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支原体及衣原体课件.ppt

1、

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,支原体及衣原体,王悦,支原体(,mycoplasma,),1.,定义,是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器、在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型微生物。该微生物于,1898,年分离出来,,1967,年被正式命名为支原体。,2.,分类,归属于柔膜体纲支原体目支原体科,下分四属。与人类相关的是支原体属(有,119,菌种),和脲原体属(有,7,个菌种)。,从人体中分离出来的有,16,个菌种,其中致病性支原体主要有肺炎支原体、人型支原体、生殖支原体、发酵支原体、穿透支原体、解脲脲原体和梨支原

2、体。,柔膜体纲,支原体目,肺炎支原体,,人型支原体,,,生殖支原体,穿透支原体,,,发酵支原体,梨支原体,解脲尿原体,支原体科,无胆甾原体科,螺原体科,支原体属,脲原体属,3.,生物学性状,3.1,形态与结构,大小一般为,0.2,0.5m,基因组为一环状双链,DNA,,分子量小,无细胞壁 可呈球形、杆形、丝状和分枝状等多种形态。,Giemsa,染色着色较好,呈淡紫色,3.,生物学性状,3.2,结构,内外两层为蛋白质及糖类,中层为脂类(胆固醇为主),凡作用于胆固醇的物质,如皂素、二性霉素,B,等均能破坏细胞膜致其死亡。细胞膜外有荚膜。,特殊的顶端结构:,粘附宿主上皮,细胞表面,与支,原体的致病有

3、关。,3.,生物学性状,3.2,培养特性,培养基中需加入,10,20%,人或动物血清以提供胆固醇和其他长链脂肪酸,。多数还需添加酵母浸液、,组织,浸液、核酸提取物和辅酶,。,最适,pH7.8,8.0,之间,低于,7.0,则死亡,但解脲脲原体最适,pH6.0,6.5,。,兼性厌氧,多数在,37,微氧环境生长良好。,固体培养基上,,37,培养,310,天可生长直径,10600m,的,“,油煎蛋,”,样菌落,低倍镜观察菌落呈圆形,中央致密隆起,外,周有颗粒包绕。,繁殖方式除了二分裂外,还有分节、出芽、断裂和分枝等,方式。,3.,生物学特性,3.,生物学性状,3.,生物学性状,3.,生物学性状,3.,

4、生物学性状,3.3,生化反应,3.4,抗原结构,支原体的抗原主要来自细胞膜外层蛋白、构成荚膜的肽聚糖和中层,脂类组成。其外层蛋白是型特异性抗原,具有免疫原性。,生长抑制试验(,GIT,)和代谢抑制试验(,MIT,)利用针对此抗原的型,特异性血清来抑制支原体在培养基上生长,可将支原体分成若干血,清型。,3.5,抵抗力,支原体无细胞壁,对理化因素抵抗力弱:,不耐干燥、不耐热,耐寒。,对化学消毒剂敏感,但对碱、醋酸铊、结晶紫有抵抗力。,对作用于细胞壁的青霉素类天然耐受,对干扰蛋白质合成和,作用于,DNA,螺旋酶阻碍,DNA,合成的抗生素敏感。,3.,生物学特性,4.1,致病物质,粘附素:粘附到尿道和

5、生殖道上皮细胞,荚膜或者微荚膜:具有抗吞噬作用,毒性,代谢产物:神经毒素、磷脂酶,C,、核酸酶、过氧化氢,和,超,氧离离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理,损伤,超抗原:免疫调节,其它,:如穿透支原体粘附侵入,CD4,T,细胞引起损伤,4.,致病性,4.,致病性,4.2,所致疾病,4.3,免疫性,体液免疫:抗膜蛋白的抗体包括IgM、IgG和SIgA,细胞免疫,:,主要是特异性CD4,Th1,细胞分泌细胞因子,4.,致病性,肺炎支原体是目前所能确定引起人类呼吸道感染性疾病的唯一支原体,主要引起人类支原体肺炎。,肺炎支原体,0.2,0.3m,,高度多形性,如球形、球杆状、棒状、分枝状和丝状;

6、初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中,一般,10,天左右长出菌落;多次传代后生长加快,菌落呈,“,油煎蛋,”,状;,能发酵葡萄糖,不能利用精氨酸与尿素,对豚鼠红细胞产生,溶血环;,对美蓝、醋酸铊、青霉素不敏感。,1.,生物学性状,2.,1,主要经飞沫传播,但大多数发生于夏末秋初,,1,15,岁人群发病率较高,婴儿发病率最高。,2.2,含特殊的顶端结构:,P1,表面蛋白(,170 kDa,)和,P30,(,32 kDa,)为主要的粘附蛋白,使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。,肺炎支原体具有超抗原作用,能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子(如,TNF-,、,IL-1,、,IL-6,)引

7、起组织损伤。,荚膜,毒性代谢产物,2.,致病性,原发性非典型性肺炎,(,primary atypical pneumonia,)(,间质性肺炎,),临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主,有时并发支气管肺炎、皮疹、心血管和神经系统症状。还可引起咽喉炎、鼻炎、中耳炎和气管炎等,3.,所致疾病,血清特异性,IgM,、,IgG,及,SIgA,和致敏的淋巴细胞;,呼吸道局部黏膜产生的,SIgA,对防止再感染有较强保护作用;,出现,IgE,介导的,I,型超敏反应,促使哮喘病急性发作,4.,免疫性,标本采集 咽拭子去患者咽部分泌物或痰标本于培养基培养,分离鉴定,12w,取菌落生化鉴定(分离阳性率低),(

8、形态、糖发酵、溶血性、红细胞吸附试验),生长抑制试验,GIT,代谢抑制试验,MIT,冷凝集试验,PCR,:从痰标本中检测支原体核酸,16S rRNA,或,P1,蛋白基因,ELISA:,抗体检测,抗原检测,4.,微生物学检查,大环内酯,类药物,喹,诺酮类药物,5.,治疗,脲原体属中只有解,脲脲原体,是致病支原体,主要引起人类生殖道感染。,解脲脲原体,形态:,0.5,0.3 m,,单个或成双排列,固体培养:,48 h,后长出直径,15,30 m,“,油煎蛋,”,状菌落。,最适,pH,为,5.5,6.5,。,生化反应:分解尿素,不分解糖类和精氨,酸,液体培养基中分解尿素产生氨,抵抗力:对,1:200

9、0,醋酸铊不敏感,抗原:,MB,抗原是其主要膜抗原,将解脲脲,原体分为,A,、,B,两大群。,14,个血清型。,1.,生物学性状,-,粘附于宿主细胞表面,引起细胞膜损伤;,-,产生毒性代谢产物如,NH3,,对宿主细胞有急性毒性作用;,-,磷脂酶损伤宿主的细胞膜。,2.,致病机制,通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜,引起,非淋菌性尿道炎,,也能引起盆腔等部位的感染。,还可通过胎盘感染胎儿,出现早产和死胎。也能引起妇女,不孕不育症,。,常与衣原体、淋球菌合并感染,可通过两性传播,是引起性传播疾病的病原体之一。,3.,所致疾病,接种液体培养基,分解尿素产碱,酚红指示剂由橘黄色变为红色;再取,0.2 ml,

10、培养物转种于固体培养基,在,5%CO2,和,90%N2,的环境中经,37,培养,24,48 h,,用低倍镜观察菌落,进一步鉴定需用特异抗血清做,GIT,与,MIT,。,PCR,4.,微生物学检查,加强宣传教育,注意性卫生,切断传播途径。,四环素类(红霉素、多西环素、阿奇霉素等)、,喹诺酮类药物治疗,但有耐药株产生。,5.,防治,衣原体,沙眼衣原体,肺炎衣原体,衣原体(,chlamydia,),1.,定义,衣原体是一类严格真核细胞内寄生,具有独特发育周期,并能通过细菌滤器的原核细胞型微生物,可引起人和家畜的衣原体病。,2.,分类,衣原体目分为衣原体科,副衣原体科,西门坎氏菌科和石德菌科,4,科,

11、衣原体科下分衣原体和嗜衣原体属。,对人类致病的是衣原体属的沙眼衣原体,嗜衣原体属的肺炎衣原体和鹦鹉热衣原体这三个菌种。,G,-,,圆形或椭圆形体,具有细胞壁,其组成与,G,-,菌相似,有独特的发育周期,,二分裂方式繁殖,独立的酶系统,但不能产生代谢能量,严格细胞内寄生,对多种抗生素敏感,有核糖体,基因组有,DNA,和,RNA,共同特征,3.1,独特的发育周期,原体(,elementary body,EB),小而致密,成熟型,高度易感性;,网状体(,reticulate body,RB),大而疏松,繁殖型,不具感染性。,3.,生物学性状,包涵体(,inclusion),:,是衣原体在细胞空泡内繁

12、殖过程中所形成的集团形态,内含无数子代原体和正在分裂的网状体。,3.,生物学性状,3.2,培养特性,专性细胞内寄生,可在鸡胚卵黄囊中以及,Hela,细胞、,HL,等细胞中 繁殖生长。,3.3,抗原结构,根据细胞壁的成分不同分为:,属特异性抗原 脂多糖,种特异性抗原 外膜蛋白,型特异性抗原 外膜蛋白可变区氨基酸序列不同,3.4,抵抗力,对热敏感,耐寒耐干燥,对甲醛、酒精等常用消毒剂敏感,紫外线可迅速灭活,多种抗生素可抑制繁殖,3.,生物学性状,4.1,致病物质,内毒素样物质,抑制细胞代谢,破坏细胞,主要外膜蛋白,与吸附、侵入宿主细胞及阻止吞噬体 和溶酶体融合有关,热休克蛋白,肉芽肿性炎症、瘢痕形

13、成,4.,致病性与免疫性,4.,致病性与免疫性,4.2,所致疾病,4.3,免疫性,细胞免疫与体液免疫,细胞免疫为主,直接涂片镜检 采用,Giemsa、,碘液或荧光抗体染色镜检,检查上皮细胞内有无包涵体。,分离培养 接种鸡胚卵黄囊、小鼠或传代细胞,核酸检测,5.,微生物学检查,沙眼衣原体,Chlamydia trachomatis,传染源:人,沙眼生物型、,LGV,性病淋巴肉芽肿生物型,、鼠生物型,沙眼生物型,汤飞凡,1955,鸡胚卵黄囊接种法,首次分离,对人不致病,沙眼,眼-眼,眼-手-眼:,沙眼生物型,A、B、Ba,和,C,血清,型,感染眼结膜上皮细胞,增殖,包涵体,局部炎症,早期流泪、有粘

14、液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生,后期结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫,以及角膜血管翳引起的角膜损害,影响视力或致盲,包涵体结膜炎(,成人、,婴儿,),由沙眼生物型,D-K,血清型引起,婴儿,产道传染,成人症状类似沙眼,病变较轻,泌尿生殖道感染,性接触,血清型与包涵体结膜炎相同,性病淋巴肉芽肿生物型,血清型,(,L,1,、L,2,、L,2a,及,L,3,),致病性,传染源:人,传播途径:性接触,侵犯淋巴组织,男性腹股沟淋巴结化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿瘘管。,女性会阴、肛门和直肠肠皮肤瘘管,会阴-肛门-直肠狭窄和梗阻,肺炎衣原体,Chlamydia pneumoniae,只有一个血清型:,TWAR,株,传染源:人,传播途径:呼吸道,所致疾病:呼吸道感染,肺炎为主.可能与冠心病和心肌梗塞有关,谢谢!,

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