1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,二级,三级,四级,五级,临,床微生物检查,标,本的采集与送检规范,桐乡市第一人民医院,主要内容,一,、临床微生物检查标本送检,的意义,二,、微生物检验目前,存在的困惑,三,、常见标本的采集与运送规范,一、临床微生物检查标本送检的意义,正确采集、,转运与保存微生物标本直接关系到致病微生物培养,的正确,性与阳,性率,是从临床微生物检验获得正确结果,的最关键一步。,近年来由各种,不同细菌引起的感染性 疾病越来越多,导致抗生素的过度使用,其结果是耐药菌株的增加。,临床微生物室应如何帮助临床医生合,理治疗感染性疾病成为我们共同目标。,检验误差发生率哪个
2、阶段最高,?,微生物结果的影响因素,1.,针对性的检验申请,2.,病人准备,3.,标本的采取,4.,标本的运输,5.,标本的保存和处理,4668.2%,标本检验,415%,结果审核和批准,危急值报告,18.5-27,%,分析前过程,按照时间的顺序,从临床医生开出医嘱开始,到实验室分析检验程序启动时终止。,包括检验申请,、患者准备、原始样品的采集、标本运送到实验室并在实验室内进行传输的全 部过程。,二,、微生物检验目前存在的困惑,目前存在的困惑,医生根据药敏报告进行临床治疗常常无效,;,实验室是否分离到真正的致病菌,;,标本采集不合格,;,标本延迟送检,血标本采集时存在的问题,1,血培养瓶存放于
3、冰箱,取出后立即采血进行培养,过低的温度抑制细菌生长。,2,血液标本,采集后放置于冰箱,低温抑制细菌生长。,3,血液标本采集后,放置时,间过长,细菌生长已达衰,老期,。,4,标本,采集量少,会,明 显降低阳性率。,5,标本,采集时,机不合适,未抓住菌血症时期,或在刚 使用抗生素不久。采血最好在,:,体温升高前半小时,使用抗生素前,或停用抗生素,24,小时,。,标本消毒时,消毒酒精未完全挥发,。,痰液标本采集存在的问题,随,机标本采集多而非晨痰,针对如此严重的分析前误差,我们能做什么,?,提供准确的“标本采集输送的标准操作程序,”,持续,的临床教育和交流,三,、常见标本的采集与运送规范,做好病原
4、学检查,要特别重视标本质量,基本原则,早期采集,无菌采集,根据目的菌的特性用不同的方法采集。,采取适量的标本,安全运送,我国血培养现状,阳性检出率低,10%(,国外约为,15%),血流中含菌量低,血培养的临床实践,欠规,范,!,血液中抗菌物质,培养条件限制,抗生素的应用,血培养问题,2008,年制,定,血,培养指导原,则要,求,:,怀疑血流感染时,应在不同部位采血 做血培养,至少,2,套。,提,高血培养阳性率关键点,消毒程序,静脉穿刺点皮肤消毒程序,取无菌棉签或棉球沾取安尔碘,II,型皮肤消毒剂原 液由内向外划圈,均匀涂擦消毒区域二遍,消毒 面积不小于,5cm5cm.,自然干燥后再行穿刺采 血
5、如没有佩戴无菌手套,不允许按压消毒后的 静脉。,(,38C,),或体温过低,(10,000/ul),粒细胞减少,(,1,000ul),休克,寒,颤,严重的局部感染,(,脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,,,腹部术,后感染,.),心率异常加快,低血压或高血压,呼吸频率加快,怀疑,血流感染,何时采血最佳,?,采集血培养样,本的最佳时间,?,答案,尽可能在患者寒战或开始发热时采血,在患者接受抗生素治疗前采,血,如,患者已经应用抗菌药物进行治疗,应,在下一次用药之前采血培养,应该采几份血液标本,?,基本概念,成人,“一套”,血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个,也叫“一份”,注意,:,一,次穿刺采血,
6、算“一套”,采,集第二套应从另一个穿刺点获,得。,儿童一般只做需氧培养,特,殊,患者才考虑厌氧培养,应该采几份血液标本,?,每位患者采血最少,2,套,3,套更,好,初发患者,绝不能只采,1,套标本,应该,采集多少血液,?,要采集多少血液,?,采血量是影响灵敏度最关键因素,成人一份标本,2,个培养瓶,(,需氧,+,厌氧,),每瓶,8-,10ml,共,20ml;,要求至少采两份标本,即,40ml,。儿童一般只需采集需氧瓶,在保证采集血量,1%,总,血量下,一般为,1-5ml,采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床,90%,以上,的感染为需氧,菌或兼性需氧菌感染,痰培养标本,采集与运送,咳痰途经口咽部
7、不可避免地受到污,染,唾液中口咽部定植菌的浓度可达,10,8,-10,9,/ml,。,研究显示,国内常规痰标本中约半数 存在唾液严重污染现象。,痰标本的采集方法,自然咳痰,:,要求患者在清晨用药前留取,因为晨痰量多,且含菌量也多。留取前刷牙,用清水漱口,3,次,以除去口腔内大部分杂菌,之后用力咳痰。咳痰较困难者可用,3%,5%,氯化钠溶液雾化吸入进行导痰;对咳嗽乏力或昏迷患者,可用普通吸痰管经鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物;痰液必须盛于无菌容器内送检。,痰标本的采集方法,咽拭子采样:上呼吸道感染,可通过咽拭子获取标本。标本采集前数小时内不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部。用咽拭子采集标本时应小心
8、认真、准确,避免触及舌、口腔黏膜和唾液,以防污染。如咽拭子标本发现致病菌,如肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等,且数量较多时,提示有该菌所致感染存在。,痰标本的采集方法,纤维支气管镜抽吸采样:插入纤支镜,达到肺炎病灶引流支气管内,纤支镜吸引口依次连接标本采集瓶,用负压将下呼吸道分泌物吸入标本采集瓶内送检。气管切开或气管插管患者也可用痰液收集器吸入标本采集瓶内。,痰标本的采集方法,纤支镜直视下可准确采集病灶部位的分泌物,但插入时纤支镜顶端和内孔常受咽喉部正常菌群污染,所以纤支镜吸引物常规培养结果不能完全代表肺部感染的病原体。但检查过程中如注意规范化操作,插入纤支镜时尽量不做上呼吸道分泌
9、物吸引,纤支镜吸痰遭口咽部细菌污染机会较咳痰明显减少。一般认为纤支镜吸引物定量培养可更有效地区分污染菌与感染菌。,痰标本的采集方法,人工气道是肺部感染的常见易感因素。经人工气道吸引下呼吸道分泌物是目前临床较常用的标本采集方法。但由于这些患者的气管纤毛黏液防御机制受到损害,常有致病菌或条件致病菌定植而不再保持无菌状态,故建立人工气道患者肺部感染病原学诊断有时更为困难。通常认为吸引物定量培养可能区分污染菌抑或感染菌。根据国内诊断标准,经人工气道吸痰细菌浓度,110,5,cfu/ml,可认为是感染病原菌,而浓度,110,4,cfu/ml,则认为是污染菌。,痰标本的采集方法,支气管肺泡灌洗术采样:采用
10、塑料导管,在近顶端处设置一气囊,纤支镜插入病灶引流支气管后,引入导管,然后用等渗氯化钠液,20,50ml,分次注入,并立即用低负压吸引回收,弃去首次灌洗液,以减少污染,收集以后回收的支气管肺泡灌洗液(,10-100ml,)送检。,痰标本运送,尽快,(2h),送至实验室。,如不能及时送达,应将标本暂存于,4C,但放置时 间不可超过,24h,。,痰液室温下延搁,2,5h,会降低肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和葡萄球菌的检出率,而定植于上呼吸道的非致病菌和革兰阴性杆菌会过度生长。,尿培养标本,采集与运送,采集指征,:,有典型的尿道刺激症状,肉眼脓尿或血尿,尿常规检查表现为白细,胞阳,性,(,几个,+,号,
11、),不明原因的发热,无其他局部症状,留置导尿管时间超过,48h,的患者出现发热,膀胱排空功能受损,泌尿系统疾病手术前。,采集方法,:,尽量取早晨第一次尿液,弃去开,始流出的尿液,以冲刷尿道口的细菌,取能代表膀 胱部位病原菌的中段尿,详细告知病人以下操作步骤,女性病人,收集标本前用清洗液冲洗干净,从前向后仔细擦洗尿 道区域,分开阴唇,开始排尿,排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿,男性病人,回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后,不停止尿流,采集中段尿,导尿管尿液,集尿袋内的尿液不能用作培养,;,导,尿管末端的尿液也不能用于培养,因为很难避 免没有尿道菌群污染。,不,能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。,采
12、样端,口用酒精消毒,;,必要时,可先夹住导尿管 但不能超过,30,分钟,;,将注射器针头插入采样端 口,抽吸出尿液,;,注入无菌杯或试管中,标本运送,收集中段尿液,5-10ml,及时送检。,室温,保存下不得超过,2,小时,否则应置于,4C,冰箱 保存,保存时间不得超,过,18h,。,粪便培养标本,采集与运送,采集指征,:,粪便标本的采集方法,自然排便采集标本时,取有脓血、粘液、组织碎 片部份的粪便,13g(,花生米大小,),。,液体粪便则取絮状物,一般取,13ml,直接装入 粪便容器或运送培养基中送检。,肛拭子采集粪便标本,:,先将,肛门周围洗净,然后用经无菌盐水湿润的 棉拭子插入肛,门,4-5cm(,幼儿,2-3cm),与直肠 粘膜表面接触,轻轻旋转,必须将棉拭子置于运 送培养基中送检。,粪便标本的运送,一般粪便标本装于无菌封闭广口塑料杯,;,直肠拭 子置于肠道运送培养基,。,粪便标本,:,室温,1,小时内送至。,直肠拭子,:,室温,1,小时内送至。,高度怀疑,霍乱弧菌感染的标本室温,1,小时内送至,运送必须符合特殊标本的安全要求。,谢谢,






