沈敏《酵母菌种群数量的变化》.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,探究“培养液中酵母菌种群数量的变化”,1,实验学习内容,实验原理,实验设计思路,实验步骤,实验注意事项,实验结论,血球计数板计数,对照实验设置,实验数据记录表设计,2,实验原理,思考：,1,、酵母菌的呼吸方式。,2,、酵母菌在液体培养基中繁殖其种群数量受哪些因素影响。,3,、酵母菌种群数量增长的曲线类型。,3,实验设计思路,思考：,如何设置对照实验探究“酵母菌种群数量变化”？,提示：,从影响实验室中培养的酵母菌的因素来考虑,4,实验设计思路,试管编号,A,B,C,试管内,液体,温度条件,对照实验设置,285,28,培养液,无菌水,酵母菌,10,0.1,10,0.1,10,0.1,5,实验步骤,（,1,）向三支试管中加入培养液或无菌水,（,2,）向三支试管中接种酵母菌,（,3,）将三支试管在不同的温度下培养,（,4,）每天取样计数酵母菌,（,5,）分析数据画出曲线,6,（,1,）计数工具,血球计数板,放大后的计数池,每块计数板由,H,形凹槽分为,2,个同样的计数池。,每个计数池分为,9,个大方格。,血球计数板计数,9,25,个中格,16,个小格,16,个中格,25,个小格,25X16=400,小格,16X25=400,小格,每个计数室（大方格）共有,400,小格，总容积为,0.1mm,3,*,抽样检测：,516=80,个小格,抽样检测：,425=100,个小格,10,血球计数板计数,思考：,1,、使用,1625,规格时计数几个中方格中的细胞数？即个小方格中的细胞数？,2,、设每个中方格中的细菌数分别是：,A1,，,A2,，,A3,，,A4,，稀释倍数为：,B,，则样品中细胞数,/ml,是多少？,4,个中方格，,100,个小方格,（,A1+A2+A3+A4,）,/100,4000000B,11,（,2,）计算：,每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？,酵母细胞个数,/mL=,所数小方格中细胞总数,x400 x10,4,x,稀释倍数,所数的小方格数,12,实验数据记录,连续多天统计，每天统计多次。请设计实验数据记录表格,时间,次数,1,2,3,4,5,6,7,1,2,3,平均值,13,酵母菌培养：,培养液配制,灭菌,接种,培养,配制质量分数为,5,的葡萄糖溶液（葡萄糖,20g,，,1000 mL,水），分装到,5,个烧杯中（,200mL/,烧杯）,用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。,接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的,1mL,刻度吸管每次吸取,0.1mL,酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意,：,滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）,将烧杯置于,28,的恒温箱中培养,无菌,操作,讨论：,计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？,14,实验,注意事项,1,、从试管中吸取培养液进行计数前，为什么需将试管轻轻震荡几次？,2,、若一个小方格内酵母菌数过多，难以数清，则如何处理？,使培养液中酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差。,将培养液稀释一定的倍数，再重新计数。,15,注意事项：,进行计数前，应先将试管,摇匀,，目的是使,酵母菌在培养液中混合均匀,，以减少计数误差。,显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取,相邻两边及顶角,计数。,若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液,稀释,一定倍数后再计数。,本实验,无,对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成,前后对照,。,血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用,浸泡和冲洗,的方法清洗。,实验,注意事项,16,试管,编号,培养液,/mL,无菌水,/mL,酵母菌母液,/mL,温度（）,A,10,0.1,28,B,10,0.1,5,C,10,0.1,28,实验,结果分析,17,实验,结果分析,1,、分析酵母菌种群数量变化趋势的原因,2,、分析影响酵母菌种群数量的因素。,养料、温度、,pH,及有害代谢废物等,数量,时间,18,实验再探究,培养空间、氧气会影响酵母菌的生长吗？,（,2008,年江苏卷,31,题,）为研究酵母菌种群密度的动态变化，某同学按下表所列条件进行了,A,、,B,、,C,和,D,共,4,组实验，用,1000mL,锥形瓶作为培养器皿，棉塞封口，在,25,下静置培养，其他实验条件均相同，定时用血球计数板计数。根据实验结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下。,19,例,2:,酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为,0.1mm,3,，由,400,个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先,后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有,5,个酵母菌，则,10mL,该培养液中酵母菌总数有,个,。,例,1:,在用血球计数板（,2mm2mm,方格）对某一稀释,50,倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为,0.1mm,）酵母菌平均数为,16据此估算,10mL,培养液中有酵母菌,个。,2x10,7,210,8,稀释,20,例,3,检测员将,1 mL,水样稀释,10,倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由,2516,400,个小格组成，容纳液体的总体积为,0,1 mm,3,。,现观察到图中该计数室所示,a,、,b,、,c,、,d,、,e 5,个中格,80,个小格内共有蓝藻,n,个，则上述水样中约有蓝藻,个,mL,。,5n10,5,21,利用计数板可在显微镜下对微生物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片，样品就滴在计数室内。计数室由,2516,400,个小室组成，容纳液体的总体积为,0,1mL,。现将,lmL,酵母菌样品加,99mL,无菌水稀释，用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，盖上盖玻片并用滤纸吸去多余菌液。,现观察到图中所示,a,、,b,、,c,、,d,、,e 5,个大格,80,个小室内共有酵母菌,44,个，则上述,ImL,酵母菌样品中约有菌体,_,个。,22,