实验二--试管苗增殖与生根培养.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实 验 二,试管苗,增殖,与,生根,培养,一、实验目的,1.掌握试管苗,增殖,与,生根,的基本方法。,2.了解,外源激素,和,营养物质,对试管苗生长发育的调节作用。,二、实验原理,1.,增殖,和,生根,是植物组织培养实现快速繁殖的基本环节。,2.,细胞分裂素,能实现植物的增殖，,生长素或不加任何激素,能够实现植物生根，很多时候生根时会降低培养基的无机盐浓度。,离体条件,植物组织培养过程,3,4,5,1,2,White培养基配方（mg/L）,成份,Na,2,SO,4,KNO,3,CaNO,3,.4H,2,O,MgSO,4,.7H,2,O,NaH,2,PO,4,.H,2,O,KCl,含量,200,80,300,720,16.5,65,H,3,BO,3,MnSO,4,.4H,2,O,ZnSO,4,.7H,2,O,MoO,3,1.5,7,3,0.0001,肌醇,烟酸,盐酸吡哆醇,盐酸硫胺素,甘氨酸,100,0.3,0.1,0.1,3,FeSO,4,.7H,2,O,Na,2,.EDTA.2H,2,O,5560,7460,1962年日本的Murashige 和美国的Skoog 二人为烟草培养设计。是,最常用,的，也是,最基本,的培养基。,MS培养基,无机盐含量较高,，配比合理，符合植物细胞生长的营养生理需求硝酸盐含量和氨离子浓度较高。,特点,三、实验操作,(一)试管苗增殖培养,1.实验材料：,文心兰,2.增殖培养基配方：,MS+6-BA 2 mg/L+琼脂粉 5.5 mg/L+糖 30 mg/L,pH 6.0 1L,文心兰试管苗继代增殖,3.操作步骤,3.1,铺开无菌纸，将一丛文心兰试管苗置于无菌纸上，分离成单株。,3.2,用,手术刀,认真清理基部的老叶、黄叶和残留培养基。,3.3,接种至增殖培养基上，4个单株/人。,3.4,标签上记录姓名、日期。,(二)试管苗生根培养,1.实验材料：滁菊,2.生根培养基配方：,MS+琼脂粉 5.5 mg/L+糖 30 mg/L pH 6.0 1L,滁菊生根,3.操作步骤,3.1,铺开无菌纸，用,剪刀,将培养瓶中的,滁菊单株,从基部分离，置于无菌纸上。,3.2,用,剪刀,将滁菊单株剪成2-3段。,3.3,接种至生根培养基上。,3.4,贴上标签，记录姓名、日期。,四、实验记录,(一)增殖率、增殖数的计算,增殖率(%)=,有新芽的外植体数,/接种外植体数,平均增殖数=,新芽数,/接种外植体数,(二)生根率、生根数的计算,五、注意事项,(一),每位同学,一张,无菌纸。,(二),下次试验,培养基,由第二组配制。,(三),下次,试验材料,由每位同学自己摘取(,大叶黄杨带有生长点,)。,(四),第,二,组打扫卫生。,