高考生物复习高手必备+萃取高招专题22微生物的应用含17高考真题及解析全国公开课一等奖百校联赛示范课.pptx

第九单元,生物技术实践,(,选修部分,),第1页,专题二十二,微生物应用,第2页,本专题主要介绍了人类对微生物传统利用和现,代应用,试验多而且条件复杂。要很好地掌握它们,需要关注以下几点,:,首先,对全部试验应该抓住,试验,目标,一切设计都是为试验目标服务,在答题时要抓住,主题思想,有方向地进行考虑,;,其次,试验事实是自然科学基础,对于装置、流程、检测方式等应该依据客观事实作答,要充分了解,切忌死记硬背,提议合上书本默记流程,从试验设计者角度分析每个步骤意义、每个仪器作用,从而将整个试验内化,;,最终,生物试验是精细,对各种试剂、温度等细节记忆不可防止,不要嫌它们繁杂琐碎。考题中经常出现同类试验,尤其是果酒和果醋制备试验相互比较,要明确其原理、流程、装置上相同点和不一样点。试验目标、原理决定了流程、装置安排、检测方式,主题思想要紧紧把握,细节要熟记于心,才能在面对各种问题时收放自如。,复旦大学柴晴圆,第3页,第4页,考点,51,微生物培养、计数与应用,1,.(,课标全国,37,15,分,较低难度,),一些土壤细菌可将尿素分解成,CO,2,和,NH,3,供植物吸收和利用。回答以下问题。,(1),有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生,。能分解尿素细菌不能以尿素分解产物,CO,2,作为碳源,原因是,。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内葡萄糖主要作用是,(,答出两点即可),。,(2),为了筛选可分解尿素细菌,在配制培养基时,应选择,(,填,“,尿素,”“NH,4,NO,3,”,或,“,尿素,+NH,4,NO,3,”),作为氮源,不选择其它两组原因是,。,(3),用来筛选分解尿素细菌培养基含有,KH,2,PO,4,和,Na,2,HPO,4,其作用有,(,答出两点即可,),。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第5页,考点,51,【答案】,(1),脲酶分解尿素细菌是异养生物,不能利用,CO,2,来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其它有机物合成提供原料,(2),尿素其它两组都含有,NH,4,NO,3,能分解尿素细菌和不能分解尿素细菌都能利用,NH,4,NO,3,不能起到筛选作用,(3),为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中,pH,稳定,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第6页,考点,51,【解析】,(1),有些细菌能分解尿素是因为其能产生分解尿素酶,即脲酶。能分解尿素细菌是异养生物,不能利用,CO,2,来合成有机物。葡萄糖既能作为能源,为细胞代谢提供能量,也能作为碳源,为其它有机物合成提供原料。,(2),利用尿素作为唯一氮源选择培养基可筛选分解尿素细菌。其它两组都含有,NH,4,NO,3,能分解尿素细菌和不能分解尿素细菌都能利用,NH,4,NO,3,不能起到筛选作用。,(3),培养基中,KH,2,PO,4,和,Na,2,HPO,4,既可为细菌生长提供无机营养,又可作为缓冲剂保持细胞生长过程中,pH,稳定。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第7页,考点,51,2,.(,课标全国,39,15,分,较低难度,),苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成。回答以下问题,:,(1),酵母菌呼吸代谢路径如图所表示。图中过程,和,是苹果醋生产第一阶段,在酵母菌细胞,中进行,其产物乙醇与,试剂反应展现灰绿色,这一反应可用于乙醇检验,;,过程,在酵母菌细胞,中进行。与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌增殖速度,。,(2),第二阶段是在醋酸杆菌作用下将第一阶段产生乙醇转变为醋酸过程,依据醋酸杆菌呼吸作用类型,该过程需要在,条件下才能完成。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第8页,考点,51,(3),在生产过程中,第一阶段和第二阶段发酵温度不一样,第一阶段温度,(,填,“,低于,”,或,“,高于,”),第二阶段。,(4),醋酸杆菌属于,核生物,其细胞结构中,(,填,“,含有,”,或,“,不含有,”),线粒体。,【答案】,(1),细胞质基质重铬酸钾线粒体快,(2),有氧,(3),低于,(4),原不含有,【解析】,本题考查果酒和果醋制作。,(1),图中过程,是有氧呼吸和无氧呼吸第一阶段,是无氧呼吸第二阶段,过程,是有氧呼吸第二、三阶段。酵母菌是兼性厌氧型微生物,有氧呼吸第一阶段和无氧呼吸均在细胞质基质内进行。利用乙醇在酸性条件下与重铬酸钾试剂反应展现灰绿色来检验乙醇。有氧呼吸第二、三阶段在酵母菌细胞线粒体中进行。与无氧条件相比,在有氧条件下,酵母菌增殖速度快。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第9页,考点,51,(2),醋酸杆菌是一个好氧细菌,只有当氧气充分时才能进行旺盛生命活动,所以将第一阶段产生乙醇转变为醋酸过程,需要在有氧条件下才能完成。,(3),酵母菌发酵温度普通控制在,1825,而制作葡萄醋时要将温度控制在,3035,。,(4),醋酸杆菌属于原核生物,其细胞中只有核糖体一个细胞器,不含有线粒体等其它细胞器。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第10页,考点,51,3,.(,课标全国,39,15,分,较低难度,),某同学用新鲜泡菜滤液为试验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生乳酸能溶解培养基中碳酸钙。回答以下问题。,(1),分离纯化乳酸菌时,首先需要用,对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释理由是,。,(2),推测在分离纯化所用培养基中加入碳酸钙作用有,和,。分离纯化时应挑选出,菌落作为候选菌。,(3),乳酸菌在,-20,长久保留时,菌液中常需要加入一定量,(,填,“,蒸馏水,”,、,“,甘油,”,或,“,碳酸钙,”),。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题第11页,考点,51,【答案】,(1),无菌水泡菜滤液中菌浓度高,直接培养极难分离得到单菌落,(2),判别乳酸菌中和产生乳酸,(,或酸,),含有透明圈,(3),甘油,【解析】,本题考查微生物培养及分离。,(1),分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,原因是在稀释度足够高菌液里,聚集在一起乳酸菌被分散,培养后能在培养基表面形成单个菌落。,(2),在分离纯化所用培养基中加入碳酸钙作用有判别乳酸菌和中和乳酸菌代谢过程中产生乳酸,;,乳酸菌产生乳酸能溶解培养基中碳酸钙,故分离纯化时应挑选出含有透明圈菌落作为候选菌。,(3),乳酸菌在,-20,长久保留时,菌液中常需要加入一定量甘油试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第12页,考点,51,4,.(,课标全国,39,15,分,较低难度,),已知微生物,A,能够产生油脂,微生物,B,能够产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油生产。回答相关问题。,(1),显微观察时,微生物,A,菌体中油脂通常可用,染色。微生物,A,产生油脂不易挥发,可选取,(,填,“,萃取法,”,或,“,水蒸气蒸馏法,”),从菌体中提取。,(2),为了从自然界中取得能产生脂肪酶微生物,B,单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物土壤中取样,并应选取以,为碳源固体培养基进行培养。,(3),若要测定培养液中微生物,B,菌体数,可在显微镜下用,直接计数若要测定其活菌数量,可选取,法进行计数。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第13页,考点,51,(4),为了确定微生物,B,产生脂肪酶最适温度,某同学测得相同时间内,在,35,、,40,、,45,温度下降解,10 g,油脂所需酶量依次为,4 mg,、,1 mg,、,6 mg,则上述三个温度中,条件下该酶活力最小。为了深入确定该酶最适温度,应围绕,设计后续试验。,【答案】,(1),苏丹,(,或苏丹,),萃取法,(2),油脂,(3),血细胞计数板稀释涂布平板,(4)45,40,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第14页,考点,51,【解析】,本题经过微生物培养与计数、生物体内有效成份提取、酶活性等知识考查试验与探究能力。,(1),显微观察时,用苏丹,(,或苏丹,),可将微生物,A,菌体中油脂染成橘黄色,(,或红色,),易于观察。微生物,A,菌体中油脂不易挥发,宜选取萃取法提取。,(2),微生物,B,可产生脂肪酶,故应选取以油脂为碳源固体培养基进行培养,以取得该菌单菌落。,(3),若要测定微生物,B,菌体数,可在显微镜下用血细胞计数板直接计数,;,若要测定其活菌数量,可选取稀释涂布平板法进行计数。,(4),三种不一样温度下分解相同油脂所需酶量,45,最多,40,最少,说明三个温度中,45,条件下该酶活力最小,40,条件下该酶活力最大。为了深入确定该酶最适温度,应围绕,40,设计后续试验。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第15页,考点,51,5,.(,课标全国,39,15,分,较低难度,),植物秸秆中纤维素可被一些微生物分解。回答以下问题,:,(1),分解秸秆中纤维素微生物能分泌纤维素酶,该酶是由,3,种组分组成复合酶,其中葡萄糖苷酶可将,分解成,。,(2),在含纤维素培养基中加入刚果红,(CR),时,CR,可与纤维素形成,色复合物。用含有,CR,该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌菌落为中心,。,(3),为从富含纤维素土壤中分离取得纤维素分解菌单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基,(,成份见下表,):,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第16页,考点,51,注,:“+”,表示有,“-”,表示无。,据表判断,培养基甲,(,填,“,能,”,或,“,不能,”),用于分离和判别纤维素分解菌,原因是,;,培养基乙,(,填,“,能,”,或,“,不能,”),用于分离和判别纤维素分解菌,原因是,。,【答案】,(1),纤维二糖葡萄糖,(2),红透明圈,(3),不能液体培养基不能用于分离单菌落不能,培养基中没有纤维素,不会形成,CR-,纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第17页,考点,51,【解析】,本题考查微生物分离与培养。,(1),纤维素酶是复合酶,葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖。,(2)CR,可与纤维素形成红色复合物。用含有,CR,培养基培养纤维素分解菌时,菌落存在部位纤维素被分解,不会形成红色复合物,所以培养基上会出现以该菌落为中心透明圈。,(3),培养基甲中有淀粉,纤维素不是唯一碳源,且无琼脂,是液体培养基,不能用于分离和判别纤维素分解菌。培养基乙中无纤维素粉,即使出现单菌落,也不能确定为纤维素分解菌,所以不能用于分离和判别纤维素分解菌。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第18页,考点,51,6,.(,课标全国,39,15,分,较低难度,),为了调查某河流水质情况,某研究小组测定了该河流水样中细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答以下问题,:,(1),该小组采取稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后空白平板先行培养了一段时间,这么做目标是,;,然后,将,1 mL,水样稀释,100,倍,在,3,个平板上用涂布法分别接入,0.1 mL,稀释液,;,经适当培养后,3,个平板上菌落数分别为,39,、,38,和,37,。据此可得出每升水样中活菌数为,。,(2),该小组采取平板划线法分离水样中细菌。操作时,接种环经过,灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线末端开始划线。这么做目标是,。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第19页,考点,51,(3),示意图,A,和,B,中,表示是用稀释涂布平板法接种培养后得到结果。,(4),该小组将得到菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发觉,:,振荡培养细菌比静置培养细菌生长速度快。分析其原因是,:,振荡培养能提升培养液中,含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提升,利用率。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第20页,考点,51,【答案】,(1),检测培养基平板灭菌是否合格,3.810,7,(2),灼烧将聚集菌体逐步稀释方便取得单个菌落,(3)B,(4),溶解氧营养物质,【解析】,为了检测培养基灭菌平板是否合格,应对空白平板先行培养一段时间。每升水样中活菌数为,(39+38+37),3,0.11001,000=3.810,7,(,个,),。对接种环应进行灼烧灭菌。为了将聚集菌体逐步稀释以取得单个菌落,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线末端开始划线。,A,表示是平板划线法接种培养后得到结果,B,表示是用稀释涂布平板法接种后得到结果。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第21页,考点,51,7,.(,课标全国,39,15,分,较低难度,),回答以下相关泡菜制作问题。,(1),制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目标是,。为了缩短制作时间,有些人还会在冷却后盐水中加入少许陈泡菜液,加入陈泡菜液作用是,。,(2),泡菜制作过程中,乳酸发酵过程即为乳酸菌进行,过程。该过程发生在乳酸菌细胞,中。,(3),泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量原因有,、,和,等。,(4),从开始制作到泡菜品质最正确这段时间内,泡菜液逐步变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其它杂菌消长规律是,原因是,。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第22页,考点,51,【答案】,(1),杀灭杂菌增加乳酸菌数量,(2),无氧呼吸细胞质,(3),温度腌制时间食盐用量,(4),乳酸菌数量增多,杂菌数量降低乳酸菌比杂菌更为耐酸,【解析】,(1),盐水中可能存在微生物,所以需要灭菌,;,制作泡菜时,加入陈泡菜液,可增加乳酸菌数量。,(2)乳酸菌进行无氧呼吸,该过程在细胞质中进行。,(3),在泡菜制作过程中,要注意控制腌制时间、温度和食盐用量。温度过高、食盐用量不足、腌制时间过短,都会造成亚硝酸盐含量增加。,(4),开始时,乳酸菌和其它杂菌都繁殖,伴随时间延长,乳酸菌产生乳酸逐步增加,抑制了杂菌繁殖,泡菜坛中乳酸菌逐步增多,其它杂菌逐步降低。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第23页,考点,51,8,.(,课标全国,39,15,分,较低难度,),临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药试验。试验时,首先要从病人身上获取少许样本,然后按照一定试验步骤操作,以确定某致病菌对不一样抗生素敏感性。,回答以下问题。,(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用,法或,法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、判别等步骤取得。,(2),取该单菌落适当稀释,用,法接种于固体培养基表面,在,37,培养箱中培养,24 h,使其均匀生长,充满平板。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第24页,考点,51,(3),为了检测该致病菌对于抗生素敏感性,将分别含有,A,、,B,、,C,、,D,四种抗生素滤纸片均匀置于该平板上不一样位置,培养一段时间后,含,A,滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌反抗生素,A,;,含,B,滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌反抗生素,B,;,含,C,滤纸片周围透明圈比含,A,小,说明,;,含,D,滤纸片周围透明圈也比含,A,小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染情况下,此菌落很可能是抗生素,D,。,(4),依据上述试验结果,为到达抗菌目标,最好应选取抗生素,。,【答案】,(1),划线稀释涂布,(,或涂布,),(2),涂布,(3),敏感不敏感该致病菌对,C,敏感性比对,A,弱耐药菌,(4)A,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第25页,考点,51,【解析】,(1),为了取得样本中致病菌单菌落,可用稀释涂布平板法或平板划线法将样本接种到固体培养基表面,再经选择、判别等步骤取得。,(2),欲让菌落均匀生长,充满平板,应将单菌落稀释后再用稀释涂布平板法将菌种接到培养基表面。,(3),在长满菌落平板上,含抗生素,A,滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌反抗生素,A,敏感,;,含,B,滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌反抗生素,B,不敏感,;,含,C,滤纸片周围透明圈比含,A,小,说明该致病菌反抗生素,C,敏感性弱于反抗生素,A,敏感性。含,D,滤纸片周围透明圈也比含,A,小,且透明圈中出现了一个菌落,如不考虑其它杂菌污染情况,此菌落很可能是抗生素,D,耐药菌。,(4),依据以上结果,选取抗生素,A,效果最好。,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第26页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(,课标全国,39,15,分,较低难度,),空气中微生物在重力等作用下,能够一定程度地沉降。某研究小组欲用平板搜集教室空气中微生物,以了解教室内不一样高度空气中微生物分布情况。试验步骤以下,:,配制培养基,(,成份,:,牛肉膏、蛋白胨、,NaCl,、,X,、,H,2,O);,制作无菌平板,;,设置空白对照组和若干试验组,进行相关操作,;,将各组平板置于,37,恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落平均数。,回答以下问题。,第27页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(1),该培养基中微生物所需氮起源于,。若要完成步骤,该培养基中成份,X,通常是,。,(2),步骤,中,试验组操作是,。,(3),若在某次调查中,某一试验组平板上菌落平均数为,36,个,/,平板,而空白对照组一个平板上出现了,6,个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了,现象。若将,30(,即,36-6),个,/,平板作为本组菌落数平均值,该做法,(,填,“,正确,”,或,“,不正确,”),。,第28页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【解析】,本题考查微生物培养。解题切入点是微生物培养基成份和制作及菌落计数。,(1),培养基中牛肉膏、蛋白胨为微生物生长既提供了碳源也提供了氮源。微生物培养所采取培养基是固体培养基,故题中,X,应是琼脂,在培养基中起凝固剂作用。,(2),本试验是为了了解教室不一样高度空气中微生物分布情况,所以应选择不一样高度放置平板,并使之暴露在空气中一段时间,以利于空气中微生物沉附在平板上。,(3),空白对照试验设计是不暴露在空气中,不应出现菌落。产生了菌落说明在此次试验中平板被污染。用试验组获取菌落平均值减去污染产生菌落数,作为试验结果,这种做法不正确,应在预防污染情况下重新试验,以取得较准确数据。,第29页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【答案】,(1),牛肉膏、蛋白胨琼脂,(2),将各试验组平板分别放置在教室不一样高度位置上,开盖暴露一段时间,(3),污染不正确,第30页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第31页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,1,.,微生物分离和培养,(1),微生物培养基,培养基成份,第32页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第33页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,培养基对微生物选择作用,第34页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,培养基制备,:,计算,称量,溶化,灭菌,倒平板。,第35页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(2),微生物纯化培养方法,第36页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第37页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,2,.,微生物筛选与计数,(1),微生物筛选,第38页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(2),微生物计数,显微镜直接计数法,a.,原理,:,利用特定细菌计数板或,血细胞计数板,在显微镜下计算,一定容积,样品中,微生物数量,。,b.,方法,:,用计数板计数。,c.,缺点,:,不能区分死菌与活菌。,间接计数法,(,活菌计数法,),a.,原理,:,当样品,稀释度,足够高时,培养基表面生长一个菌落,起源于样品稀释液中一个活菌。经过统计平板上菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。第39页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,b.,计算公式,:,每克样品中菌株数,=,(,C,V,),M,其中,C,代表某一稀释度下平板上生长平均菌落数,V,代表涂布平板时所用稀释液体积,(mL),M,代表稀释倍数。,c.,试验操作,:,将待测样品经一系列,10,倍稀释,然后选择三个稀释度菌液,分别取,0.1 mL,接种到已制备好平板上,然后用无菌涂布器将菌液涂布于整个平板表面,放在适宜温度下培养,计算菌落数。,d.,试验误差及原因,:,利用稀释涂布平板法统计菌落数往往比活菌实际数低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到菌落只是一个菌落。,第40页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,3,.,利用微生物发酵来生产特定产物及在其它方面应用,(1),果酒和果醋制作,原理,a.,果酒制作依靠,酵母菌,它属于,兼性厌氧,微生物。在有氧条件下,进行有氧呼吸,大量繁殖,;,在无氧条件下,进行,酒精发酵,(,或无氧呼吸,),。,b.,果醋制作需要,醋酸菌,醋酸菌是一个,好氧,细菌,当氧气、糖源都充分时,醋酸菌可将葡萄汁中糖分解成醋酸,;,当缺乏糖源时,醋酸菌将,乙醇,变为乙醛,再将乙醛变为,醋酸,。,流程,第41页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,注意事项,a.,材料选择与处理,选择新鲜葡萄,榨汁前先冲洗后去枝梗,以防葡萄汁流失及污染。,b.,预防发酵液被污染,.,榨汁机要清洗洁净并晾干。,.,发酵瓶要洗净并用体积分数为,70%,酒精消毒。,.,装入葡萄汁后要封闭充气口。,c.,发酵条件控制,葡萄汁装入发酵瓶时,要留约,1/3,空间,目标是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖,耗尽,O,2,后再进行酒精发酵,;,预防发酵过程中因产生,CO,2,而造成发酵液溢出。,第42页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(2),腐乳制作,原理,a.,腐乳发酵在各种微生物协同作用下进行,其中起主要作用是,毛霉,它是一个丝状真菌,新陈代谢类型是,异养需氧型,。,b.,毛霉等微生物产生蛋白酶能够将豆腐中蛋白质分解成小分子,肽,和,氨基酸,脂肪酶,能够将脂肪水解成甘油和脂肪酸。,流程,让豆腐上长出毛霉直接接种或利用空气中毛霉孢子,第43页,密封腌制,用酒精灯对瓶口灭菌后密封,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,第44页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,注意事项,a.,注意盐用量,:,以豆腐块与盐质量比为,5,1,最适当。瓶口表面铺盐是为了预防杂菌从瓶口进入。,b.,配制卤汤时酒量控制,:,加酒目标之一是杀死微生物。普通应控制在,12%,左右。,c.,豆腐含水量以,70%,为宜,:,毛霉为异养需氧型真菌,若含水量过高,影响毛霉有氧呼吸,;,若含水量过少,则不利于毛霉生长。,d.,预防杂菌污染,:,所用器械要沸水消毒,加入卤汤和辅料后,将瓶口用酒精灯灭菌后再密封。,e.,控制适宜温度,:,毛霉最适生长温度为,1518,。,第45页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(3),泡菜制作,原理,乳酸菌是,厌氧细菌,无氧条件下能将葡萄糖分解为,乳酸,。反应式,:C,6,H,12,O,6,2C,3,H,6,O,3,。,流程,第46页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,注意事项,a.,材料选择及用量,.,蔬菜应新鲜,放置时间过长,亚硝酸盐含量增多。,.,清水和盐质量比为4,1,盐水要煮沸后冷却。,b.,预防杂菌污染,每次取样用具要洗净,要快速封口。,c.O,2,需求,泡菜坛要选择透气性差容器,坛盖边缘水槽内注满水,在发酵过程中经常补水,以创造无氧环境,有利于乳酸菌发酵,预防蔬菜腐烂。,d.,温度,发酵过程温度控制在室温即可。温度过高易滋生杂菌,温度过低会使发酵时间延长。,第47页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,典例导引,(,湖北荆门模拟,39),牛奶是微生物生长良好培养基。生鲜牛奶中微生物情况反应了奶牛健康情况,也影响奶制品运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量改变情况,进行以下列图所表示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸收,1 mL,生牛奶稀释液至盛有,9 mL,无菌水试管中,混合均匀,如此再重复,2,次。请回答以下相关问题。,第48页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(1),巴氏消毒方法是,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒好处是,。,(2),图中所表示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。要计数,0.1 mL,最终牛奶稀释液中活菌数量,应选择工具是上图中,;,利用这种方法统计结果往往较实际值偏小,原因是,。,(3),消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后牛奶中细菌数量,则在操作步骤上应做什么改动,?,。,(4),从生牛奶取样培养得到菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌方法是在培养基中加入,菌落含有,特征能够认定为大肠杆菌。,第49页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【解析】,(1),巴氏消毒法是一个利用较低温度既可杀死病菌又能保持物品中营养物质风味不变消毒法,用于牛奶消毒时常在,7075,条件下煮,30,min,或,80,条件下煮,15,min;,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒好处是在杀死病菌同时不破坏牛奶营养成份。,(2),稀释培养法惯用工具是涂布器,(,图中,B);,因为培养基表面个别菌落可能是由,2,个或多个细菌连在一起形成,所以,利用稀释涂布平板法统计结果往往较实际值偏小。,(3),消毒后牛奶中活细菌数量少于生鲜奶中活菌数,为确保在每个平板上形成菌落数在,30300,之间,接种前应降低稀释次数。,(4),大肠杆菌在伊红美蓝培养基上会形成带有特殊金属光泽黑色菌落,试验室惯用伊红美蓝检测大肠杆菌存在。,第50页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【答案】,(1)7075,煮,30 min(80,煮,15 min),牛奶营养成份不被破坏,(2)B,个别菌落可能是由,2,个或多个细菌形成,(3),稀释次数降低,(4),伊红美蓝,(,金属光泽紫,),黑色,第51页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,高招,比较消毒与灭菌,第52页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,1,.(,陕西宝鸡模拟,37),在调查和分离湖水中耐盐细菌试验中,先将,10,升湖水水样浓缩至,10,毫升,然后各取浓缩水样,1,毫升,涂布到多个培养皿中培养。请回答以下问题。,(1),能够经过提升培养基中,浓度,筛选被调查细菌,这种培养基被称为,培养基。,(2),要提升试验结果可靠性,排除培养基未彻底灭菌可能性,应该设置对照组是,。为检验,(1),中筛选方法效果,能够设置对照组是,。,(3),在微生物培养过程中,试验室对培养基灭菌惯用方法是,。为预防冷凝水影响细菌生长,需将培养皿,培养。在培养基上产生单个菌落在生态学中能够被称为,。,(4),依据培养皿上菌落平均数能够计算湖水中该种细菌密度,但计算数据要比实际活菌数目少,原因是,。,第53页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【答案】,(1),盐选择,(2),未接种培养皿未加高浓度盐培养基培养,(3),高压蒸汽灭菌倒置种群,(4),当两个或多个细胞连在一起时在平板上观察到是一个菌落,第54页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【解析】,(1),要选择耐盐菌种,能够经过提升培养基中盐浓度进行筛选被调查细菌,这种培养基被称为选择培养基。,(2),要提升试验结果可靠性,排除培养基未彻底灭菌可能性,应该设置对照组是不接种空白培养基一样培养。为检验,(1),中筛选方法效果,能够设置对照组是未加高浓度盐培养基进行培养。,(3),在微生物培养过程中,试验室惯用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌。为预防冷凝水影响细菌生长,需将培养皿倒置培养。在培养基上产生单个菌落是同一个细菌经分裂形成群体,属于种群。,(4),依据培养皿上菌落平均数能够计算湖水中该种细菌密度,但计算数据要比实际活菌数目少,原因是当两个或多个细胞连在一起时在平板上只能形成一个菌落。,第55页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,2,.(,甘肃兰州模拟,37),普通酵母菌直接利用淀粉能力很弱,有些人将地衣芽孢杆菌,-,淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉工程酵母菌菌种,(,过程如图,1,所表示,),。,图,1,(1),图,1,中,为到达筛选目标,平板内固体培养基应以,作为唯一碳源。,过程需重复几次,目标,。,第56页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(2),某同学尝试过程,操作,其中一个平板经培养后菌落分布如图,2,所表示。该同学接种方法是,;,依据平板菌落分布情况,请分析该同学存在操作失误,。经过统计平板上菌落数,能推测出样品中大约含有多少活菌,为了确保结果准确,普通选择菌落数在,平板进行计数。用此接种方法统计菌落数往往比活菌实际数目,原因是,。,第57页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(3),以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同适宜条件下密闭发酵,工程酵母菌发酵罐需要先排气,其原因是,。,(4),上述工程酵母菌培养过程中,相关操作正确是,。,A.,玻璃刮刀用火焰灼烧进行灭菌,B.,培养基分装到培养皿后进行灭菌,C.,倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行,D.,取得菌种假如需要保留,可置于,37,恒温保留,【答案】,(1),淀粉筛选出真正高效利用淀粉工程酵母菌菌种,(2),稀释涂布平板法涂布不均匀,30300,低当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到只有一个菌落,(3),工程酵母菌利用淀粉速度很快,发酵产生,CO,2,速度也很快,(,其它合理答案也可,),(4)C,第58页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【解析】,(1),为筛选高效利用淀粉工程酵母菌菌种,所以培养基只加入淀粉作为唯一碳源。,过程重复进行目标是筛选高效利用淀粉工程酵母菌菌种。,(2),图,2,中分布单个菌落,是经过稀释涂布法取得,但因为涂布不均匀,造成菌落分布不均匀。为了确保结果准确,通常选择菌落数在,30300,之间平板计数。实际操作中,因为当两个或多个细胞连在一起时,观察到只是一个菌落,造成计数比实际值偏少。,(3),该工程酵母菌可高效利用淀粉,发酵速率快,产生,CO,2,多,造成先排气。,(4),玻璃刮刀可采取干热灭菌或高压蒸汽灭菌,A,项错误,;,培养基先灭菌,后分装,B,项错误,;,倒平板和取菌液时应在酒精灯火焰旁进行,C,项正确,;,菌种应在,4,暂时保留或,-20,长久保留,D,项错误。,第59页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,3,.(,山东青岛二模,37),金黄色葡萄球菌是一个高度耐盐性微生物,可引发人类肺炎、肠炎等疾病。不法作坊腌制腊肉,往往轻易滋生金黄色葡萄球菌等细菌。检测人员将,3 g,腊肉研磨后离心处理,取得,5 mL,提取液,用于细菌分离。请回答以下问题。,(1),从该提取液中轻易分离取得耐盐细菌,是因为含盐量高腊肉对细菌起到了,作用。细菌与酵母菌比较,其结构上主要特点是,。,(2),检测人员将提取液稀释一定倍数,涂布到合格平板上培养。一段时间后进行观察,初步判断检测样品中含有各种细菌,他们判断依据是平板上长出了,。,第60页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(3),检测人员欲初步判定上述平板上某菌落是否是金黄色葡萄球菌,请帮助完善判定方案,(,已知金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围红细胞,形成透明溶血圈,),。,a.,制作血平板,:,在培养基中添加适量去菌脱纤维羊血,制成血平板。,b.,接种操作,:,试验组,:,用接种环,。,对照组,:,血平板上不接种任何微生物。c.,结果分析,:,若,说明所判定菌落是金黄色葡萄球菌。,(4),细菌培养过程中取得纯净培养物关键是,。为防止,使用后培养基丢弃前一定要进行灭菌处理。,第61页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【答案】,(1),选择无成形细胞核,(2),不一样特征菌落,(3),挑取该菌落划线接种到血平板上试验组血平板上出现透明溶血圈,(4),预防外来杂菌入侵污染环境,第62页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【解析】,(1),腌制腊肉中含有,高浓度食盐,所以从该提取液中轻易分离取得耐盐细菌。细菌属于原核生物,与酵母菌比较,其结构上主要特点是无成形细胞核。,(2),可依据不一样,菌落特征,不一样来判断检测样品中含有各种细菌。,(3),判定某菌落是否是金黄色葡萄球菌能够先在培养基中添加适量去菌脱纤维羊血,制成血平板,;,然后进行接种操作,试验组用接种环挑取该菌落划线接种到血平板上。对照组则是血平板上不接种任何微生物。若试验组血平板上出现透明溶血圈,则说明所判定菌落是金黄色葡萄球菌。,(4),细菌培养过程要严格执行,无菌操作,。取得纯净培养物关键是预防外来杂菌入侵。为防止污染环境,使用后培养基丢弃前一定要进行灭菌处理。,第63页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,4,.(,山东淄博二模,37),淀粉酶是用途最广、产量最大酶制剂之一,广泛用于印染、酿造和医药行业。请回答以下问题。,(1),配制筛选能分泌淀粉酶微生物培养基时,应以,为唯一碳源。取得菌种长久保留方法是,。,(2),从面粉加工厂附近土壤中,取,5 g,土壤倒入装有,45 mL,蒸馏水并带有玻璃珠锥形瓶中振荡,制成土壤悬液。将土壤悬液稀释,10,5,倍后,用,法分别将,0.1 mL,菌液接种到,3,个平板上,培养一段时间,3,个平板中菌落数分别为,53,个、,60,个、,73,个,则土壤悬液中分泌淀粉酶微生物有,个,/mL,。,第64页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,(3),在培养基中加入碘化钾后,出现透明圈菌落能分泌淀粉酶,原理是,。普通情况下,透明圈直径,(D),和菌落直径,(d),比值,(D/d),反应了淀粉酶活性,它们关系是,。,(4),筛选取得微生物,经判定是芽孢杆菌,芽孢杆菌除产生活性较强淀粉酶外,还产生活性较强蛋白酶和脂肪酶,所以,在动物饲料中添加芽孢杆菌或其代谢产物可提升动物,效率。试验结束后,使用过培养基需经,处理后才能倒掉。,【答案】,(1),淀粉甘油管藏,(2),稀释涂布平板,6.210,7,(3),淀粉遇碘化钾变蓝,淀粉酶分解淀粉后出现透明圈,D/d,值越大,淀粉酶活性越高,(4),对营养物质消化吸收灭菌,第65页,考点,51,试做真题,高手必备,萃取高招,对点精练,透析真题,【解析】,(1),因为筛选是,能分泌淀粉酶,微生物,故培养基中唯一碳源是淀粉,;,菌种长久保留方法是甘油管藏。,(2),依据题干信息,最终统计是菌落数,故将悬液接种到平板上用方法是稀释涂布平板法,;,平板上平均菌落数为,62,1,mL,悬液中微生物数量为,62,0.110,5,=6.210,7,。,(3),淀粉遇碘化钾,变蓝,微生物分泌淀粉酶后将培养基中淀粉分解掉,加入碘化钾后不会出现蓝色,即出现透明圈,;,透明圈越大说明淀粉酶活性越强,即,D/d,比值越大说明淀粉酶活性越大。,(4),饲料中加入芽孢杆菌相当于加入了淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶,有利于动物对营养物质消化和吸收,;,试验结束后使用过培养