1、
2025年大四（生物制药）生物药物制备阶段检测题
（考试时间：90分钟 满分100分）
班级______ 姓名______
第I卷（选择题 共30分）
答题要求：每题只有一个正确答案，请将正确答案的序号填在括号内。(总共10题，每题3分，每题只有一个选项符合题意)
w1. 以下哪种生物药物制备技术常用于生产蛋白质类药物？（ ）
A. 基因工程技术
B. 细胞融合技术
C. 发酵工程技术
D. 酶工程技术
w2. 在生物药物分离纯化过程中，最先使用的技术通常是（ ）。
A. 离子交换色谱
B. 超滤
C. 离心
D. 亲和色谱
w3.
2、 用于生物药物基因克隆的常用载体是（ ）。
A. 质粒
B. 噬菌体
C. 病毒
D. 以上都是
w4. 下列哪种细胞系常用于生物药物的生产？（ ）
A. 原代细胞
B. 二倍体细胞系
C. 转化细胞系
D. 杂交瘤细胞系
w5. 生物药物发酵过程中，对溶氧要求较高的是（ ）。
A. 厌氧发酵
B. 好氧发酵
C. 兼性发酵
D. 微氧发酵
w6. 蛋白质类生物药物的活性易受以下哪种因素影响？（ ）
A. 温度
B. pH值
C. 金属离子
D. 以上都是
w7. 生物药物制备中，常用的蛋白质复性方法不包括（ ）。
A. 稀释复性
B. 透
3、析复性
C. 凝胶过滤复性
D. 高温复性
w8. 以下哪种生物药物的制备不需要经过基因表达阶段？（ ）
A. 重组胰岛素
B. 单克隆抗体
C. 肝素
D. 生长激素
w9. 在生物药物提取过程中，能破坏细胞结构的方法是（ ）。
A. 盐析
B. 超声破碎
C. 透析
D. 超滤
w10. 生物药物质量控制中，对其纯度的检测方法不包括（ ）。
A. 高效液相色谱
B. 质谱
C. 核磁共振
D. 细胞毒性检测
第II卷（非选择题 共70分）
w11. （10分）简述基因工程技术制备生物药物的基本流程。
w12. （15分）比较离子交换色谱和
4、亲和色谱在生物药物分离纯化中的原理及应用特点。
w13. （15分）材料：在生物药物发酵生产过程中，发现发酵液的pH值逐渐下降，溶氧水平也有所降低。请分析可能导致这些现象的原因，并提出相应的解决措施。
w14. （15分）材料：某生物制药公司计划生产一种新型的重组蛋白药物。请阐述从基因克隆到药物成品制备过程中，可能涉及到的关键技术及操作要点。
w15. （15分）材料：现有一批生物药物产品，经检测发现其活性低于规定标准。请从生物药物制备的各个环节分析可能导致活性降低的原因，并提出改进建议。
答案：
w1. A
w2. C
w3. D
w4. D
w5. B
w6. D
5、
w7. D
w8. C
w9. B
w10. D
w11. 基因工程技术制备生物药物基本流程：首先获取目的基因，可通过PCR扩增、从基因组文库或cDNA文库中筛选等方法。然后将目的基因与载体连接构建重组DNA分子。接着将重组DNA导入宿主细胞，如大肠杆菌、酵母细胞等。筛选出阳性克隆并进行培养，使目的基因表达。最后对表达产物进行分离纯化和鉴定等后续处理。
w12. 离子交换色谱原理是以离子交换树脂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小不同而进行分离。应用特点是可分离带电生物分子，操作简便，成本相对较低，但特异性不强。亲和色谱原理是利用生物分子间
6、特异性亲和力，如抗原与抗体、酶与底物等。应用特点是特异性高，能一步纯化得到高纯度产物，但成本较高，配基制备较复杂。
w13. pH值下降可能原因：微生物代谢产生酸性物质；培养基中某些成分被利用产生酸性中间产物等。解决措施：添加缓冲剂；适当补加碱液调节pH。溶氧降低原因：微生物生长旺盛消耗大量氧气；搅拌速度不够；通气量不足等。解决措施：增加搅拌速度；提高通气量；优化发酵罐的通气和搅拌装置。
w14. 基因克隆：通过PCR等技术扩增目的基因，连接到合适载体导入宿主细胞筛选阳性克隆。表达载体构建：选择合适启动子、终止子等元件与目的基因构建表达载体。宿主细胞选择与培养：根据蛋白性质选择如大肠杆菌、酵母等宿主细胞，优化培养条件。蛋白表达与诱导：诱导目的基因表达，控制诱导条件。分离纯化：采用多种色谱技术如离子交换、亲和色谱等分离纯化蛋白，去除杂质。质量检测：检测蛋白活性、纯度、分子量等指标确保符合要求。
w15. 基因克隆环节：可能目的基因获取不准确或载体构建有问题影响表达，应重新准确获取目的基因，优化载体构建。表达环节：培养条件不合适、诱导剂浓度不当等导致表达量低或活性低，需优化培养和诱导条件。分离纯化环节：纯化方法选择不当或操作失误损失活性，应选择合适纯化方法并规范操作。储存环节：储存条件如温度、pH不合适，应根据药物特性选择合适储存条件。
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