1、
2025年大学大三（分子生物学）基因工程基础试题及解析
（考试时间：90分钟 满分100分）
班级______ 姓名______
第I卷（选择题 共30分）
（总共10题，每题3分，每题只有一个正确答案，请将正确答案填在题后的括号内）
w1. 基因工程中常用的工具酶不包括以下哪种？（ ）
A. 限制性核酸内切酶 B. DNA连接酶 C. 逆转录酶 D. 淀粉酶
w2. 以下关于质粒的描述，错误的是（ ）
A. 是双链环状DNA分子 B. 能自主复制 C. 只能存在于细菌中 D. 可作为基因载体
w3. 限制性核酸内切酶切割DNA后产
2、生的末端类型不包括（ ）
A. 平末端 B. 黏性末端 C. 5'突出末端 D. 3'凹陷末端
w4. 基因工程中构建重组DNA分子常用的载体是（ ）
A. 噬菌体 B. 动植物病毒 C. 质粒 D. 以上都是
w5. 以下哪种技术可用于检测基因的表达水平？（ ）
A. PCR B. Southern blotting C. Northern blotting D. Western blotting
w6. 基因工程中导入目的基因的方法不包括（ ）
A. 显微注射法 B. 氯化钙处理法 C. 电穿孔法 D. 研磨法
w7. 以下关于PCR技术的说
3、法，错误的是（ ）
A. 以DNA为模板 B. 需要引物 C. 不需要DNA聚合酶 D. 可扩增特定DNA片段
w8. 基因文库是指（ ）
A. 包含某种生物全部基因的克隆群体 B. 包含某种生物部分基因的克隆群体 C. 包含多种生物全部基因的克隆群体 D. 包含多种生物部分基因的克隆群体
w9. 以下哪种方法可用于鉴定重组DNA分子？（ ）
A. 酶切分析 B. PCR扩增 C. 核酸测序 D. 以上都是
w10. 基因工程在医药领域的应用不包括（ ）
A. 生产疫苗 B. 生产抗生素 C. 基因治疗 D. 培育新品种
第II卷（非选择题
4、 共70分）
w11. （10分）简述基因工程的基本操作流程。
w12. （15分）请说明限制性核酸内切酶的作用原理及特点。
w13. （15分）分析PCR技术的原理、反应体系及反应过程。
有这样一个材料：在基因工程实验中，科研人员想要将一个特定的目的基因导入大肠杆菌细胞中，他们采用了氯化钙处理法。首先，将大肠杆菌细胞悬浮在氯化钙溶液中，然后加入重组质粒DNA分子，经过一定时间的处理后，再进行热休克处理，使细胞吸收重组质粒。之后，将处理后的细胞接种在含有抗生素的培养基上，观察细胞的生长情况。
w14. （20分）根据上述材料，回答以下问题：
（1）氯化钙处理法的作用是什么？
（2
5、热休克处理的目的是什么？
（3）为什么要将细胞接种在含有抗生素的培养基上？
w15. （10分）阐述基因工程在农业领域的应用及可能带来的问题。
答案：
w1. D
w2. C
w3. D
w4. D
w5. C
w6. D
w7. C
w8. A
w9. D
w10. D
w11. 基因工程基本操作流程：获取目的基因，可从生物基因组中分离、人工合成或PCR扩增等；构建基因表达载体，将目的基因与载体连接；导入目的基因到受体细胞，如细菌、动植物细胞等；筛选和鉴定含有目的基因的受体细胞，可通过抗生素筛选、PCR检测、核酸测序等方法；目的基因的表达与检测，检测目的基因
6、是否转录和翻译。
w12. 限制性核酸内切酶作用原理：能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并在特定位置切割DNA。特点：具有特异性识别序列；切割产生特定末端类型，如平末端、黏性末端；可用于基因工程中切割目的基因和载体。
w13. PCR技术原理：以DNA为模板，利用DNA聚合酶在引物引导下合成新的DNA链。反应体系包括模板DNA、引物、dNTP、DNA聚合酶、缓冲液等。反应过程：高温变性使模板DNA双链解开；低温退火使引物与模板结合；适温延伸合成新DNA链，如此循环多次扩增特定DNA片段。
w14. （1）氯化钙处理法可使大肠杆菌细胞处于感受态，易于吸收重组质粒DNA分子。（2）热休克处理能进一步促进细胞吸收重组质粒。（3）将细胞接种在含有抗生素的培养基上，是因为重组质粒中含有抗生素抗性基因，能在该培养基上生长的细胞说明已成功导入重组质粒。
w15. 基因工程在农业领域应用：培育抗虫、抗病、抗逆等优良性状的农作物品种；提高农作物产量和品质。可能带来问题：转基因作物可能对非目标生物产生影响；可能导致基因漂移，影响生态平衡；公众对转基因食品安全性存在担忧。
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