman,等对,DPP,研究数据进行分析：,5,个不同种族,/,民族的,3819,例受试者，其他所有种族,/,民族的,HbA,1c,值都较白人高,P,0.001,美国第三次全国健康和营养检查调查,(NHANES III),：,HbA,1c,在美国不同种族,524,岁儿童和青少年中的分布，非西班牙黑人,HbA,1c,水平更高,HbA,1c,的种族差异原因尚不明确，制定管理目标时需要考虑此因素,特殊的糖尿病类型,刘志文等,中华临床医师杂志,(,电子版,),2011,5(5):1536-7.,中华医学会糖尿病学分会,.,中国,1,型糖尿病诊治指南,.,人民卫生出版社,.2012.,48,有一些临床少见的情况，如进展迅速的,1,型糖尿病，这时,HbA,1c,就可能没法“赶上”急性血糖变化的速度，检测结果偏低，因而不能反应真实的平均血糖水平,中国病例报告：暴发性,1,型糖尿病一例,空腹,血糖,餐后,血糖,随机血糖,随机血糖（,mmmol/L,）,HbA1c,（,%,）,其他疾病状态对,HbA,1c,的影响,Lahousen T,et al.World J Gastroenterol,2004,10(15):2284-2286.Schnedl WJ,et al.Clin Lab,2007,53(3-4):179-181.Mohan Kumar KM,et al.Clin Chim Acta,2004,342(1-2):187-192.Inaba M,et al.J Am Soc Nephrol,2007,18(3):896-903.Abe M,Matsumoto K.Nat Clin Pract Nephrol,2008,4(9):482-483.Diop ME,et al.AIDS Res Hum Retroviruses,2006,22(12):1242-1247.,49,很多其他疾病及为治疗疾病所使用的药物都会对,HbA,1c,水平造成影响,甲亢,脂质过氧化,影响,HbA,1c,检测结果,贫血和注射促红素后,幼稚红细胞比例增加,降低,HbA,1c,检测结果,HIV,感染,抗逆转录病毒药物所导致的亚临床溶血,降低,HbA,1c,检测结果,酗酒和肝炎,干扰红细胞生成及降低红细胞寿命,降低,HbA,1c,检测结果,抗病毒药物病毒唑联合干扰素治疗,溶血性贫血,影响,HbA,1c,检测结果,常见的肝脏疾病对,HbA,1c,检测结果的影响,Lahousen T,et al.World J Gastroenterol,2004,10(15):2284-2286.,50,35,名入组患者无糖耐量受损或糖尿病,至少使用一种,HbA,1c,检测方法时：,40%,（,6/15,）,CC,患者的,HbA,1c,水平低于非糖尿病参考值范围，果糖胺浓度在参考值范围内（,n=10,）或升高（,n=5,）,20%,（,2/10,）,LF,患者的,HbA,1c,水平低于非糖尿病参考值范围，全部,10,名患者的果胺糖浓度均低于非糖尿病范围,50%,（,5/10,）,IR,患者的,HbA,1c,水平低于非糖尿病者的参考值范围，,1,名患者的果胺糖浓度在糖尿病范围,注：,CC,：代偿期肝硬化，,n=15,；,LF,：慢性肝炎（肝纤维化），,n=10,IR,：干扰素和利巴韦林治疗慢性肝炎，,n=10,果胺糖浓度,(,mol/L),糖尿病与,HbA,1c,糖尿病诊疗指南,HbA,1c,检测,HbA,1c,检测标准化进程,我国,HbA,1c,检测现状及标准化,小结,内容,HbA,1c,检测标准化进程,1985,年,DCCT,（糖尿病控制和并发症研究试验）,目的：评估了严格控制血糖对预防糖尿病人的慢性并发症的重要意义。,DCCT,参考系统,:,HPLC,方法,1996,年 美国建立,NGSP(,国家糖化血红蛋白标准化计划）,目的：对,HbA1c,检测结果标准化，以使临床实验室的检测结果和,DCCT,的结果有可比性。,采用离子交换,HPLC,为参考方法,1995,年,IFCC,（国际临床化学学会）,HbA1c,标准化工作组,目的：确定,HbA1c,检测的国际标准化,2010,年,ADA/EASD/IDF/IFCC,国际共识,确认,IFCC,参考系统为全球,HbA1c,标准化唯一系统,国际标准化主要组织,IFCC,欧州,NGSP,美,国,JDS,日本,JDS和IFCC，NGSP协调，已经搞清楚了和其的互换关系式。,IFCC,値,=1.068 JDS,値,1.741%,NGSP,値,=0.999 JDS,値,0.290%,NGSP,值,=0.,0,9,15,IFCC,值+2.15%,不同国家,HPLC,方法检测值不同,瑞典,美国,NGSP&IFCC,NGSP,参考方法非特异性,以,DCCT,中,BioRex 70 HPLC,为参考方法,优点：精密度好，结果长期稳定，,CV3%,缺点：非特异，方法间的差异大,（如：,DCCT/NGSP,中,Bio-Rex 70 HPLC,和瑞典,Mono-S HPLC,两种方法在判断限水平的差异达,20%,）,确定参考系统,IFCC,定义的,HbA,1c,：血红蛋白,链,N-,端缬氨酸被不可逆地糖化。,HbA1c-,多肽,Glc,Val,His,Leu,Thr,Pro,Glu,Glu,Lys,Ser,Glu-C,美国标准化,国际标准化,国际,HbA,1c,标准化,IFCC,（,国际临床化学学会）参考系统建立特异性检测方法,HbA,1c,缺乏统一公认的标准物质和参考方法。,三个标准化组织的,HPLC,检测方法为非特异性，结果各不相同。,制备高度纯化的一级标准物质,明确定义,HbA,1c,建立国际参考实验室网络,建立,特异性,检测,HbA,1c,的方法,IFCC,建立目标,国际标准化,2009,年时，,HbA,1c,已被标准化，时机已成熟：,99%,的美国和欧洲的,HbA,1c,检测已被,NGSP,以,DCCT,标准标准化,方法学已广泛被接受，且妨碍因素几乎均被考虑或最小化,所有,HbA,1c,检测方法均必须溯源到,IFCC,的参考方法，同时必须得到,NGS,P,的认证,NGSP&IFCC,溯源性证书,IFCC,的参考方法分为三步：,IFCC,参考方法流程（特异性检测）,IFCC,参考方法专利,IFCC,参考方法专利号：,EP 693 599,ADA/EASD/IDF/IFCC,2010,国际共识,确认,IFCC,参考系统为全球标准化唯一系统,溯源到,IFCC,参考系统。,糖尿病与,HbA,1c,糖尿病诊疗指南,HbA,1c,检测,HbA,1c,检测标准化进程,我国,HbA,1c,检测现状及标准化,小结,内容,2008 HbA,1c,室间质评,sample,methods,sample1,sample2,sample3,sample4,sample5,median,%CV,median,%CV,median,%CV,median,%CV,median,%CV,Enzyme Immunassay,5.01,12.57,8.74,20.64,5.22,16.33,7.65,1.70,5.77,5.99,Immunoturbidimetry,5.50,14.60,9.30,13.90,5.71,13.52,8.50,15.29,6.46,13.82,Affinity chromatography,5.50,4.68,9.40,4.73,5.90,10.71,8.40,8.38,6.60,10.93,HPLC,5.60,3.72,9.90,3.55,5.60,4.77,8.35,5.11,6.30,4.98,Ion chromatography,5.60,3.39,9.75,8.69,5.80,41.54,8.20,12.65,6.55,36.08,Others,5.60,16.38,7.80,21.91,5.9027.33,8.30,15.54,6.40,19.78,Total,5.60,12.84,9.60,12.71,5.70,27.57,8.40,12.00,6.40,17.23,2011,年,HbA,1c,检测仪器现况调查,，,Upper boundaries,Low boundaries,UPPER and low boundaries of HbA1c assays in 569,hospitals 2010,H,A1c,的报告参考范围,2011,年,HbA,1c,检测仪器现况调查,67,SFDA,行业标准,糖化血红蛋白分析仪,-,针对厂家在中国上市,HbA1c,结果报告：,IFCC(mmol/mol),及衍生的,NGSP(%),卫生部糖化血红蛋白（,HbA1c,）实验室检测指南,-,针对临床实验室,HbA1c,结果报告：,NGSP(%),IFCC(mmol/mol),中国相继出台,HbA,1c,行业标准,67,68,方法精密度要求：,室内,CV3%,；,血液采集：合适的采血管；,样本保存：按照说明书要求，长期保存需在,-70,；,室内质控：,每批分析都应同时测定至少,2,个不同水平（高、低值）,的质控物；质控品分装冷冻保存，,-70,可保存一年以上。,参加室间质评,结果报告：,NGSP(%),IFCC(mmol/mol),参考区间：验证,实验室应知晓本室所用色谱柱可检测样品的数量，达到检测数量限应及时更换，不可超量使用。,注：不同方法的色谱柱可检测样品数量是不同的。,相关质量要求,68,我国向,HbA,1c,标准化迈步,参加卫生部临检中心室间质量评价的实验室逐年增加,实验室间CV值逐年减小,2010,年,3,月中国,HbA,1c,教育计划在京启动,2012年，上海市临床检验中心建立 IFCC检测的一级参考方法,卫生部临检中心建立了检测参考方法，研制出了国家一级标准物质。,历年卫生部,EQA,结果一览,07 January 2026,中国有超过,20918,家医院,小结,HbA,1c,检测除用于疗效评估外，逐渐被纳入诊断指南,HbA,1c,检测方法众多，均有其优劣势，但国际标准化是大势所趋,我国日益重视,HbA,1c,检测标准化。,谢 谢！,一路同行，携手共攀高峰,