1、Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,病理组织切片制作技术,实验内容,掌握组织材料的取材、固定、脱水、透明、包埋、切片、烤片、脱蜡、染色及封固的基本操作。,一、取材及固定,（一）取材注意事项：,1,、材料新鲜,2,、组织块力求小而薄,3,、勿使组织块受挤压,4,、尽量保持组织的原有形态,5,、熟悉取材部位,（一）取材注意事项：,6,、选好组织块的切面,7,、保持材料的清洁,8,、切除不需要的部位,（
2、二）固定及目的：,应用化学试剂使组织或细胞中的无机成分和有机成分凝固或沉淀，以保持其生活状态的过程称为固定。,固定液是,10%,福尔马林溶液（,4%,甲醛溶液），固定,24,小时以上。,固定的目的,1,、迅速阻止组织、细胞死后变化，防止自溶与腐败，使之尽量保持生前的状态与结构。,2,、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持其原有状态。,3,、使组织内各种物质成分产生不同的折光率，以便染色后易于鉴别和观察。,4,、使组织块硬化，便于制作薄片。,固定的注意事项,1,、组织块不宜大，厚度小于,5mm,，长宽也应小于,1515mm,。,2,、固定液与组织块的比例应大于,10,：,
3、1,。,3,、软组织或较大组织块可先经,2-3,小时固定后再修整成小块，重新投入新配制的固定液中继续固定。,4,、肠道可在浆膜面贴上一层厚纸，以防固定组织变形。,(,三,),、,浸蜡与包埋,52-58,石蜡，浸蜡的全过程在,60,的温箱中进行。,1,：,1,二甲苯：石蜡,30min,石蜡一,30min,石蜡二,30min,石蜡三,30min,（四）切片、粘片,1,、切片前处理及切片,2,、载玻片处理,3,、粘片（展片）,4,、烤片,三、脱蜡和染色,（一）、脱蜡,1,、二甲苯,5-10min,2,、二甲苯,1-2min,3,、,1,：,1,二甲苯：乙醇（冬天,20min,）,5min,4,、无水
4、乙醇、,95%,、,80%,、,70,、,50%,梯度乙醇每级,1-2min,5,、蒸馏水,1-2min,（二）、染色（,HE,染色法）,6,、苏木素染液,5,15min,7,、蒸馏水（洗去多余的染液）,8,、分色,:1%,盐酸,-70%,乙醇分色,30-60sec,8,、蓝化,:,自来水冲洗（碱化，核蓝色）,15-20min,9,、蒸馏水（洗去多余的碱）,1-2min,10,、逐级入,50%,、,70%,、,85%,乙醇，每级,1-2min,11,、伊红,-95%,乙醇染液,15sec,2min,12,、,95%,、无水乙醇,、无水乙醇,逐级脱水，每级,1-2min,13,、,1,：,1,无水乙醇：二甲苯,、二甲苯,、二甲,苯,各,5min,四、封固,滴加中性树胶，加盖玻片封片。,五、光镜观察,放线菌病硫磺颗粒,HE,染色,300,倍,放线菌病硫磺颗粒,HE,染色,300,倍,肺毛霉病病理,HE,染色,肺曲霉球菌丝45度分枝HE染色,概括主要流程,取材 固定 脱水 透明,包埋,切片,封固 染色 脱蜡 烤片,Thank you!,
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