流感疫苗是怎样“炼”成的-.ppt

Cliquez pour modifier le style du titre,Cliquez pour modifier les styles du texte du masque,Deuxime niveau,Troisime niveau,Quatrime niveau,Cinquime niveau,|,*,Cliquez pour modifier le style du titre,Cliquez pour modifier les styles du texte du masque,Deuxime niveau,Troisime niveau,Quatrime niveau,Cinquime niveau,|,*,NAME OF PRESENTATION,Cliquez pour modifier le style du titre,Cliquez pour modifier les styles du texte du masque,Deuxime niveau,Troisime niveau,Quatrime niveau,Cinquime niveau,*,|,1,高质量流感疫苗,是怎样“炼”成的？,-,流感疫苗的生产工艺与质量控制,舒俭德,MD MBA,赛诺菲巴斯德,|,2,主要内容,流感疫苗研发历史,生产步骤和质量要求,从鸡蛋选择开始,质量是做出来的，不是检出来的,生物安全和上市后的药物警戒,1933,年：首次在雪貂身上分离到甲型流感病毒,1936,年：鸡胚培养流感病毒获得成功,1941,年：全病毒灭活流感疫苗在美国首次获得批准,1945,年：在美国开始广泛应用，由位于宾夕法尼亚州,Swiftwater,的,Pocono,生物制药公司生产,1968,年：流感病毒裂解疫苗上市，由法国巴斯德研究所和梅里厄研究所生产,流感疫苗研发历史,张延龄等 疫苗学 科学出版社,1176,页,|,3,脂质层,血凝素,(HA),神经氨酸酶,(NA),核衣壳,基质蛋白,全病毒疫苗,亚单位疫苗,裂解疫苗,流感疫苗种类,|,4,外抗原,内抗原,|,5,主要内容,流感疫苗研发历史,生产步骤和质量要求,从鸡蛋选择开始,质量是做出来的，不是检出来的,生物安全和上市后的药物警戒,|,8,主要内容,流感疫苗研发历史,生产步骤和质量要求,从鸡蛋选择开始,质量是做出来的，不是检出来的,生物安全和上市后的药物警戒,“三代单传”,的优种鸡胚,|,9,流感疫苗的生产从选择鸡蛋开始,流感疫苗生产工艺,运输,疫苗工厂,祖父母代鸡群选种,（种蛋）,上游供应商,父母代鸡苗,父母代母鸡,（受精）,父母代产受精蛋,（,25,周）,胚蛋孵化,（,9-11,天龄）,鸡蛋供应商,饲养阶段,生产阶段,孵化,选种优良,品系证明,祖父母代,无禽白血病污染鸡苗,专属农场饲养,+,现代化管理,全程跟踪的鸡群健康监控计划,先进的鸡胚孵化中心,专属农场,+,现代化管理,|,10,要求,如何做,为什么,专属农场,鸡场选址在,与世隔绝,的山区，方圆几公里内没有其他禽类农场，也,没有池塘和湖,降低外部环境污染养鸡场的风险,全封闭式鸡场,：对鸡舍的封闭和对饲养人员的封闭管理,避免与外界病原体接触（如禽流感）,现代化,管理,自动化环境,监控温度,、,通风系统,提高鸡群生活舒适度,大笼,3,平米养,40,只鸡，一只鸡有,720cm,2,自然交配,人性化饲养，避免因人工受精而造成交叉污染,定时灯光管理,调整“,体成熟”和“性成熟”时间，保证母鸡在正确的时间（,25,周）产下符合标准的受精蛋,全程跟踪的鸡群健康监控计划和孵化工艺,|,11,要求,如何做,为什么,全程跟踪的鸡群健康监控计划,定时体检（每周取样,),鸡群的疫苗接种计划,保证鸡群健康,鸡新城疫,鸡传染性气管炎,禽脑脊髓炎,鸡传染性喉气管炎,鸡马立克病,鸡毒支原体,沙门菌,鸡白痢,禽滑液囊支原体,禽流感,先进的孵化工艺,孵化中心启用前要采取相应监控措施（如确保无沙门氏菌方可,接收种蛋）,从鸡舍收集的鸡蛋在鸡舍要进行福尔马林熏蒸,送到孵化中心还要进行一次筛选（剔除脏蛋，裂纹蛋，轻重蛋）,对孵化过程全程记（温湿度、翻蛋等）,保证生物安全，确保可追溯性,在养鸡场对鸡胚,100%,全检,外观、洁净度、无微生物污染,蛋壳完整性、气室位置、鸡胚活力,胚龄、胚胎发育情况、胚重,胚蛋重量及蛋壳表面微生物,确保与欧盟同等质量标准,|,12,主要内容,流感疫苗研发历史,生产步骤和质量要求,从鸡蛋选择开始,质量是做出来的，不是检出来的,生物安全和上市后的药物警戒,流感疫苗生产流程,6,个阶段,22,个步骤，,用于质控的时间,70%,1,每个批号,100,多个检测点,400,多个检测参数,2,Sanofi Pasteur internal data.,Data on file Sanofi Pasteur.,病毒培养,病毒收获,纯化,裂解,灭活,终过滤,单价流感原液,QC,QC,QC,QC,QC,QC,QC,|,13,优化纯化、裂解和灭活工艺，提高产品安全性先纯化后裂解再灭活,工艺，降低因灭活致白蛋白结构改变而产生致敏性的风险,独特的,二次区带离心技术,，,利用病毒颗粒与杂质在介质中的不同分布，以蔗糖密度梯度离心方式纯化病毒,1,（如,去除流感病毒脂质层,）,应用,辛苯醇醚,-9,（,Triton X-100,）作为裂解剂，,有助于去除内毒素,，充分优化疫苗的安全性和免疫效果,2,采用,甲醛,灭活：甲醛对,病毒核酸和病毒蛋白质都有破坏,作用,它使分子间产生共价键，使蛋白分子无法再改变其空间构型,这使病毒无法感染新的细胞及复制,3,1.,王军志：疫苗的质量控制与评价 人民卫生出版社,2013,版 第,642,页,2.Delore V,et al.Vaccine 2006;24(10):1586-92,3.,疫苗灭活,疫苗的质量控制与评价 人民卫生出版社,2013,版 第,642,页,2.,Delore V,et al.Vaccine 2006;24(10):1586-92,3.,灭活剂,百度文库：,X-100),非离子型表面活性剂，裂解效果良好，工业操作容易，且对去除内毒素有帮助,无资料,灭活剂,3,-,丙内酯,在液体中完全水解，无残留,不稳定，易挥发，在空气中有毒性,甲醛,灭活效果良好，工艺成熟,需要严格去除残留游离甲醛,“有图有真相”,|,16,裂解前：可见完整病毒,裂解后：病毒完全分解，蛋白片段均匀分布于介质中，未见蛋白聚合体,过程控制：严格控制,批内差异,和,批间差异,|,17,中国药典与欧洲药典比较（摘要）,（资料来源：王军志 疫苗的质量控制与评价 人民卫生出版社,2013,版 第,646,页）,项目（成品中）,中国药典,欧洲药典,/SP,标准,总蛋白含量,400,g/ml,300,g/ml,卵清蛋白含量,500ng/ml,400ng/ml,硫柳汞（防腐剂）含量,100g/ml,无（,SP,标准）,抗生素残留量,50ng/,剂,50ng/,剂（,SP,标准）,鉴别,试验,病毒灭活验证,血凝素,含量,无菌,检查,内毒素,含量,蛋白质,含量,裂解剂,残留量,卵清蛋白含量,游离甲醛含量,抗生素残留量,异常毒性检查,单价原液,+,+,+,+,+,+,半成品,+,+,+,+,+,+,+,+,终成品,+,+,+,+,+,+,+,+,+,（资料来源：,SP,流感疫苗鉴定规程）,SP,内部放行检测,|,18,主要内容,流感疫苗研发历史,生产步骤和质量要求,从鸡蛋选择开始,质量是做出来的，不是检出来的,生物安全和上市后的药物警戒,生物安全和环境保护,生物安全,BSL2,（生物安全二级标准）的厂房设计，确保流感病毒不会释放到周边环境中,采用多组,HVAC,空调系统分区管理，通过气压设计合理设计气流流向，有效防止污染和交叉污染,FM Global,公司 的“,HPR”,认证（可以承受八级地震，十二级台风的侵袭,）,|,19,环境保护,自建废水处理站,所有,BSL2,区域产生的废弃物（废鸡蛋）经过热处理杀灭病毒，再由环保部门指定专业公司做焚毁处理,|,20,疫苗上市后不良反应监测和评价,疫苗上市后不良反应监测必要性,1,上市前动物实验的局限性,:,动物无法反应人体的自觉反应，毒理试验动物数量有限，人与动物模型的差异,上市前临床试验研究的局限性：,病例数少，研究时间短，受试人群范围较窄,1.,王军志 疫苗的质量控制与评价 人民卫生出版社,2013,版 第,340,页,.,2.,武文娣等 中国,2011,年疑似预防接种异常反应监测数据分析 中国疫苗和免疫,2013,年,4,月第,19,卷第,2,期 第,97-109页,AEFI,非严重,AEFI,严重,AEFI,一般反应,异常反应,例数,发生率,例数,发生率,例数,发生率,例数,发生率,例数,发生率,流感,疫苗,200 3,16.15,197 1,15.89,32,0.26,182 0,14.67,117,25.39,DTaP,29 267,41.08,29 146,40.91,121,0.17,27 935,39.21,1 187,1.67,2011,年流感疫苗,AEFI,报告例数和报告发生率,2,（,/10,万剂）,最常见症状（,/10,万剂）：,过敏性皮疹（,0.74,），血管性水肿（,0.12,），热性惊厥（,0.06,），过敏性紫癜（,0.06,），,ITP,（,0.02,），,GBS,（,0.02,）,，,过敏性休克（,0.01,），喉头水肿（,0.01,），无菌性脓肿（,0.01,），淋巴管炎,（,0.01,），,ADEM,（,0.01,）,|,21,全球及中国的定期安全性更新报告（,PSUR,）,在全球（含中国），自,2007,年,5,月,1,日至,2012,年,4,月,30,日，,Vaxigrip,的销量约,3,亿,4,千万剂,共收到不良事件报告,3295,例，,不良事件报告率为,9.7/100,万,*,其中严重不良事件,1495,例，非严重不良事件,1800,例,没有任何安全性问题或可疑的安全信号被提出,*Sanofi Pasteur Period Safety Update Report,*,武文娣等 中国,2011,年疑似预防接种异常反应监测数据分析 中国疫苗和免疫,2013,年,4,月第,19,卷第,2,期 第,97-109,页,在中国，自,2007,年,1,月,1,日至,2011,年,12,月,31,日，进口销售凡尔灵,疫苗约,2,千,7,百万剂,公司药物警戒部门共计收到不良事件书面报告,153,例，,不良事件报告率为,5.6/100,万,*,（中国流感疫苗,AEFI,报告发生率,161.5/100,万,*,）,最常见的接种后不良事件是轻中度的一过性发热、局部红肿、疼痛等，皮疹及过敏反应次之。,大多不良事件的程度均为轻微和中等，通常在接种后一天发生，三天内恢复。,|,22,全球及中国开展的上市后临床试验,在全球,(,除中国），自,2001,年以来，共有,41,项含有,Vaxigrip,的研究，在,22,个国家开展,：,法国,(18),比利时,(4),德国,(4),英国,(4),意大利,(1),西班牙,(1),瑞士,(5),芬兰,(3),立陶宛,(4),捷克,(1),奥地利,(1),俄罗斯,(1),乌克兰,(1),波兰,(1),加拿大,(1),巴西,(1),澳大利亚,(5),新西兰,(1),新加坡,(1),菲律宾,(1),韩国,(1),南非,(1),Data on file Sanofi Pasteur.,在中国，自,2002,年以来，已发表的,含有凡而灵,的研究,32,项，其中,：,免疫原性和安全性研究,20,项,安全性考核,3,项,有效性评价,9,项,|,23,临床安全性也是做出来的，不是考察出来的。,产品质量是做出来的，不是检出来的。,|,24,“,让人类不再因疫苗可预防的疾病而遭受痛苦甚至死亡。,”,路易,-,巴斯德,1822-1895,