第二讲药物分析.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,*,第二讲,药品检验工作的基本规律,Basic regularity of drug inspection,药物的鉴别试验,药物的杂质检查,药物定量分析与分析方法验证,药物的鉴别试验,Identification test of drug,鉴别试验的项目,鉴别试验的方法,鉴别试验的条件,鉴别试验的项目,Test items,性状,description,反映该药物特有的,物理性质,外观,(,颜色,),、臭、味、溶解度以及,物理常数：m.p.、b.p.、粘度、比旋度等,一般鉴别试验,general identification,test,专属鉴别试验,specific identification,test,FeCl,3,反应,加稀HCl，沉淀分解，生成游离,白色,碱式苯甲酸铁盐（,赭色沉淀,）,鉴别试验的方法,化学鉴别法,湿法,呈色反应,沉淀,生成反应,荧光反应,气体,生成反应,焰色反应,分解反应,干法,光谱鉴别,UV,IR,光谱鉴别法,UV-可见光谱法,红外光谱法,近红外光谱法,（near-infrared,spectrophotometry）,原子吸收法,（atomic absorption）,质谱法,(mass spectrometry),核磁共振法,（nuclear magnetic resonance，,NMR）,X射线粉末衍射法,（x-ray diffraction）,紫外光谱鉴别法,对比吸收光谱特征参数,比较吸收度比值一致性,对比吸收光谱一致性,X,射线粉末衍射法,X射线是伦琴在1895年发现的，又曾称为伦琴射线。本质上是波长很短的电磁波，一般认为波长为0.011nm，较紫外线还短。作为波，就可以产生衍射。所谓衍射，就是绕过障碍物边缘向前传播的现象,当X射线射到晶格排列整齐的晶体上，仅仅在某些方向有光线反射，这就是,X射线的衍射。有光线反射的方向可用布拉格方程加以描述,X,射线简介,布拉格方程,式中,为掠射角,；,d,hkl,为晶面间距,；,hkl,为晶面指数，即晶面与晶轴截距的倒数之比，也叫密勒指数,AO,C,B,d,图16-23布拉格方程,由布拉格方程，已知晶面间距和入射线波长，即可求出衍射线方向，可见该方程给出了什么条件下衍射的X射线可能从晶体射出。当然晶面有若干组，都可产生相应衍射，这些衍射均可由X射线衍射仪进行测定,X,射线衍射仪的工作原理,X射线衍射仪的工作原理一般采用粉末法,。粉末衍射仪的构成与工作原理见图,X射线管中不同靶材料，如,铜,、石墨等可发出各自特征波长,晶体粉末尽可能紧密地装入玻璃毛细管，压成多晶圆柱体,。当穿过铅块狭缝的一细束X射线射到晶体粉末时，总会有取向合适的微小晶体，使射线在其表面反向最强,由反射方向，根据布拉格方程即可求出晶面间距，进而求出键长。,本法可同时将各种波长的X射线反射到不同方向，记录为衍射图谱,在新药研制过程中，必需对,药物结构进行确证，固体样品一般要做X射线粉末衍射分析，,以便从测定结果可比较研制品与对照品是否一致。,X射线粉末衍射法是药物晶型进行定性鉴别的重要方法之一,应用,应用示例,西咪替丁的晶型研究,尹华等 药物分析杂志 2001，21(1)：3942,测试条件：,Cu k（靶），50kV-80mA（工作电压-电流），8()/min，DS=SS=1，RS=0.15mm(狭缝)，2,A晶型和B晶型的X射线测定数据及图谱见表,X射线衍射法除了用于晶型鉴别外，也可用于晶型药物的定量分析,A晶型和B晶型的X射线测定数据,A晶型B晶型衍射角晶面距丰度比衍射角晶面距 丰度比,9.38 0.9421 6 9.56 0.9240 35,12.92 0.6847 35 13.08 0.6763 61,14.66 0.6038 18 13.92 0.6357 25,16.44 0.5388 23,18.48 0.4797 62,16.74 0.5292 34,18.98 0.4672 41,26.00 0.3424 75 26.10 0.3411 75,26.34 0.3381 5 26.38 0.3376 100,27.24 0.3271 27 28.44 0.3136 28,28.44 0.3136 37,2,(),d,nm,I,I,0,2,(),d,nm,I,I,0,色谱鉴别法,TLC,Rf,HPLC,tr,GC,tr,CE,tr,溶液的浓度,溶液的温度,溶液的酸碱度,试验时间,干扰成分的存在,鉴别试验条件,关键：,反应灵敏度高，专属性好,药物的杂质检查,Test for purity,概述,一般杂质检查,特殊杂质检查,概述,有效性,针对某些药效进行检查的项目如Al(OH),3,的制酸力，反映主要质量；,明胶的凝冻度，控制物理性能；,利福平的结晶度，影响生物利用度,均一性,含量均一性,如“含量均匀度”试验,安全性,进行异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目,Pethidine Hydrochloride 盐酸哌替啶 m.p.186190,纯度要求,杂质来源,source of impurities,酸度,：以酸水解,Cl,-,SO,4,2,-,：水解试剂带入,乙醇中不溶物,：,糊精,，少量蛋白质,SO,3,2,-,：水解试剂，,SO,4,2,-,还原，用,H,2,SO,3,漂白产品带入,可溶性淀粉,：水解不完全,制备过程中产生,贮藏过程中产生,水解,药物最容易发生的变质反应，,特别在碱性条件下，或升温时,外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、,微生物等引起药物产生,A,晶型：不易被酯酶水解，活性很低,易被酯酶水解而吸收，为有效晶型,异构体和多晶型,无味氯霉素,B,晶型,氧化分解,麻醉乙醚 醛及有毒的过氧化物,杂质限量检查,Limit of,impurites,检查意义,一般杂质：,氯化物,硫酸盐,铁盐,重金属,砷盐,杂质 限量的制订,杂质限量计算、表示与检查方法,杂质,限量,检查方法,取,一定量,(,CV,)与被检杂质相同的纯品或对照品配成对照品溶液，与,一定量,(,S,)药物供试溶液在相同条件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定,氯化物检查,以对乙酰氨基酚为例,重金属检查,以葡萄糖为例,取本品2.0g,100ml,H,2,O,冷却,过滤,取,25ml,依法检查,AgCl,对照管,NaCl,溶液0.01mg Cl/ml,问L?,5.0ml,2ml,本品,4g,23ml,依法检查H,2,O,dilHAc,含重金属不得超过百万分之五，问应取标准铅溶液(0.01mg Pb/ml),多少ml?,一般杂质检查,Detection of general,impurites,项目氯化物,硫酸盐,铁盐,重金属,条件,稀HNO,3,10ml,稀HCl,2ml,稀HCl 4ml,过硫酸铵,pH3.5醋酸盐Buffer,灵敏度,0.050.08mg/50ml,0.1,0.5 mg/50ml,0.010.02mg/35ml,标准液浓度,0.01,mg/ml,0.1,mg/ml,0.01,mg/ml,0.01,mg/ml,第一法,反应试剂,AgNO,3,BaCl,2,NH,4,SCN,Heavy metals:,Ag,Pb,Hg,Cu,Bi,Sn,As,Co,Ni,Zn,依法检查,取两倍量供试品,标准管,样品管,滤液,硫代乙酰胺,过滤,硫代乙酰胺,H,2,O,MS,标准铅溶液,注意点,第二法：,含芳环或杂环的有机药物,如苯佐卡因、甲硝唑,第三法:,溶于碱的药物或在稀酸产生沉淀的药物，,如磺胺类、巴比妥类,第四法：,铅斑法,微孔滤膜过滤法检查重金属装置,C,垫圈(外径10mm,内径6mm),D,滤膜(直径10mm,孔径3.0m),E,辅助滤板,CD,A,B,F,E,滤器下部,滤器上盖,连接头,砷盐,arsenic,国内外常用方法：,古蔡氏法,Gutzeit,白田道夫法 Bettendorff,Ag-DDC法,古蔡氏法,SbH,3,+HgBr,2,SbH,2,(HgBr)+HBr 锑斑,Zn+HCl,白田道夫法,检查砷盐仪器装置,8cm,18cm,有孔玻璃旋塞,导气管,AsH,3,发生瓶,二乙基二硫代氨基甲酸银法,Ag-,d,iethyl,d,ithio,c,arbamate Ag-DDC法,510nm,红色胶态银,