动物细胞融合.1.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,.,*,动物细胞工程,专题二细胞工程,乌苏高二生物,.,动物细胞培养,动物细胞融合,核移植技术,动物细胞工程常用技术,胚胎移植技术,单克隆抗体技术,.,细胞贴壁过程,.,克隆步骤上,.,克隆步骤下,.,动物细胞融合与单克隆抗体,.,动物细胞能否融合呢？,细胞A,细胞B,杂种细胞,细胞A,细胞B,细胞B,细胞A,细胞B,细胞A,细胞B,杂种细胞,细胞A,细胞B,细胞A,细胞B,杂种细胞,细胞A,细胞B,.,资料,太空中的“婚礼”,2003年1月5日，“神舟”四号准备着陆。这次历时6天零18个小时的太空飞行，开展了多项在轨研究，其中有一项被媒体描述成“太空婚礼”的生物实验。不过，“婚礼”中的“新郎”和“新娘”是一些体细胞：动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，植物细胞“新人”是有液泡的黄花烟草原生质体和脱液泡的革新一号烟草原生质体。作为“新房”的是一个黑色的小盒子-电融合仪。这是科技工作者在空间微重力条件下进行的细胞融合实验。160min后，中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。,.,一、动物细胞融合,1.概念：,2.结果：,3.原理：,4.诱导方式,指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,形成单核的杂交细胞,细胞膜的流动性,物理法：离心、振动、电激,化学法：聚乙二醇（PEG),生物法：灭活的病毒,.,5.过程：,注意：,动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞,细胞A,细胞B,杂种细胞,灭活的病毒,物理法、化学法,仙台病毒,疱疹病毒,新城鸡瘟病毒,.,细胞核,病毒颗粒,细胞核,用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程,病毒颗粒黏附在细胞表面,病毒颗粒穿通细胞膜,细胞膜连接,结束的标志,.,6.意义：,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。,7.应用：,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体,.,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,细胞融合原理,细胞融合的方法,诱导方法,用途,.,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,细胞融合原理,细胞膜的流动性、,细胞膜的流动性,细胞融合的方法,诱导方法,用途,.,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,细胞融合原理,细胞膜的流动性、,细胞膜的流动性,细胞融合的方法,去除细胞壁后诱导原生质体融合,使细胞分散后诱导细胞融合,诱导方法,用途,.,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,细胞融合原理,细胞膜的流动性、,细胞膜的流动性,细胞融合的方法,去除细胞壁后诱导原生质体融合,使细胞分散后诱导细胞融合,诱导方法,物理（离心、振荡、电刺激）,化学（聚乙二醇）,物理、化学方法（同左）,灭活的病毒,用途,.,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,细胞融合原理,细胞膜的流动性、,细胞膜的流动性,细胞融合的方法,去除细胞壁后诱导原生质体融合,使细胞分散后诱导细胞融合,诱导方法,物理（离心、振荡、电刺激）,化学（聚乙二醇）,物理、化学方法（同左）,灭活的病毒,用途,获得杂种植株,制备单克隆抗体,.,1.什么是抗体？,2.抗体是由何种细胞产生的？,抗体是具有免疫作用的蛋白质。,B淋巴细胞受抗原刺激后，增殖分化为浆细胞，浆细胞可以产生抗体。,问 题,.,1）.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。,2）.每种抗体只能与特定的抗原发生结合反应。,3、抗体有哪些特点？,4、传统的抗体生产方法及缺陷是什,么？,问 题,.,常规抗体的缺陷,抗原不纯,抗体不纯,筛选单一浆细胞,特异性差、纯度低；,产量低、反应不够灵敏,浆细胞,抗体,动物体,刺激,抗原,不能增殖产生大量抗体,.,5、怎样才能获得单克隆抗体？,提示1：,仅用细胞培养技术可行吗？,提示2：,我们所学的哪种细胞是可以无 限增殖的？,提示3：,有什么方法能使B细胞产生抗体 的能力和肿瘤细胞无限增殖能 力同时具备呢？,.,5、怎样才能获得单克隆抗体？,设计方案：,一个B淋巴细胞,只分泌一种特异性抗体,小鼠骨髓瘤细胞,能无限增殖,杂交细胞,既能产生一种特异性抗体，又能无限增殖,.,二、单克隆抗体,由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的,化学性质单一、特异性强,的抗体称为单克隆抗体。,1、单克隆抗体的概念,.,杂交瘤细胞,单克隆抗体,2、单克隆抗体制备过程,筛选,继续培养,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,细胞培养,细胞融合、筛选,骨髓瘤细胞,体外培养,注射到小鼠腹腔,B淋巴细胞,注射抗原,具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能产生足够数量的单一抗体。,.,免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理,1.本过程利用了哪些原理？,2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？,这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B淋巴细胞分泌特异性抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可获得大量单克隆抗体,思考：,.,三、单克隆抗体的应用,单克隆抗体的,优点：,特异性强、灵敏度高,2、用于,运载药物：,制成“生物导弹”,治疗疾病：,主要用于癌症治疗,优点：,准确、高效、简易、快速,优点：,疗效高、毒副作用小,1、作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与,抗原特异性结合,.,小结,两个过程,动物细胞融合过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法,灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势,.,1、动物细胞工程技术的基础是：（）,A动物细胞融合,B胚胎移植,C动物细胞培养,D核移植,.,在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）,A结果是相同的,B杂种细胞的形成过程基本相同,C操作过程中酶的作用相同,D诱导融合的手段相同,.,豆丁巴巴，发现在线分享文档价值的平台 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）,淋巴细胞,小鼠骨髓瘤细胞,B淋巴细胞自身融合细胞,小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞,杂交瘤细胞,A B,C D,C,.,