家畜组织胚胎学--1绪论.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,家畜组织胚胎学,第一章 绪论,第一节 家畜组织胚胎学的研究内容和意义,组织胚胎学包括,组织学,和,胚胎学,两部分。,组织学,（,histology,）,是研究动物体微细结构及功能的科学。,动物体是由各种器官系统构成的，每个器官都包括几种不同的组织，而每一种组织又是由细胞和细胞间质构成的。,因此，组织学的研究内容包括,细胞,、,基本组织,和,器官组织,三个部分。,胚胎学,（,embryology,）,是研究动物个体胚胎发育的科学。,胚胎学的研究内容包括配子发生、受精、卵裂、原肠胚和神经胚形成、胎膜和胎盘以及器官发生等。,组织胚胎学属于动物科学和医学专业的专业基础课。只有掌握了动物的正常形态结构和胚胎发育规律，才能进一步了解动物的生理活动规律，并利用这些规律去合理地饲养、繁殖和改良动物以及防治各种疾病。,因此，学好组织学与胚胎学是学好生理学、繁殖学、饲养学、动物生产学、病理学、免疫学和临床医学等课程所必不可少的基础。,第二节 组织胚胎学研究方法及基本原理,所有的组织胚胎学研究方法均需将有机体的器官和组织经过特殊处理，再应用各种显微镜进行观察研究后得出科学的结果。,1.,组织学制片技术,一般是先把组织制成薄片，最常用的是石蜡切片，其制备方法是：,取材与固定,：把新鲜组织放到甲醛溶液等固定液中，使蛋白质等成分迅速凝固，尽可能保持其活体时的结构状态。,脱水与透明,：为使石蜡浸入组织内，把固定好的材料用乙醇逐级（,70%-100%,）脱水。用二甲苯或乙醚等石蜡溶剂使组织浸透，便于浸蜡。,一、固定组织研究法,浸蜡与包埋,：把组织放入融化（,58-60,）的石蜡中，进行浸透和包埋成蜡块，目的是使石蜡进入细胞间隙和细胞内，以增加组织的硬度，便于切片。,切片与贴片,：,将蜡块用切片机切成,5-10,m,厚的组织切片，并铺展粘到载玻片上。,染色方法,HE,染色,苏木精,伊 红,嗜碱性结构：,细胞核,粗面内质网,游离核糖体等,嗜酸性结构：,细胞质基质,溶酶体、线粒体等细胞器,胶原纤维等,染色方法,HE,染色法以外的所有染色法，通常是为了显示某些用,HE,染色法显示不出的细胞和结构。如：,苏丹法,显示脂肪,镀银法,显示神经细胞、嗜银颗粒,铁苏木素法,显示心肌闰盘,马氏三色法,显示胰岛细胞,甲苯胺蓝法,显示糖胺多糖,特殊染色,镀银染色，显示大脑皮质神经元,氯化金染色，显示运动终板,Hemalum,染色，显示心肌纤维及闰盘,2,、组织化学技术,组织化学,(histochemistry),：,通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内化学成分，通常是使其形成有色终末产物，以便在镜下观察，可进行定位和定量。,1,一般组织化学术,是利用化学试剂与组织内的某些物质进行化学反应，在局部形成能够在显微镜下观察到的沉淀物。例如，过碘酸雪夫氏反应（,periodic acid chiff,s reaction,PAS,反应,）的基本原理是通过过碘酸的氧化作用，使多糖生成醛基，后者与雪夫氏试剂中的无色碱性品红反应，在反应部位形成紫红色沉淀，从而证明细胞内含有糖原或粘多糖成分。,HIO,4,Shiff,试剂,多糖 醛,紫红色沉淀物,（氧化）（,碱性品红,）,组织化学术,PAS,反应，显示小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒,组织化学术,免疫组织化学术（,immunocytochemistry),利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方法则为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽和蛋白质。,组织化学术,免疫组织化学，显示胰岛,B,细胞,组织化学术,原位杂交术,（,in situ hybridization),为核酸（,DNA,和,RNA,）组织化学术。,用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示该核酸。,原位杂交，显示脐静脉内皮细胞的心房钠尿肽阳性,组织化学术,活体组织研究法,二、其它研究方法,自学,细胞培养术,细胞融合,组织工程术,细胞电泳,新的研究方法,放射自显影术,图像分析术,流式细胞术,光学显微镜（,light microscope LM,）,电子显微镜（,electron microscope EM,）,三、显微镜,一,光学显微镜,光镜,普通光学显微镜（,light microscope,）的分辨率为,0.2,m,，可放大,1000,倍左右，能观察组织和细胞的一般结构。,分辨率,是指能够分辨两颗粒之间的最小距离。,显微镜下常用的长度单位,在光镜下所见的组织和细胞的结构叫做一般微细结构，而在电镜下所见的结构则称之为超微结构。在光镜和电镜下进行观察时，常用的计量单位有：,1m,（微米，,micrometer,）,=1/1000mm,（毫米，,millimeter,）,1nm,（纳米，,nanometer,）,=1/1000m,1pm,（皮米）,1/1000nm,光镜,光学显微镜的分类,1,、生物显微镜,2,、荧光显微镜,3,、相差显微镜,4,、暗视野显微镜,5,、偏光显微镜,6,、激光共聚焦显微镜,光镜,光镜,光镜,大鼠附睾上皮细胞微丝（肌动蛋白）及细胞核,光镜,二 电子显微镜技术,常用的电镜有,透射电镜,和,扫描电镜,两种。,与光镜比较，电镜的基本原理是以电子束代替光线，以电磁透镜代替光学透镜。,电镜,透射电镜（,TEM,）的分辨率已达到,0.2nm,左右，可放大几万到几十万倍。,其工作原理是，电子束透过样品后，投射到荧光屏上，形成物像。由于电子易散射和被物体吸收，所以必须制备超薄切片（,90-100nm,）。,电镜样品的制备过程：,取小材料块（,1mm,3,以内）用戊二醛和锇酸双重固定环氧树脂包埋超薄切片机切片铅铀重金属电子染色电镜观察。,被金属盐所染的部位，因透过的电子束少而在荧光屏上显得暗，称为电子密度高，反之则称为电子密度低。,透 射 电 镜,电镜,电镜,扫描电镜（,SEM,）,是用极细的电子束在样品表面进行扫描并用特定的探测器收集所发生的二次电子，形成电信号传送到显像管，在荧光屏上显现出物体表面的立体图象。,扫描电镜的样品制备方法：,将较大的组织块用戊二醛和锇酸双重固定，经脱水和干燥后，再于样品表面上喷涂一薄层金，以增加二次电子数。,电镜,电镜,电镜,电镜技术,细胞侧面的紧密连接,电镜技术,脾红髓,第三节 家畜组织胚胎学的研究方法,学习组胚的思维方式,1.,理论联系实际,2.,形态联系机能,3.,平面联系立体,4.,静态联系动态,5.,共性联系个性,形态联系机能,舒张状态,收缩状态,平面联系立体,平面联系立体,平面联系立体,平面联系立体,平面联系立体,平面联系立体,静态与动态,共性联系个性,课后习题,1.,解释组织学的概念和研究内容,2.,什么是,H.E.,染色？,3.,什么是组织化学技术？,4.,简述石蜡切片技术,