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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,亳州市实验技能大赛实验操作培训,主 要 内 容,常用仪器的基本操作,薄层色谱操作要点,滴定分析操作要点,高效液相色谱操作要点,一、,检验,基本操作,1 玻璃仪器的洗涤,2,胶头滴管的使用,3,量筒的使用,4,移液管的使用,1 玻璃仪器的洗涤,在分析工作中，洗净玻璃仪器是一个必须做的实验前的准备工作，也是一个技术性的工作。,玻璃仪器特别是容量器皿在使用前必须充分洗涤，化学实验所用的玻璃仪器必须是十分洁净的，否则会影响实验效果，甚至导致实验失败。,洗涤时应根据污物性质和实验要求选择不同方法。,常用的烧杯、三角锥形瓶、量筒等一般玻璃仪器洗涤时，先用自来水冲洗，再用毛刷蘸取肥皂水等洗涤剂直接刷洗内外表面。刷洗时，使毛刷在盛有水的玻璃仪器里转动或上下移动，但用力不得过猛，否则容易把玻璃仪器（尤其是试管）底部损坏。最后用自来水冲洗干净，用纯化水淋洗三次。,滴定管、容量瓶和移液管等量器不可用毛刷刷洗，根据油污程度选择适当的洗涤剂洗。,玻璃仪器洗净的标准,内壁上附着的水膜均匀,既不聚成水滴，也不成股流下。,2,胶头滴管的使用,滴管在化学实验中经常使用，用于滴加少量的液体。,吸取试液时先将滴管提出液面，挤出胶头中的空气，再把滴管伸入试液中吸取。向试管中滴液时，不能把滴管伸入试管中，以免滴管碰到试管壁而被污染。滴加试液要一滴一滴地加，并边加边振摇（另有规定除外），注意观察现象。,吸有试剂的滴管不可倒置，以免试剂流入滴头，沾污试剂或腐蚀橡胶胶帽；不要把滴管放在实验台或其他地方，以免沾污滴管。用过的滴管要立即用清水冲洗干净（滴瓶上的滴管不要用水冲洗），以备再用。严禁用未经清洗的滴管再吸取别的试剂。,3,量筒的使用,使用量筒量液时，应把量筒放在水平的桌面上，使眼睛的视线和液体凹液面的最低点在同一水平面上，读取和凹面相切的刻度即可量取指定体积的液体时，应先倒入接近所需体积的液体，然后改用胶头滴管滴加。用量筒量取液体体积是一种粗略的计量法，所以在使用中必须选用合适的规格，不要用大量筒计量小体积，也不要用小量筒多次量取大体积的液体，否则都会引起较大的误差(误差可能达到10%）。在选择使用量筒前必須考虑此精确度是否可行。量筒是厚壁容器，绝不能用来加热或量取热的液体，也不能在其中混合液体，更不能用做反应容器。,4,移液管的使用,用大拇指及中指拿住管颈标线上方，将吸管插入待吸液下23cm处，另一只手拿吸耳球，先将空气压出，然后把球尖端紧按到吸管口上，慢慢松开握球的手指，溶液逐渐吸入管内。在吸取少量液体时要留心不要吸入空气，以免污染吸球,待溶液超过吸管标线时，迅速移开吸耳球，,尽快以手指代替吸球阻塞移液管,，将管向上提离开液面。,另取一洁净的烧杯，将移液管垂直管尖紧贴已倾斜的小烧杯内壁，微微松动食指，并用拇指和中指轻轻捻转吸管，将液面平稳下降，直至溶液弯液面下端与标线相切时立即用食指按住管口，使液滴不再流出。,改拿接受容器，并使接受容器倾斜30，将管尖紧贴接受容器内壁，松开右手食指，使溶液自然流出，待液面下降到管尖后，再等待15秒取出吸管。,释放液体时，试验人员应将试管侧放，让试管协助液体由移液管释放出来。试验人员不应强行把有关液体排出。因为这样会影响检测结果。,使用移液管时，因为水分子有附着力，能依附在移液管内壁，因此，按正确的方法读取准确结果。,保留有效数字位数的原则：保留一位可疑数(估计值),滴定管可准确读到0.1ml，小数点后第二位没有刻度，是估计值，但根据保留原则，记录数据时要记录到小数点后第二位。,另外，当把液体由移液管释放出来时，由于水分子的附着力，会有部份液体依附在移液管的管尖中，这是正常现象。,使用注意事项：,1 使用前应用少许移取液润洗23次。,2 试验者应使用吸球吸收液体，而不应使用口部吮取。,3 控制液面时，应使视线，刻度线与液体的凹液面最低点处于同一水平。,4 放液时移液管要垂直，尖端触及容器壁，放液完毕，尖端残留液应保留，不能吹入容器。,5 分液漏斗的使用,分液漏斗是一种用来分离两种不相混溶液的仪器。它常用于从溶液中萃取有机物或者用水、碱、酸等洗涤粗品中的杂质,。,1.使用前的准备工作,（1）分液漏斗上口的顶塞应用小线系在漏斗上口的颈部，旋塞则用橡皮筋绑好，以避免脱落打破；,（2）取下旋塞并用纸将旋塞及旋塞腔擦干，在旋塞孔的两侧涂上一层薄薄的凡士林，再小心塞上旋塞并来回旋转数次，使凡士林均匀分布并透明。但上口的顶塞不能涂凡士林；,（3）使用前应先用水检查顶塞、旋塞是否紧密。倒置或旋转旋塞时都必须不漏水，方可进行使用。,2.萃取与洗涤操作,把分液漏斗放置在固定于铁架台的铁环（用石棉绳缠扎）上。关闭旋塞并在漏斗颈下面放一个锥形瓶。图21由分液漏斗上口倒入溶液与溶剂（液体总体积应不超过漏斗容积的2/3），然后盖紧顶塞并封闭气孔。取下分液漏斗，振摇使两层液体充分接触。振摇时，右手捏住漏斗上口颈部，并用食指根部（或手掌）顶住顶塞，以防顶塞松开。用左手大拇指、食指按住处于上方的旋塞把手，既要能防止振摇时旋塞转动或脱落，又要便于灵活地旋开旋塞。漏斗颈向上倾斜3045角。,用两手旋转振摇分液漏斗数秒钟后，仍保持漏斗的倾斜度，旋开旋塞，放出蒸气或发生的气体，使内外压力平衡。当漏斗内有易挥发有机溶剂（如乙醚）或有二氧化碳气体放出时，更应及时放气并注意远离别人。放气完毕，关闭旋塞，再行振摇。如此重复34次至无明显气体放出。操作易挥发有机物时，不能用手拿球体部分。,3.两相液体的分离操作,分液漏斗进行液体分离时，必须放置在铁环上静置分层；待两层液体界面清晰时，先将顶塞的凹缝与分液漏斗上口颈部的小孔对好（与大气相通），再把分液漏斗下端靠在接受瓶壁上，然后缓缓旋开旋塞，放出下层液体，放时先快后慢，当两液面界限接近旋塞时，关闭旋塞并手持漏斗颈稍加振摇，使粘附在漏斗壁上的液体下沉，再静置片刻，下层液体常略有增多，再将下层液体仔细放出，此种操作可重复23次，以便把下层液体分净。当最后一滴下层液体刚刚通过旋塞孔时，关闭旋塞。待颈部液体流完后，将上层液体从上口倒出。绝不可由旋塞放出上层液体，以免被残留在漏斗颈的下层液体所沾污。,不论萃取还是洗涤，上下两层液体都要保留至实验完毕。否则一旦中间操作失误，就无法补救和检查。,分液漏斗与碱性溶液接触后，必须用水冲洗干净。不用时，顶塞、旋塞应用薄纸条夹好，以防粘住。（若已粘住，不要硬扭，可用水泡开）。当分液漏斗需放入烘箱中干燥时，应先卸下顶塞与旋塞，上面的凡士林必须用纸擦挣，否则凡士林在烘箱中炭化后，很难洗去。,乳浊液的破坏方法,当形成乳浊液难于分层时，可采用以下几种方法破坏乳浊液。,（1）以接近垂直的位置将分液漏斗轻轻回荡或用玻璃棒轻轻搅拌。,（2）加入食盐（或某些去泡剂）利用盐析作用来破坏乳化。,（3）若因碱性物质而乳化，加入少量稀硫酸来破坏乳化。,（4）加热或滴加数滴乙醇（改变表面张力）来破坏乳化。,二,、,常用仪器,基本操作,1 分析天平(电子天平),2 酸度计(pH计),3,高效液相色谱仪,1 分析天平(电子天平),根据分度值分类,千分之一天平,（1mg）,试剂配制,万分之一天平,（0.1mg）,十万分之一天平,（0.01mg）,对照品/标准品,基准物质,使用注意事项：,1 防震、防磁、防腐蚀,2 水平-水准仪,3 室温1030，湿度70%以下,4 及时清理污物、定期校准,2 酸度计（pH计）,（1）开机预热,（2）校正,（3）测定样品,校正(定位)：,选择与待测样品pH值较接近的标准缓冲液进行校正（定位）。误差不超过0.02。,如：葡萄糖氯化钠注射液（3.55.5）,4.00的标准缓冲液校正，6.86的标准缓冲液核对，,穿琥宁氯化钠注射液（5.57.0）,6.86的标准缓冲液校正，4.00的标准缓冲液核对。,标准缓冲液：,可密闭保存23个月，切忌将使用后的缓冲液倒回原瓶，以防污染。一旦发现混浊、沉淀，则不能继续使用。,复合电极的保存,：,清洗吸干后，浸泡在3mol/L氯化钾溶液的棕色容器中，以减少氧气和光线对超薄、具有活性的电极玻璃球泡的催化老化作用，可延长使用12年。,5 高效液相色谱仪,开机自检,调整相关参数,甲醇预冲,流动相预冲,安装色谱柱,进样,超声脱气,微孔滤膜过滤,调节pH值,混合流动相组分,检测器,泵,柱温箱,铜陵市药品检验所,六通进样阀,高效液相故障排除,1 从部件的运转情况推测，如压力、流速的变化,2 从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、峰形,3 从数据结果中分析,1,从压力变化判断,1.1无压力,1.2,压力高/低,1.,3 压力不稳,2,从色谱图的异常情况判断,2.,1 峰前沿/拖尾,2.,1 峰前沿/拖尾,2.,2 峰变宽,2.,3 峰分叉,2.,4 无峰,2.5,负峰,2.6,鬼峰,2.7,保留时间变化,2.8,基线漂移,高效液相保养,1 输液泵：使用含缓冲盐的流动相后，要立刻用大量水冲洗泵头。更换流动相时，要保证两种溶剂的互溶性。,2 检测器：四小时以上不用时，关闭灯源。频繁开关灯也会影响寿命。,3 色谱柱：新柱用甲醇活化，冲12小时。使用保护柱。,5%甲醇,95%甲醇,甲醇浓度由低到高,铜陵市药品检验所,薄层色谱操作,一、样品前处理,二、展开剂配制,三、薄层板选择,四、点样、饱和及展开,一、样品的处理,1.1称量（电子分析天平）,检查天平水平，清扫；不可直接用手接触样品；称量物需放置正确位置；切勿不关门读数或者天平数字在变化中即读数；（若减重法称量）称量瓶敲样及回敲操作应规范；样品不可洒落，称量量不可超过规定量；称量结束需清扫天平或者使天平复原；正确使用干燥器。,1.2前处理,回流管装置、索氏提取器等的安装使用（略）,样品溶液稀释、转移及定容,容量瓶正确试漏，洗涤干净；转移动作规范（玻璃管引流）洗涤次数；摇匀动作正确；定容准确，手持容量瓶时手指位置应在瓶颈刻度上方；移液管需洗涤干净，润洗操作（包括润洗液量、润洗次数）、吸液操作（左手吸耳球，右手移液管）不可吸空，调刻线前擦干外壁；吸液时移液管竖直、靠壁停留15S；放液时不可有漏滴或溅出。,二、展开剂配制,量器选择；试剂不可洒出；配制后摇匀，贴标签,三、点样,选择正确的薄层板；点样基线距底边8-15mm,；圆点直径8mm，薄层板切忌被擢破,四、饱和、展开、显色,展开槽需饱和或需说明饱和展开槽；展开剂前沿距薄层板上缘距离把握好；显色条件：加热或喷显色剂或其他,滴定分析操作要点,一、称量 样品配制,（略）,二、移液管操作,（略）,三、滴定操作,3.1滴定操作,滴定管洗涤干净；酸碱滴定管选择；润洗及润洗次数；注意试漏；活塞安装及涂抹凡士林（如有必要）注意不要堵塞流液孔；装溶液前应摇匀待装溶液；装液操作规范（手指应放在滴定管0刻度线以上部分）；滴定速度不可过快；滴定与摇瓶动作配合应熟练，溶液不可溅出；放液手法应规范（左手单手放液）；半滴控制，近终点靠液次数一般不多于4次；终点判断，每次读数前停留30S，读数时视线与凹液面持平，不可提供虚假读数,尽量不要重新滴定,3.2结束工作,废纸、废液,谢 谢！,