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实验-肠道致病菌的分离鉴定.ppt

1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,Content,示教:,主要肠道杆菌,大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌及变形杆菌的形态、染色性,主要肠道杆菌的培养特性:SS平板/EMB平板,主要肠道杆菌的生化反应:双糖、尿素分解反应,操作:,肥达反应,粪便肠道致病菌的分离和鉴定血清学,(,*,续,),录像:,厌氧菌,肠道杆菌的分类,肠杆菌科,志贺菌属,埃希菌属,沙门菌属,克雷伯菌属,变形杆菌属,ETEC,EIEC,EPEC,EHEC,EAEC,痢疾、福氏、鲍氏、宋内,伤寒,副伤寒,猪霍乱,肠炎,肠道杆菌的基本特征,形态结构相似,培养要求不高,生化反应活跃,抗

2、原结构复杂,抵抗力不强,易发生变异,双糖管,发酵乳糖,H,2,S试验,发酵葡萄糖(产酸产气)及动力,上层:乳糖,Fe,2+,固体,下层:葡萄糖,半固体,指示剂:酚红(pH6.8-8.4,黄 红),致病菌红色,非致病菌黄色,观察:,乳糖 葡萄糖 动力 硫化氢,尿素酶,大肠埃希菌,+,痢疾志贺菌,+,伤寒沙门菌,+/,副伤寒杆菌,+,变形杆菌,+,红色,黄色,双糖管结果观察,黄色,黄色,可疑肠道致病菌,大肠埃希菌,双糖管接种方法,穿刺斜面接种法,肥达试验,原理:,伤寒沙门菌菌体O 抗原,伤寒沙门菌鞭毛抗原,甲型副伤寒沙门菌鞭毛H抗原,肖氏沙门菌鞭毛抗原,已知抗原,病人血清中的未知抗体,凝集,肥达试

3、验,操作:,病人,血清,生理盐水,微量板,1,2,3,4,5,6,7,8,伤寒,O,0.2ml,0.2ml,伤寒,H,0.2ml,0.2ml,副甲,H,0.2ml,0.2ml,肖氏H,0.2ml,0.2ml,1:20,1:40,1:80,1:160,1:320,1:640,1:1280,生理盐水,混匀,Ag加样方向,抗原,肥达试验结果分析(1),凝集程度:,()上层液澄清,细菌全部凝集于孔底,()上层液基本透明,细菌大部分(75)凝集于孔底,()上层液半透明,细菌在孔底有明显凝集,()上层液混浊,孔底有少量凝集,()不凝集,同于对照,书写报告,:,反应的最高稀释度为凝集效价,肥达试验结果分析(2),凝集效价,:伤寒沙门菌O,1:80,H,1:160,副伤寒沙门菌H,1:80,动态观察:双份血清,效价,4倍,O与H抗体的诊断意义:,OIgM,HIgG,O、H抗体均高:肠热症,O、H抗体均低:未患病,O抗体不高,H抗体高:回忆反应,预防接种,O抗体高,H抗体不高:感染早期,交叉反应,上次实验结果观察:,脓汁标本中的两种菌落:,黄色,完全溶血,白色,不溶血,接种甘露醇发酵管,革兰染色,观察是否发酵甘露醇,The End,Thanks,

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