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1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,主要内容,一、微生物的简单概述,二、微生物检验中的常见技术,三、常见临床标本的基本检验程序,四、总结,微生物的简单概述,微生物的分类,1、原核细胞型微生物(仅有原始核缺乏细胞器):细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体,2、真核细胞型微生物(有典型的核结构和细胞器):真菌、原虫,3、非细胞型微生物(由DNA或RNA和蛋白质外壳组成):病毒、朊粒,微生物的简单概述,微生物的作用,绝大多微生物对人类和动植物是有益的,

2、有些还是必不可少的。寄居在人体的微生物可以分为三类:,1、正常菌群:不但无害,还可以帮助人体拮抗某些病原微生物和提供营养。,2、条件致病菌:菌群失调、机体抵抗力下降、寄居部位的改变或失调则引起致病。现抗生素的滥用使其越来越体现出致病性。,3、病原微生物:引起人类和动、植物致病的微生物,是医学微生物研究的主体。,微生物检验中的常见技术,革兰阳性,革兰阴性,微生物检验中的常见技术,抗酸染色,微生物检验中的常见技术,细菌的培养技术,1、需氧培养:接种在平板或液体培养基上,置于35温箱孵育18-24小时。,2、二氧化碳培养:5%-10%的CO2环境中生长良好,如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等。,3、厌氧培

3、养:专性厌氧菌的培养。,微生物检验中的常见技术,细菌的分离技术,1、分离培养基:,麦康凯平板,中等强度选择培养基,可以选择出大部分的革兰阴性菌。,SS琼脂平板,强选择性,用于志贺菌和沙门菌的分离。,碱性琼脂平板,霍乱弧菌的分离培养基。,2、分区划线:适用于杂菌较多的标本。每画完一个区,将接种环灭菌一次,使菌落量逐渐减少,以获得单个菌落。,微生物检验中的常见技术,分区划线得到单个菌落,微生物检验中的常见技术,细菌的生长现象,1、菌落的特征:大小、形状、突起、颜色、表面、透明度、黏度。,2、血平板上的溶血,溶血:菌落周围血培养基变成绿色环状。,溶血:菌落周围形成一个完全透明的环。,溶血:菌落周围的

4、培养基没有变化。,3、半固体培养基中的生长现象;主要观察动力(不动杆菌、志贺菌为阴性),细菌的生长现象,发酵乳糖(红色),细菌的生长现象,铜绿假单胞菌 不规则 绿色色素,细菌的生长现象,变形杆菌,迁徙生长,细菌的生长现象,肺炎克雷伯 拉丝现象,细菌的生长现象,粘液型绿脓,细菌的生长现象,溶血,溶血,微生物检验中的常见技术,细菌的生物化学试验,1、氧化-发酵实验(O/F试验),主要用于发酵与非发酵之间的鉴别。,2、七叶苷水解试验,D群链球菌(阳性)与其他链球菌的鉴别。,3、苯丙氨酸试验,变形杆菌、普罗威登斯菌和摩根菌属(阳性)与其他肠杆菌的鉴别。,4、氧化酶实验,非发酵菌阳性(与试剂接触10s内

5、变成紫色),不动杆菌较为特殊(阴性)。,5、触酶实验(H2O2),葡萄球菌阳性,肠/链球菌阴性。,微生物检验中的常见技术,6、靛基质、甲基红、VP试验、枸橼酸盐(IMViC):大肠埃希菌(+-)、产气肠杆菌(-+),7、动力、靛基质、尿素分解试验(MIU)、KIA、胆汁溶解试验、血浆凝固酶试验、杆菌肽试验等都非常重要。,微生物检验中的常见技术,IMViC(+-),IMViC(-+),微生物检验中的常见技术,血清学试验,1,、血清学鉴定:用含已知特异性抗体的免疫血清去检测患者标本中或培养物中的未知细菌及细菌抗原,以确定病原菌的种或型,(,荚膜肿胀试验、制动试验)。,2、血清学诊断:用已知的抗原检

6、测病人血清中的相应抗体(肥达试验、外斐试验)。,微生物检验中的常见技术,细菌检验的商品化、自动化,全自动的血液培养系统和微生物鉴定,/,药敏系统大大的减少了工作量,提高了工作效率,使其微量化、标准化以及结果的准确度和溯源性。但在工作中应做好仪器的保养、维护和校正工作,坚持做好室内、间质控!,微生物检验中的常见技术,鉴定,+,药敏试剂板条,临床标本细菌学检验基本程序,采集标本(保存、运送),观察、前处理(标本是否合格),直接涂片 快速检验 增菌培养(需氧、厌氧、,二氧化碳),报告 报告,分离培养(需氧、厌氧、,二氧化碳),可疑菌落(分纯培养),涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验,报告,本科室检验程序,接种标本,革兰阴性杆菌 转种(分纯)革兰阳性球菌,OF(+)OF(-)OF(+),OX(-)OX(+),H2O2(+)H2O2(-),OX(-)OX(+),肠杆菌 非发酵菌 弧菌 葡萄球菌 肠/链球菌,少见,临床标本中的常见病原菌,总 结,微生物检验是临床检验的重要组成部分,主要的任务:研究感染性疾病的病原体特征;提供快速、准确的病原学诊断;指导临床合理使用抗生素;对医院感染进行监控。同时希望大家时时做到“有菌观念,无菌操作”,以此保护好自己也同样保护好了病人。,谢 谢,祝大家实习愉快,

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