1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,一、实验目的和要求,茶多酚是茶叶的主要成分，近年来研究表明，它具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用。是一类多酚类化学物质，由,30,多种酚类物质组成，,在本实验中通过茶多酚的提取，比较微波萃取和普通萃取两种方法萃取茶多酚的效果，了解微波萃取的原理和方法。,二、实验原理,茶多酚为淡黄至褐色略带茶香的水溶液、灰白色粉状固体或结晶，味涩。易溶于水、乙醇、乙酸乙酯，对热、酸较稳定，传统工艺是采用热水浸提的方法可以提取茶多酚。,微波萃取的机制包括两个方面,:,高频电磁波穿透萃取介质，细胞内部温度迅速上升，细胞破裂，
2、细胞内有效成分被释放并被萃取介质溶解。,微波所产生的电磁波加速了被萃取组分向萃取溶剂界面的扩散速率。,三、实验器材与试剂,1,器材：微波炉，电子台秤，水喷射式真空泵，布氏漏斗，抽滤瓶，研钵，烧杯和量筒等。,2,试剂：茶叶，纯净水等。,将萃取后的固液混合物倒入放有滤纸的布氏漏斗里，开真空泵抽滤，收集滤液，弃去固体残渣。,（推荐,:,也可放入离心管中离心，,6000r/min,，,5min,）,用量筒量滤液体积,，并用下述的分析方法测定茶多酚含量。按下式计算茶多酚的提取收率,:,茶多酚提取收率,=,式中,:,茶多酚含量,(mg/ml),V,滤液的体积,(ml),m,萃取时所用的茶叶总质量,(mg)
3、3,普通热水萃取,称取同样,0.5 g,粉碎后的茶叶末，加入,50 ml,水，放入烧杯内，,80,水浴加热浸取，立刻计时，萃取时间分别为,10,、,20,、,40 min,。将萃取后的固液混合物,离心分离,，除去固体残渣。,量滤液体积，,并测定滤液中茶多酚含量，按上述公式计算萃取收率。,五 酒石酸亚铁分光光度法测定茶多酚含量,分别吸取,0,、,1.0,、,2.0,、,3.0,、,4.0,、,5.0ml,的,0.2g/l,儿茶酚标准液于一系列,20 ml,的刻度试管,中，加入蒸馏水,4ml,，再加入酒石酸亚铁溶液,5ml,，用,pH,为,7.5,的磷酸缓冲溶液稀释至,20 ml,刻度，摇匀，用
4、分光光度计,(,可见光,),在,540 nm,波长处，,1cm,比色皿，分别测定吸光度。,1,标准曲线的测定,试管编号,0,1,2,3,4,5,0.2g/l,茶多酚（,mL,）,0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,蒸馏水（,mL,）,4,4,4,4,4,4,酒石酸亚铁溶液,(ml),5,5,5,5,5,5,茶多酚,绝对量,(mg),0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,吸光度,A,以容量瓶中茶多酚的绝对量,(mg),为横坐标，吸光度,A,为纵坐标，绘制标准曲线。作线性回归。,标准曲线的测定,2,样品测定,吸取,1ml,的稀释后的样品液于,20ml,的刻度试管,中，加入,4ml,蒸
5、馏水，再加入酒石酸亚铁溶液,5 ml,，用,pH,为,7.5,的磷酸缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，在,540 nm,波长处，用,1cm,比色皿比色，空白参比液同标准曲线，测量吸光度,A,。根据标准曲线，算出茶多酚绝对量,(mg),，然后求得茶多酚的含量,(mg/ml),。,(,参考,:,稀释四倍,),六、实验结果和分析,萃取方法,热水提取,微波萃取,萃取时间（,min,）,1,2,3,10,20,40,茶叶用量（,g,）,稀释倍数,滤液的体积,(,ml,),吸光度,茶多酚含量（,mg/ml,）,提取效率,数据记录表,2,结果分析,分别计算出微波萃取和热水萃取中萃取时间对茶多酚含量和萃取收率并作图，比较其萃取效果的差异。,根据分析结果，根据萃取收率，比较微波萃取和常规热水萃取效果的差异，确定适宜的萃取时间。,
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