发光免疫检测技术的临床应用及其应注意的问题.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,发光免疫检测技术的临床应用及其应注意的问题,杨晓林博士,北京大学医学部研究员,中国生物物理学会光生物学专业委员会副主任委员,国际生物发光和化学发光学会,(ISBC,）学术理事,Council member of scientific advisory board of,International Society on Bioluminescence&Chemiluminescence,由于化学反应（通常是氧化）产生电子能级处于激发态的物质，后者通过跃迁释放能量产生光子，从而导致的发光现象。,化学发光,（,Chemiluminescence,）,生物发光和化学发光均属于冷光，即发光不是由于发光体温度升高所至，发射波长也与其温度无关,按化学反应类型,化学发光的分类,酶促化学发光：,辣根过氧化物酶系统,碱性磷酸酶系统,黄嘌呤氧化酶系统,非酶促化学发光：,吖啶酯系统,草酸酯系统,三价铁,-,鲁米诺系统,闪光（,Flash,）,:,按发光持续时间,发光时间在数十分钟以上，如：,HRP-Luminol,系统,AP-AMPPD,系统,黄嘌呤氧化酶系统,无须原位进样、以速率法测量。,发光时间在数秒内，如吖啶酯,以原位进样,(In Situ Injector),和时间积分法测量,辉光（,Glow,）,:,商业化产品中常见的化学发光系统,时间,发光信号,辉光坪区,速率法测量,原位进样,积分法测量,闪光尖峰,闪光与辉光及其测量方式的差别,鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光系统,H,2,O,2,+,NH,2,O,O,NH,NH,N,2,OH,-,HRP,NH,2,CO,2,-,CO,2,-,+Photon(425nm),R,OH,R,OH,N,S,R,B,OH,OH,增强剂,（,Enhancer,）,商业化产品中常见的化学发光系统,发光信号检测,光敏二极管、光敏电池、光电偶合器（,CCD,）,结构简单、性能稳定,但灵敏度低、线性范围较窄。,主要特点,原理,光信号,光电转换器件,电压或电流信号,放大,单光子计数器是目前高灵敏度,发光分析仪的核心部件,光电倍增管,高压,高速放大器,高速比较器,高速分频器,发光样品,产生光子,激发光阴极,产生光电子,在阳极上形成较强信号,脉冲信号,相对发光单位,数字脉冲,(RLU),在各打拿极之间得到,能量和数目的倍增,单光子计数式发光检测仪,计,算,机,打,印,机,发光仪控制模块,发光仪执行模块,控制器,程控高压,计数,/,贮存器,单光子计数器,样品运动,/,定位装置,程控自动门锁及检测装置,原位注射泵,光生物学技术的应用范围,军事侦测,公安稽查,卫生检疫,药物筛查,医学诊断,环境检测,航天遥感,生命科学,已成为现代生物技术最活跃的领域之一,光生物学检测技术的优越性,彻底消除了放射性危害,无半衰期限制，试剂稳定性和有效期大大延长,容易实现连续、动态、重复测定,适合于复合标记系统进行多指标并行测定,操作简单，反应速度快，容易实现自动化,灵敏度和线性范围超过以往技术,几种标记,/,检测技术灵敏度的比较,酶标,荧光,放免,发光,灵敏度,(mol/L),10,-18,10,-15,10,-12,10,-9,几种标记,/,检测技术线性范围的比较,酶标,荧光,放免,发光,线性范围,10,5,10,4,10,3,10,2,几种标记,/,检测试剂的有效期比较,酶标,荧光,放免,发光,有效期（月）,18,15,12,9,6,3,0,0,20,000,40,000,60,000,80,000,100,000,试剂盒,仪器,特殊防护,治理污染,人民币,人民币,三种免疫测定技术的成本及费用,三种免疫测定技术的成本及费用,放免,酶标,发光,抗原：可诱导动物免疫系统产生免疫应答的物质。,抗体：由动物免疫系统产生，可特异性结合某种物质的球蛋白。,免疫分析技术基本原理,利用抗原、抗体之间的特异性结合来测定、分析特定物质的方法,免疫测定技术分类,反应结束后是否需要分离,均相法,（,Homogeneous,）,非均相法,（,Heterogeneous,）,均相法,（,Homogeneous,）,免疫凝集法：,自然凝集：血型测定,肥达氏反应；,敏化凝集：血球凝集法,凝胶（微粒）比浊法,免疫扩散法；免疫电泳法近场液闪法，,酶,-,辅酶（亚基）配位法,荧光偏振法，荧光共振法,吖啶酯水解法，生物传感器,非均相法,（,Heterogeneous,）,免疫印迹（,Western-blot,）：基因表达分析、,HIV,感染确认实验,免疫组织化学技术：原位基因表达分析、临床病理学分析,纸片法：早孕快速检测、吸毒检测快速、献血快速检测,放射免疫法（,RIA,）：沉降法（放免）、固相法（免放，,IRMA,）,荧光免疫法（,FIA,）；酶联免疫法（,EIA,，,ELISA,）,酶联荧光法（,FEIA,）、化学发光法（,LIA,）,酶联化学发光法（,ELIA,）、时间分辨荧光法（,DELFIA,）、电化学发光法（,ECLIA,）；,双抗体夹心法（三明志法）原理,固相支持物表面,包被抗体,标记抗体,待测物,夹心法的剂量,-,反应关系曲线,信号强度（,Y,）,线性范围,待测物浓度（,X,）,Hook(,前滞,),效应,分析灵敏度（最低检测限）（,95%,可信度）：,S0,+,2SD,在该曲线上所对应的浓度值。,功能灵敏度：,测定误差（变异）,20%,的最低可检测浓度。,线性范围：,（分析）,功能灵敏度,-,变异,20%,的最高检测浓度,相关系数,0.99,的曲线范围,竞争法的原理,固相支持物表面,待测物,包被抗体,标记抗原,竞争法的剂量,-,反应关系曲线,待测物浓度（,X,）,信号强度（,Y,）,线性范围,分析灵敏度（最低检测限）（,95%,可信度）：,S0-2SD,在该曲线上所对应的浓度值,功能灵敏度：,测定误差（变异）,20%,的最低可检测浓度,线性范围：,（分析）,功能灵敏度,-,变异,20%,的最高检测浓度,相关系数,0.99,的曲线范围,间接法原理,包被体,待测抗体,包被抗原,标记抗体,（二抗）,俘获法原理,俘获抗体,（二抗）,待测抗体,标记抗原,包被体,双抗原夹心法原理,包被体,待测抗体,包被抗原,标记抗原,间接包被夹心法原理,包被体,待测抗原,包被连接物,标记抗体,俘获抗体特点：所有试剂盒均采用同一包被物和包被工艺,发光免疫分析基本操作步骤（一步法）,待测样品,标记抗体或抗原,洗涤去除未结合的反应物,发光底物,仪器检测,包被抗体或抗原的反应管,反应,30-60,分钟,反应,0-5,分钟,发光免疫分析基本操作步骤（二步法）,待测样品,洗涤去除未结合的反应物,发光底物,仪器检测,包被抗体或抗原的反应管,反应,30-60,分钟,反应,0-5,分钟,标记抗体或抗原,洗涤去除未结合的反应物,反应,30-60,分钟,发光免疫分析技术,的现状及应注意的问题,目前已商品化的光生物学标记检测技术整体性能比较,时间分辨荧光（也称时间延迟光致发光）：,Time Resolved Fluorescence,（,Time Delayed Photoluminescence,）解离增强荧光免疫分析（,DEFIA,）,电化学发光（也称场致发光）：,Electrochemiluminescence,（,Electroluminescence,）,化学发光：,Chemiluminescence,例如：电化学发光,TSH,检测试剂的分析灵敏度为,0.005mIU/L,第四代化学发光,TSH,检测试剂的分析灵敏度为,0.001mIU/L,原因在于抗体的亲合力，而不是检测技术。,筛选抗体、屏蔽干扰，生产工艺、管理水平和技术服务是试剂生产的关键,这些发光检测技术的灵敏度及线性范围都已经接近了免疫反应的极限。,灵敏度的瓶颈在于抗体亲合力和干扰免疫反应的因素，而不是检测技术。,片面宣扬检测技术灵敏度和线性范围的强弱，不仅毫无意义，而且也是荒谬的。,发光技术,临床免疫分析划时代的进步,以,TSH(,促甲状腺素,),为例,第一代,TSH,检测试剂盒,普通放免,功能灵敏度,1-2mIU/L,基本无法测到,正常值下限以下,的血清,TSH,浓度,对甲亢的诊断意义不大,固相放免,功能灵敏度,0.1-0.2mIU/L,在甲亢的诊断中,开始发挥作用,第二代,TSH,检测试剂盒,发光免疫,功能灵敏度,0.01-0.02mIU/L,成为甲亢诊断的,首选指标之一,发光免疫,功能灵敏度,0.001-0.002mIU/L,一系列新的临床现象,改写了垂体甲状腺轴,的调控状态,第三代,TSH,检测试剂盒,第四代,TSH,检测试剂盒,目前商品化发光免疫分析产品的几个特点,大多采用全自动工作方式，部分采用微孔板半自动方式,多数采用磁性或非磁性微粒包被，以增加表面积，使灵敏度进一步提高，反应时间大大缩短,使用内建标准曲线加校正的办法产生工作曲线,部分产品采用流动池测定方式,(,适合于闪光型发光或电化学发光,),流动池检测方式示意图,检测器,检测池,负压泵,废液,四通阀,冲洗液,样品管,计量泵,干燥空气,原位进样泵,氧化剂,使用商品化发光免疫分析产品,可能遇到的几个问题,与以往方法（放免等）在检测指标的正常值及临床意义上的差异。,如：免疫源性胰岛素与真胰岛素、,HCG,、性激素等,采用不同的单抗或多抗时检测结果也有较大差异。,（单抗特异性好，受干扰小，因此测值低）,不同厂家产品测定结果之间一致性差（未与国家标准品比对）。,所使用的内建标准曲线结合校正的方法不尽完善。,部分产品不显示原始数据，无法监控其准确性。,免疫分析结果的干扰因素,温度,氧化剂,还原剂,光线,磁场,金属离子,防腐剂,杂质,本底物质,同一干扰因素对不同检测方法的不同影响,待测物,包被（结合）,抗体,放免法,免放或发光法,标记抗原,TBG,离心沉降,洗,涤,祛,除,以甲状腺素结合蛋白（,TBG,）干扰竞争法测定,T3,为例,信号,结果,信号,结果,使用商品化发光免疫分析产品,必须做好的几个工作,在厂家提供的数据基础上，自行建立正常参考值系统。,明确各个试剂盒的特异性及交叉反应情况,如：小分子激素之间，以及与自身前体或代谢物之间的交叉,胰岛素与,C-,肽、胰岛素原之间的交叉,FSH,、,LH,、,HCG,之间的交叉。,充分利用现有国标参考品校正结果（注意防腐剂干扰）,（可以从国家药品生物制品检定所或临床检验中心得到）,自行建立多点质控（,2-3,点）监控每次实验的准确性。,尽可能避免干扰因素,采样：清洁样品管（防止还原剂干扰）、不使用酶抑制剂、及时送检,实验室：恒温、避免强光和强磁场、严格操作规程、及时维护、报修,正常值参考的意义及灰色区域的存在,如果测定结果处于灰色区域（约在正常值上下限以内,20%,）内，则需要进一步追踪检查。,95%,或,99%,-20%,+20%,自身基础数据,最佳“正常参考值”,对于患者来讲，最佳的参考值是自己以往的测定数据，即自身对照；,因此积累病人的基础数据非常重要。,尤其是性激素、生长激素、胰岛素等具有周期性分泌或释放规律的激素。,时间,FSH,卵泡期 排卵期 黄体期 月经期,正常人平均值变化规律,正常参考值范围,某一患者变化规律（无排卵峰）,保证检验结果准确性的,对该检验项目或其检验结果普遍意义的解释,不要试图替临床大夫为某一具体病例作出最终诊断,建立和完善实验室面向临床大夫乃至患者的咨询制度,检验医师,必须牢记,检验医师给临床所提供的一切,服务,仅限于,化验结果与临床不符的原因,由于个体差异或不明干扰因素的存在，总有少数病例的化验结果与其临床表现不符,操作失误、,仪器故障、,试剂失活等因素,某些夹心一步法试剂,往往存在前滞效应,药物以及其它,基础疾病的干扰,排除这些因素后,重复测定或重复送样,用同试剂盒的校准品,A,稀释后再重新测定,及时与临床沟通,结合说明书综合判断,原因,解决,不同实验方法，,或同一方法的不同厂家产品之间，,其测定结果和临床正常值都会有所差异,不同实验室环境和不同人群条件下，,其测定结果和临床正常值也会有所不同,在厂家提供的正常参考值基础上,建立自己的正常参考系统,待测物质的降解,及其与血清蛋白结合状态的改变，,某些化验项目的检测结果往往受,标本存放时间及其贮存条件的影响,及时采样、送检，,实验室及时完成化验，,严格按照试剂盒说明书要求存放,常见临床免疫检测指标的意义,及其限制因素,激素类型,氨基酸：甲状腺激素,蛋白（肽）：甲状旁腺激素、,下丘脑激素、,垂体激素、,降钙素、,胎盘激素、,心肌激素、,胃肠激素,类固醇：性激素和皮质激素,儿茶酚胺：肾上腺素,下丘脑,-,垂体,-,内分泌轴及其调节关系,长反馈：垂体或下丘脑激素受靶细胞,分泌激素的反馈调节，以负,反馈为主，但排卵时雌激素,为正反馈。,短反馈：垂体激素对于下丘脑的反馈,负反馈,超短反馈：下丘或垂体激素直接负反馈,自身的合成和分泌,类固醇激素的合成,男女性激素和皮质激素均来源于共同的前体和合成、代谢途径，其结构也非常相似。因此皮质功能紊乱、肝肾功能紊乱、某些遗传缺陷、服用类固醇药物等均可造成这些激素测定结果的异常。,甲状腺功能指标评价,甲亢的诊断价值依次为：,TSH=FT3,FT4,TT3,TT4,甲低的诊断价值依次为：,FT4=TSH,TT4,FT3,TT3,发光法,TSH,、,FT3,、,FT4,提高了灵敏度，使得其临床意义大于,TT4,和,TT3,两步法,操作时间长,灵敏度差,准确性差,类似物法,操作时间短,灵敏度较好,准确性较好,反向竞争法,（标记抗体）,操作时间短,灵敏度更好,准确性更好,第一代,第二代,第三代,血清,FT3,、,FT4,试剂盒的发展,（,消除结合蛋白对测定的影响,）,TGAb,TMAb=TPO,抗体,其生理作用需要通过生长介素,(SM),介导,SM,也称胰岛素样生长因子,(IGF),，主要在肝脏及多种,GH,靶细胞合成,SM-C,即,IGF I,，结构与胰岛素有近一半的氨基酸残基相同。,生长激素（,GH,）,生长激素紊乱,生长激素缺乏症（侏儒）,巨人症及肢端肥大症,GH,测定的临床意义,垂体腺瘤、肾癌、肺癌,运动刺激试验,药物刺激试验,（胰岛素,-,低血糖试验）,GH,分泌的抑制试验,胰岛素,免疫源性胰岛素：,采用多抗或普通单抗,与胰岛素原和,C,肽有交叉,正常值较高,糖尿病分型：,型空腹胰岛素低，,OGTT,后变化缓慢，甚至无变化；,型空腹高胰岛素，,OGTT,后胰岛素释放延迟，总量不低。,肝硬变：空腹胰岛素高于正常,2,3,倍。,OGTT,各个时相胰岛素升高。,胰岛素瘤：静脉注入亮氨酸后血中胰岛素水平明显升高。,甲亢：初期空腹胰岛素水平高，,OGTT,与正常人相似；,长期严重甲亢可导致胰岛,细胞功能衰竭，发展为糖尿病。,真胰岛素：,采用胰岛素原掩蔽性胰岛素单抗,与胰岛素原和,C,肽无交叉,正常值较低,C-,肽,胰岛素升高,C,肽正常，外周血,C,肽胰岛素比值降低。,糖尿病,如患者存在胰岛素抗体或用外源性胰岛素治疗，则改为测定,C,肽,肝硬化,生理性升高：禁食及大量活动,病理性升高：糖尿病，增高数值和糖尿病的严重程度有关,胰高血糖素,胰高血糖素静脉注射实验,胰高血糖素瘤鉴别,评价糖尿病人胰岛功能,胰岛素抗体,GAD,是,型糖尿病的关键始动靶自身抗原,其抗体是,型糖尿病及前期的重要标志,长期用胰岛素的病人可产生,未用过胰岛素的,I,型糖尿病人胰岛素抗体阳性是自身免疫性细胞损害的标志,谷氨酸脱羧酶（,GAD,）抗体,与抗胰岛细胞抗体（,ICA,）相比，,GAD-Ab,阳性率高、持续时间长、测定方法简单，,有很好的临床预见性，可替代,ICA,。,性激素,LH,FSH,正常婴儿和小孩极微；在青春期前开始分泌女性绝经后明显升高。,成年男性含量比较恒定，老年男性因睾丸功能衰减，含量大大升高。,垂体瘤切除术后患者,LH,和,FSH,减少，估计垂体瘤手术效果有一定价值,性腺发育不良,垂体瘤,某些癌症（肺癌）,慢性肾衰,腺皮质激素治疗后,异位激素分泌综合征,垂体性性功能衰退,神经性厌食,使用性激素,溢乳闭经征,青春期延期,催乳素瘤好发于女性,表现为,泌乳,闭经,多毛,痤疮,不育,垂体催乳素,（,hPRL,）,垂体催乳素瘤、月经异常和不孕的病因鉴别，应激刺激可引起,hPRL,的分泌。,男性以,性功能减退,阳萎,不育,垂体压迫症状为主,偶见泌乳。,睾酮,睾丸间质细胞瘤,真性男性性早熟,女性多毛症,皮质醇增多症,完全性雄性激素不应综合征,原发生睾丸功能减退,垂体前叶功能减退,男性不育,高,hPRL,血症,红斑狼疮,骨质疏松,慢性肝病,慢性肾衰,血液中睾酮,98%,与蛋白结合，只有游离态具有生物活性,女性性早熟,男性乳房发育,红斑狼疮,肝硬变,子宫内膜癌,乳腺癌,糖尿病孕妇,女性性发育不全,多囊卵巢综合症,葡萄胎,妊娠高血压症,柯兴氏综合症,卵巢囊肿,雌二醇,灵敏度要求高,多胎妊娠,17-,羟化酶缺乏症,子宫内膜腺癌,先兆子痫,妊娠高血压,妊娠合并糖尿病,胎儿宫内生长迟缓,卵巢颗粒层膜细胞瘤,无排卵性子宫功能性出血,闭经,不孕,早产,黄体功能不全,异位妊娠,孕酮,血浆中孕酮绝大部分为结合型，极小数为游离型。,孕酮与黄体及胎盘关系密切，用于监测排卵、黄体功能以及判断妊娠继续。,小分子性激素测定方法的进展,（消除蛋白结合和类似物,/,前体,/,代谢产物的干扰）,直接测定法,经典方法,消化样品,萃取有机相,分子筛柱分离各类甾体,测定,血清直接测定,+,高特异性单抗,+,结合蛋白屏蔽技术,hCG,游离,亚单位试剂,亚单位特异且不与完整的,hCG,分子结合的单抗,专门测定,hCG,的游离,亚单位,多用于唐氏综合征的早期筛查。,绒毛膜促性腺激素,（,hCG,）,临床意义,早孕、先兆流产的监护、异位妊娠、葡萄胎、绒癌、精原细胞瘤,肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫癌、肝癌、畸胎瘤、唐氏综合征等。,普通型试剂,多抗,受其它激素干扰,灵敏度不高,hCG,试剂,亚单位特异单抗,特异性和灵敏度较高,分类,:,特异性,特定肿瘤时才会显著性升高,辅助性,正常情况下也可产生，在发生肿瘤时急剧升高,肿瘤标志物,定义：由肿瘤细胞合成、释放，或者是机体受肿瘤刺激而产生的物质。,用途：高危人群的,早期筛查,肿瘤确诊病人的,疗效观察,和,预后分析,。,性质：胚胎源性、含糖物质、酶、激素，其它蛋白质,不能单纯依赖肿瘤标志物确诊肿瘤,原发性结肠癌（,45,90%,）,腺胰、胆管、胃、食道、肺、乳腺癌和泌尿系肿瘤（,50,70%,）,结肠癌术后,1,3,周内血,CEA,可下降到正常，如持续阳性说明切除不全或转移，提示预后差或有复发可能,乳头状癌时胆汁,CEA,检测特异性,100%,良性肿瘤、炎症和退行性疾病、吸烟者可小幅升高,原发性肝癌（,90%,）手术疗效和预后判断指标,其它肿瘤（胃癌、结肠癌）,各种胎儿发育缺陷、低氧症、死胎,肝良性病变（肝炎）轻度增高,甲胎蛋白（,AFP,）,癌胚抗原（,CEA,）,升高,唐氏综合症,降低,上皮性卵巢癌和子宫内膜癌的标志物,浆液性子宫内膜样癌、透明细胞癌、输卵管癌、未分化卵巢癌,卵巢癌复发早期增高,良性卵巢疾患（,3%-6%,）、怀孕期前,3,个月、行经期、子宫内膜异位症、子宫纤维变性、急性输卵管炎、肝病、胸腹膜和心包感染可稍有上升,CA15-3,乳腺癌（,30-50%,）、肺癌、肺腺癌及卵巢癌,乳腺癌术后复发转移,妊娠可引起升高,CA125,胰腺癌和结、直肠癌，肿瘤切除后如再次上升表示复发。,胆囊癌、胆管癌、肝癌、胃癌也升高,胆道癌胆汁检测灵敏度,100%,胰腺癌胆汁检测灵敏度,76.5%,特异性,96.4%,胰腺炎和黄疸时可呈一过性增高,普遍性肿瘤标志相关抗原，不是特指某个器官的肿瘤标志物。,胰腺癌、胆囊癌（,90%,）；肝癌、胃癌、结直肠癌、卵巢肿瘤,胰腺炎、结肠炎和肺炎时，也会升高,CA50,CA199,是目前小细胞肺癌最敏感最特异的肿瘤标志物之一，阳性率,65%-100%,NSE,水平与小细胞肺癌转移程度相关，与转移的部位无关,治疗前后动态观察血清,NSE浓度可以监测小细胞肺癌的治疗效果。,水溶性铁贮存蛋白，具有不同的同工铁蛋白图谱。,酸性同分异构体铁蛋白增高与白血病、肺癌、乳腺癌有关,肝癌时如果,AFP,测定值较低，可用铁蛋白测定结果作为补充证据,色素沉着旺盛、炎症，尤其是肝炎时，铁蛋白也会升高,神经元特异性烯醇化酶,（,NSE,）,铁蛋白,（,Frri,）,目前国际上强调用,等克分子反应,的单克隆抗体检测,PSA,，否则测定值偏高。但美国很多公司甚至大公司的多种,PSA,试剂盒均未采用等克分子抗体，目前在欧洲已被逐渐排挤出市场。,前列腺特异抗原,(PSA),前列腺癌筛查和治疗后监控,良性前列腺疾病也可升高,女性乳腺癌患者中可检出,FPSA/TPSA,值,25%,良性前列腺增生,前列腺癌,0,100%,前列腺癌的特异性标志物，少数几个器官特异性肿瘤标志物之一,地高辛,测定易受地高辛的某些代谢物，以及某些内源性类固醇物质的干扰,取血应在服药,10,天以后及最后一次服药,16,小时（出现中毒除外）,0.8,2.0,3.0,4.0,ng/ml,血清浓度,治疗剂量,80%,病人心律紊乱,治疗心房纤颤和,心房扑动除外,高度怀疑中毒,注意特征性,心率失常和,心电图改变,必须停药,考虑抢救措施,MoM,正常人群中位数的倍数，即正常人群为,1.0MoM,唐氏综合征的实验室诊断,母体血清,AFP,低于,1.0 MoM,（,0.47-0.86MoM均值,0.65MoM,）,母体血清游离,-hCG,亚单位孕早期显著高于正常,妊娠相关血浆蛋白,A(PAPP-A),孕早期显著降低,PAPP-A,和游离,-hCG,亚单位联合应用,8-14,周时检出率,62%,，假阳性率为,5%,；孕,15-22,周检出率为,59%,1987,年研究，,1991,年申请化学发光液专利（几乎与国外同步）。,1995,年获得上述专利，开始研制单光子计数式发光仪。,1997,年研制成功第一代微孔板单光子计数式发光分析仪,开发出部分发光免疫试剂盒。,2000,年获得单光子计数器专利，开始发光免疫检测试剂盒的新药申报。,2003,年获医疗器械和药品生产许可证，正式批量生产。,源德的发展历程,自主开发出具有国际水平的发光底物,在国际上率先创立的分程增敏、辅助增敏、坪区延长和干扰屏蔽技术,使发光灵敏度和线性范围均比同类技术提高一个数量级,坪区（信号稳定期）和抗干扰能力也明显提高,因而使试剂盒的稳定性、线性范围超过了国外同类产品,而且还克服了酶促发光固有的工作曲线漂移、低端斜率非线性下降等不足,本底噪音 最低检测限 线性范围 稳定性,（,RLU/0.1,秒,)(HRP pg/,样品,)(HRP pg/,样品,)(,平均变异系数,),某国外产品,273.1 0.10.01 0.1-204.8 24.4,自行研制,70.9 0.010.01 0.01-819.2 55,发光液的主要技术性能比较,本公司发光底物,美国某知名公司,发光底物,国际领先的免疫测定试剂盒,我们攻克了发光液贮存、抗体玻璃化及标记物稳定剂等相关配套技术，使试剂盒的有效期和稳定性达到了国际水平。,甲状旁腺功能类、肾上腺功能类、贫血类、维生素类、产前筛查、,新生儿疾病筛查、甲型、丙型肝炎类、艾滋病检测,FSH,、,LH,、,PRL,、,T,、,P,、,E2,、,HCG,、,GH,ASA,、,AEA,、,ACA,、,AOA,肝炎标志物类,HBV,（定性、定量）,甲状腺激素类,TT3,、,TT4,、,FT3,、,FT4,、,TSH,糖尿病类,INS,、,C-P,、,INS-Ab,、,GAD-Ab,性激素类,肿瘤标志类,PSA,、,FPSA,、,CEA,、,AFP,、,NSE,、,Ferr,、,CA-50,、,CA-125,、,CA-153,、,CA-199,优生优育类,TORCH,（,IgM,、,IgG,）,不育不孕类,八大类近,60,个检测项目,率先建立了用发光免疫法直接检测患者血清内,SARS,病毒的技术,为更早期发现,SARS,病例提供了快速、简便、廉价的技术手段。,第一个在中国境内注册并正式合法生产的发光免疫检测试剂盒。,全球第一个,SARS,冠状病毒抗原检测试剂盒,新药证书和药品生产批准文号,国际领先的发光检测仪制造技术,高线性度光电校正光源，大大提高了单光子计数仪的可靠性和一致性。,我们还在国际上首先提出了双量程自动转换单光子计数器的设计思想,在充分保持高灵敏度特性的基础上大大拓宽了线性范围，达到,108,左右,而一般单量程计数器的线性范围不超过,106,。,我们的仪器产品,微孔板发光免疫分析系统,新型模块化全自动发光免疫分析系统,基于发光检测技术的食品农药残留检测设备,微生物污染现场快速测试产品,JETLIA-96/2,内置电脑自动加液型发光免疫分析仪,AUTOLIA-12/48,型全自动发光免疫分析仪,国际上为数不多的在整个发光检测技术平台所有领域内都具备自主知识产权的企业之一。,被美国,时代,周刊收入的某微型全自动发光免疫检测仪，在其技术更新中也曾征询过我们的建议。,当选国际生物发光及化学发光学会（,International Society on Bioluminescence&Chemiluminescence:ISBC,）学术理事（,Council Member of Scientific Advisory Board,）和申办,ISBC,国际会议为标志，,我们已经成为国际化学发光检测技术研究中心之一。,SUMMARY,试剂生产车间主楼,一楼接待大厅,二楼商务中心,GMP,洁净车间,质检中心,研发中心,仪器装配线,局部,