高考生物复习第十一单元现代生物科技专题11.1基因工程全国公开课一等奖百校联赛示范课赛课特等奖.pptx

第,*,页,返回导航,生物,考点研析,课堂归纳,随堂演练,课时规范训练,第1页,第2页,第,1,讲基因工程,第3页,考纲要求,全国课标卷五年考频统计,高考预期,1.基因工程诞生,2.基因工程原理及技术(含PCR),3.基因工程应用,4.蛋白质工程,，T40；，T40(1)(2),全国，T40,全国，T40；全国，T40,全国乙，T40；全国丙，T40,基因工程原理、操作步骤，,在农业、工业、医学等方面应用,第4页,考点,1,基因工程操作工具,1,限制酶,(1),存在：,_,中。,(2),作用：,_,，并使每一条链中特定部位两个核苷酸之间,_,断开。,答案：,1.(1),原核生物,(2),识别双链,DNA,分子某种特定核苷酸序列磷酸二酯键,第5页,答案：,(3),黏性末端平末端,第6页,2,DNA,连接酶,(1),作用：将双链,DNA,片段,“,缝合,”,起来，恢复被限制酶切开两个核苷酸之间磷酸二酯键。,(2),种类,E,coli,DNA,连接酶,T,4,DNA,连接酶,起源,_,_,特点,只,“,缝合,”,_,末端,黏性末端和平末端都可,“,缝合,”,答案：,2,(2),大肠杆菌,T,4,噬菌体黏性,第7页,3.,载体,(1),条件：能在受体细胞中复制并稳定保留；含有一至多个限制酶切点；含有标识基因。,答案：,3,(2),质粒,噬菌体衍生物,(3),携带外源,DNA,片段进入受体细胞,第8页,注意：,(1),基因工程中有,3,种工具，但工具酶只有,2,种。,(2),限制酶含有特异性，即一个限制酶只能识别特定碱基序列，并在特定位点上进行切割；限制酶不切割本身,DNA,原因是原核生物中不存在该酶识别序列或识别序列已经被修饰。,(3),限制酶、,DNA,连接酶、,DNA,聚合酶等相关酶分析比较,名称,作用部位,作用底物,形成产物,限制酶,磷酸二酯键,DNA,分子,带黏性末端或平末端DNA片段,DNA,连接酶,磷酸二酯键,DNA,片段,重组,DNA,分子,第9页,DNA,聚合酶,磷酸二酯键,脱氧核苷酸,子代,DNA,分子,热稳定,DNA,聚合酶,磷酸二酯键,脱氧核苷酸,子代,DNA,分子,DNA(,水解,),酶,磷酸二酯键,DNA,分子,游离脱氧核苷酸,解旋酶,碱基对间氢键,DNA,分子,脱氧核苷酸长链,RNA,聚合酶,磷酸二酯键,核糖核苷酸,单链,RNA,分子,第10页,题组精练,1,图,1,表示含有目标基因,D,DNA,片段长度,(bp,即碱基对,),和部分碱基序列，图,2,表示一个质粒结构和部分碱基序列。现有,Msp,、,Bam,H,、,Mbo,、,Sma,4,种限制性核酸内切酶，它们识别碱基序列和酶切位点分别为,C,CGG,、,G,GATCC,、,GATC,、,CCC,GGG,。请回答以下问题。,第11页,第12页,(1),图,1,一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由,_,连接。,(2),若用限制酶,Sma,完全切割图,1,中,DNA,片段，产生末端是,_,末端，其产物长度为,_,。,(3),若图,1,中虚线方框内碱基对被,TA,碱基对替换，那么基因,D,就突变为基因,d,。从杂合子中分离出图,1,及其对应,DNA,片段，用限制酶,Sma,完全切割，产物中共有,_,种不一样长度,DNA,片段。,第13页,(4),若将图,2,中质粒和目标基因,D,经过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选取限制酶是,_,。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒大肠杆菌，普通需要用添加,_,培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒大肠杆菌菌株中目标基因D,不能正确表示，其最可能原因是,_,。,第14页,解析：,(1),题干中强调,“,一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基,”,，可经过画出,DNA,结构示意图处理。,(2),Sma,识别并切割序列为,CCC,GGG,，所以产生末端为平末端，经,Sma,切割后，,DNA,片段会形成三个小,DNA,片段，按切割位点算分别是：,534,3,537(bp),；,796,3,3,790(bp),；,658,3,661(bp),。,(3),用,Sma,切割基因,D,，会形成,537 bp,、,790bp,、,661 bp,三种类型。题图,1,中虚线方框内,CG,被,TA,替换，失去了一个酶切位点，则会被切割成534,796,3,1 327(bp),和,658,3,661(bp),两种类型。所以一共会得到,537 bp,、,790 bp,、,第15页,1 327 bp,、,661 bp 4,种类型片段。,(4),依据基因,D,和质粒核苷酸序列可知，可选取,Bam,H,和,Mbo,进行切割，但,Mbo,会破坏掉两种抗生素抗性基因，所以只能用,Bam,H,进行切割。,答案：,(1),脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖,(2),平,537 bp,、,790 bp,、,661 bp,(3)4,(4),Bam,H,抗生素,B,同种限制酶切割形成末端相同，部分目标基因,D,与质粒反向连接,第16页,2,下表是几个限制酶识别序列及其切割位点，图,1,、图,2,中标注了相关限制酶酶切位点，其中切割位点相同酶不重复标注。请回答以下问题：,第17页,第18页,(1),用图中质粒和目标基因构建重组质粒，应选取,_,两种限制酶切割，酶切后载体和目标基因片段，经过,_,酶作用后取得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于,_,态大肠杆菌。,(2),为了筛选出转入了重组质粒大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加,_,，平板上长出菌落，惯用,PCR,判定，所用引物组成为图,2,中,_,。,(3),若,BamH,酶切,DNA,末端与,Bcl,酶切,DNA,末端连接，连接部位,6,个碱基对序列为,_,，对于该部位，这两种酶,_(,填“都能”、“都不能”或“只有一个能”,),切开。,第19页,(4),若用,Sau3A,切图,1,质粒最多可能取得,_,种大小不一样,DNA,片段。,解析：,(1),选择限制酶应在目标基因两端且在质粒中存在识别位点，故能够用来切割限制酶为,Bcl,、,Hind,、,BamH,和,Sau3A,，但因为,BamH,和,Sau3A,可能使质粒中开启子丢失或破坏抗性基因，所以应选取,Bcl,、,Hind,两种限制酶切割。酶切后载体和目标基因片段，经过,DNA,连接酶作用后取得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入感受态大肠杆菌中，使其增殖。,(2),依据质粒上抗性基因，,第20页,为了筛选出转入了重组质粒大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加四环素。平板上长出菌落，惯用,PCR,判定，目标基因,DNA,受热变性后解链为单链，引物需要与单链两端对应互补序列结合，故所用引物组成是图,2,中引物甲和引物丙。,(3),若,BamH,酶切,DNA,末端和,Bcl,酶切,DNA,末端连接，连接部位,6,个碱基对序列为,第21页,(4),依据,Bcl,、,BamH,和,Sau3A,酶切位点，,Sau3A,在质粒上有三个酶切位点，完全酶切可得到记为,A,、,B,、,C,三种片段，若部分位点被切开，可得到,AB,、,AC,、,BC,、,ABC,四种片段，所以用,Sau3A,切质粒最多可能取得,7,种大小不一样,DNA,片段。,第22页,答案：,(1)Bcl,和,Hind,DNA,连接感受,(2),四环素引物甲和引物丙,第23页,1,确定限制酶种类,第24页,(1),依据目标基因两端限制酶切点确定限制酶种类,应选择切点位于目标基因两端限制酶，如图甲可选择,Pst,。,不能选择切点位于目标基因内部限制酶，如图甲不能选择,Sma,。,为防止目标基因和质粒本身环化和随意连接，也可使用不一样限制酶切割目标基因和质粒，如图甲也可选择用,Pst,和,Eco,R,两种限制酶,(,但要确保质粒上也有这两种酶切点,),。,第25页,(2),依据质粒特点确定限制酶种类,所选限制酶要与切割目标基因限制酶相一致，以确保含有相同黏性末端。,质粒作为载体必须具备标识基因等，所以所选择限制酶尽可能不要破坏这些结构，如图乙中限制酶,Sma,会破坏标识基因；假如所选酶切点不止一个，则切割重组后可能会丢失一些片段，若丢失片段含复制起点区，则切割重组后片段进入受体细胞后不能自主复制。,第26页,2,载体上标识基因标识原理,载体上标识基因普通是一些抗生素抗性基因。目标基因要转入受体细胞没有抵抗相关抗生素能力。当含有抗生素抗性基因载体进入受体细胞后，抗性基因在受体细胞内表示，使受体细胞能够抵抗对应抗生素，所以在受体细胞培养体系中加入该种抗生素就能够只保留转入载体受体细胞，原理以下列图所表示：,第27页,第28页,考点,2,基因工程操作过程与应用,1,目标基因获取,(1),目标基因：主要指,_,基因，也能够是一些具,_,作用因子。,答案：,1.(1),编码蛋白质调控,(2),基因文库,mRNA,反转录,DNA,合成仪,第29页,注意：,(1),基因组文库与部分基因文库,基因文库类型,基因组文库,部分基因文库,(cDNA,文库,),构建基因文库过程,第30页,(2)PCR,技术,原理：,DNA,复制,需要条件：模板,DNA,、引物、四种脱氧核苷酸、热稳定,DNA,聚合酶,(,Taq,酶,),过程：,DNA,受热变性解旋为单链、冷却后,RNA,引物与单链对应互补序列结合，然后在,DNA,聚合酶作用下延伸合成互补链。,第31页2,基因表示载体构建,基因工程关键,(1),目标：使目标基因,_,，同时使目标基因能够表示和发挥作用。,答案：,2,(1),在受体细胞中稳定存在，而且能够遗传给下一代,第32页,(2),基因表示载体组成,答案：,(2)RNA,聚合酶转录转录目标基因,第33页,(3),构建过程,答案：,(3),同种限制酶,DNA,连接,第34页,3,将目标基因导入受体细胞,(1),受体细胞种类不一样，导入方法不一样,生物种类,植物细胞,动物细胞,微生物细胞,惯用方法,_,_,_,受体细胞,体细胞,_,原核细胞,答案：,3,(1),农杆菌转化法显微注射法感受态细胞法受精卵,第35页,转化过程,将目标基因插入到Ti质粒TDNA上导入农杆菌侵染植物细胞整合到受体细胞染色体DNA上表示,将含有目标基因表示载体提纯取卵(受精卵)显微注射受精卵发育取得含有新性状动物,Ca2处理细胞感受态细胞重组表示载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子,第36页,(2),基因工程产物不一样、选择受体细胞类型也不相同,培育转基因植物：受体细胞能够是受精卵、体细胞,(,需经植物组织培养成为完整植株,),。,培育转基因动物：受体细胞为受精卵，若用体细胞作为受体细胞，则需经核移植技术培养成转基因动物。,生产蛋白质产品：普通选取大肠杆菌等原核生物作为受体细胞，因原核生物含有一些其它生物没有特点，如繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。,第37页,4,目标基因检测与判定,第38页,注意：,(1),目标基因插入位点不是随意，基因表示需要开启子与终止子调控，目标基因应插入开启子与终止子之间部位。,(1),基因工程操作过程中只有第三步,(,将目标基因导入受体细胞,),没有碱基互补配对现象。,(3),农杆菌转化法原理：农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物，并将其,Ti,质粒上,TDNA,转移并整合到受体细胞染色体,DNA,上。,第39页,题组精练,1,依据基因工程相关知识，回答以下问题：,(1)cDNA,文库属于,_,基因文库，其构建方法是：用某种生物发育某个时期,_,反转录产生,cDNA,片段，与,_,连接后储存在一个受体菌群中。,(2),切割,DNA,分子工具是,_,，它能使每一条链中特定部位两个核苷酸之间,_,断开，形成黏性末端或平末端。,第40页,(3),基因工程中所使用,DNA,连接酶有两类。既能够,“,缝合,”,黏性末端，又能够,“,缝合,”,平末端是,_DNA,连接酶。,(4),将目标基因导入植物细胞采取最多方法是,_,；假如受体细胞是大肠杆菌，需要用,_,处理细胞，使之成为感受态细胞，才能吸收,DNA,分子。,第41页,解析：,(1),基因文库包含基因组文库和部分基因文库如,cDNA,文库。,cDNA,文库构建方法是：用某种生物发育某个时期,mRNA,反转录产生,cDNA,片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。,(2),切割,DNA,分子工具是限制酶，它作用化学键是磷酸二酯键。限制酶切割,DNA,后形成黏性末端或平末端。,(3),基因工程中所使用,DNA,连接酶有,E,coli,DNA,连接酶和,T,4,DNA,连接酶两类，前者只可,“,缝合,”,黏性末端，后者既能够,“,缝合,”,黏性末端，又能够,“,缝合,”,平末端。,(4),将目标基因导入植物细胞采取最多方法是农杆菌转化法；假如受体细胞是大肠杆菌，需要用,Ca,2,处理细胞，使之成为感受态细胞，才能吸收,DNA,分子。,第42页,答案：,(1),部分,mRNA,载体,(2),限制性核酸内切酶磷酸二酯键,(3)T,4,(4),农杆菌转化法,Ca,2,第43页,2,(,湖北武汉,2,月调研,),如图是取得转基因抗虫棉技术流程示意图。请回答：,(1)A,B,利用技术称为,_,，其中,过程需要热稳定,_,酶才能完成。,第44页,(2),图中将目标基因导入棉花细胞需要经过,C,过程，该过程为构建,_,，其目标是使目标基因在受体细胞中稳定存在且能够遗传给下一代，并能表示。,(3),上述流程示意图中，将目标基因导入棉花细胞所采取方法是,_,法，该方法普通,_(,填,“,适宜,”,或,“,不宜,”,),用于将目标基因导入单子叶植物。,(4),从,F,G,过程利用主要技术为,_,，欲确定抗虫基因在,G,体内是否表示，在个体水平上需要做,试验。假如抗虫基因导入成功，且与某条染色体,DNA,整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交一代，预计后代中抗虫植株占,_,。,第45页,解析：,(1)A,B,是,PCR,技术中操作，,过程是,PCR,技术中延伸过程，需要耐热,DNA,聚合酶参加。,(2),过程,C,是构建基因表示载体。,(3),图中显示，将目标基因导入棉花细胞方法是农杆菌转化法，该方法不适于将目标基因导入单子叶植物，这是因为农杆菌对大多数单子叶植物没有感染力。,(4)F,G,过程是将棉花体细胞培育形成新个体，需要采取植物组织培养技术；检测抗虫基因在转基因植株体内是否表示，在个体水平上需要做抗虫接种试验；假设抗虫基因为,A,，则该杂合子基因型能够表示为,A0,，,A0,自交，后代中抗虫植株,A_,和非抗虫植株,00,分别占,3/4,、,1/4,。,第46页,答案：,(1)PCR,Taq,DNA,聚合,(2),基因表示载体,(3),农杆菌转化不宜,(4),植物组织培养抗虫接种,3/4,第47页,考点,3,基因工程应用及蛋白质工程,1,基因工程应用,(1),植物基因工程,外源基因类型及举例,结果举例,抗虫转基因植物,抗虫基因：,Bt,毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因,抗虫水稻、抗虫棉、抗虫玉米,第48页,抗病转基因植物,(1),抗病毒基因：病毒外壳蛋白基因、病毒复制酶基因；,(2),抗真菌基因：几丁质酶基因、抗毒素合成基因,抗病毒烟草、抗病毒小麦,抗逆转基因植物,抗逆基因：调整细胞渗透压基因、抗冻蛋白基因、抗除草剂基因,抗盐碱和抗干旱烟草、抗寒番茄、抗除草剂大豆和玉米,第49页,改良品质转基因植物,优良性状基因：必需氨基酸含量多蛋白质编码基因、控制番茄成熟基因、与植物花青素代谢相关基因,高赖氨酸玉米、耐储存番茄、新花色矮牵牛,第50页,(2),动物基因工程,外源基因类型及举例,结果举例,提升生长速度转基因动物,外源生长激素基因,转基因鲤鱼,改进畜产品品质转基因动物,肠乳糖酶基因,乳汁中含乳糖较少转基因牛,生产药品转基因动物,药用蛋白基因乳腺蛋白基因开启子,转基因动物含有乳腺生物反应器,第51页,作器官移植供体转基因动物,外源抑制抗原决定基因表示调整因子或除去供体抗原决定基因,无免疫排斥反应转基因猪,第52页,(3),基因治疗与基因诊疗,基因治疗,基因诊疗,原理,基因重组及基因表示,DNA,分子杂交,方法,将正常基因导入病人体内，使该基因表示产物发挥功效，以抵达治疗疾病目标,制作特定,DNA,探针与病人样品,DNA,混合分析杂交带情况，判断患者是否出现了基因异常或携带病原体,进展,临床试验,临床应用,第53页,注意：,(1),用基因工程方法，使外源基因得到高效表示菌类细胞株系普通称为,“,工程菌,”,，如含有抗虫基因土壤农杆菌菌株。而青霉素是诱变后高产青霉菌产生，不是经过基因工程改造工程菌产生。,(2),用基因工程生产药品，从化学成份上分析都应该是蛋白质类。,(3),动物基因工程实施主要是为了改进畜产品品质，不是为了产生体型巨大个体。,(4),并非全部个体都可作为乳腺生物反应器，制备乳腺生物反应器通常是针对雌性个体进行操作。,第54页,2,蛋白质工程,(1),缘由：基因工程标准上只能产生,_,蛋白质。,(2),基础：蛋白质分子结构规律及其与生物功效关系。,(3),伎俩：基因修饰或基因合成。,(4),目标：合成满足人类生产和生活需求蛋白质。,(5),流程：,第55页,(6),蛋白质工程中经过对基因操作来实现对天然蛋白质改造原因：,改造后基因能够遗传给下一代，被改造蛋白质无法遗传。,对基因进行改造比对蛋白质进行直接改造要轻易操作，难度要小得多。,第56页,3,蛋白质工程与基因工程比较,项目,蛋白质工程,基因工程,区,别,过程,预期蛋白质功效设计蛋白质结构推测氨基酸序列推测脱氧核苷酸序列合成DNA表示出蛋白质,目标基因获取基因表示载体构建将目标基因导入受体细胞目标基因检测与判定,第57页,区,别,实质,定向改造或生产人类所需蛋白质,定向改造生物遗传特征，以取得人类所需生物类型或生物产品(基因异体表示),结果,生产自然界中没有蛋白质,生产自然界中已经有蛋白质,第58页,联络,蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来第二代基因工程，因为对现有蛋白质改造或制造新蛋白质，必须经过基因修饰或基因合成实现答案：,2.(1),自然界已存在,第59页,题组精练,1,干扰素是动物体内合成一个蛋白质，能够用于治疗病毒感染和癌症，但体外保留相当困难，假如将其分子上一个半胱氨酸转变成丝氨酸，就可在,70,条件下保留六个月，请依据以上信息回答以下问题：,(1),蛋白质合成是受基因控制，所以取得能够控制合成“能够保留干扰素”基因是生产关键，依据蛋白质工程原理，设计试验流程，让动物生产“能够保留干扰素”。写出以下方框中对应试验步骤。,第60页,A,_,；,B._,；,C,_,；,D._,。,(2),基因工程与蛋白质工程相比较，基因工程在标准上只能生产蛋白质，不一定符合,_,需要。而蛋白质工程是以蛋白质分子结构规律及其与生物功效关系作为基础，经过,_,或,_,，对现有蛋白质进行,_,，或制造一个新蛋白质，以满足人类生产和生活需要。,第61页,(3),蛋白质工程实施难度很大，原因是蛋白质含有十分复杂,_,结构。,(4),对天然蛋白质进行改造时，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是应该经过对基因操作来实现？,_,，,原因是,_,。,第62页,解析：,本题综合考查了蛋白质工程与基因工程异同，并考查了蛋白质工程原理及其在生产实践中应用。蛋白质工程是研究蛋白质结构和功效、蛋白质折叠、蛋白质分子设计等一系列分子生物学问题一个新型、强有力伎俩。经过对蛋白质工程研究，能够深入地揭示生命现象本质和生命活动规律。基因工程遵照中心法则，从,DNA,mRNA,蛋白质，基本上是生产出自然界已经有蛋白质。蛋白质工程则是按摄影反思绪进行，其基本流程是预期蛋白质功效,设计蛋白质三维结构,推测应有氨基酸序列,合成对应脱氧核苷酸序列,创造出需要蛋白质。,第63页,答案：,(1),预期蛋白质功效蛋白质三维结构应有氨基酸序列对应脱氧核苷酸序列,(,基因,),(2),自然界已存在人类生产和生活基因修饰基因合成改造,(3),空间,(,或高级,),(4),应该经过对基因操作来实现对天然蛋白质改造首先，任何一个天然蛋白质都是由基因编码，改造了基因也就是对蛋白质进行了改造，而且改造过蛋白质能够经过改造过基因遗传下去；假如对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过蛋白质分子也无法遗传。其次，对基因进行改造比直接对蛋白质进行改造要轻易操作，难度要小得多,第64页,2,已知生物体内有一个蛋白质,(P),，该蛋白质是一个转运蛋白，由,305,个氨基酸组成。假如将,P,分子中,158,位丝氨酸变成亮氨酸，,240,位谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后蛋白质,(P,1,),不但保留,P,功效，而且含有了酶催化活性。回答以下问题：,(1),从上述资料可知，若要改变蛋白质功效，能够考虑对蛋白质,_,进行改造。,(2),以,P,基因序列为基础，取得,P,1,基因路径有修饰,_,基因或合成基因。所取得基因表示时是遵照中心法则，中心法则全部内容包含,_,复制，以及遗传信息在不一样分子之间流动，即：,_,。,第65页,(3),蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本路径是从预期蛋白质功效出发，经过,_,和,_,，进而确定相对应脱氧核苷酸序列，据此取得基因，再经表示、纯化取得蛋白质，之后还需要对蛋白质生物,_,进行判定。,第66页,解析：,(1),从题中所述资料可知，将,P,分子中,158,位丝氨酸变成亮氨酸，,240,位谷氨酰胺变成苯丙氨酸后，该蛋白质功效发生了改变，此过程是经过对组成蛋白质氨基酸排列次序进行改造，进而改变了蛋白质结构，从而改变了蛋白质功效。,(2),在蛋白质工程中，目标基因能够以,P,基因序列为基础，对生物体内原有,P,基因进行修饰，也能够经过人工合成法合成新,P,1,基因。,中心法则内容以下列图所表示：,第67页,由图可知，中心法则全部内容包含：,DNA,以本身为模板进行复制，,DNA,经过转录将遗传信息传递给,RNA,，最终,RNA,经过翻译将遗传信息表示成蛋白质；在一些病毒中,RNA,可自我复制,(,如烟草花叶病毒等,),，在一些病毒中能以,RNA,为模板逆转录合成,DNA(,如,HIV),，这是对中心法则补充。,(3),蛋白质工程基本路径是预期蛋白质功效,设计预期蛋白质结构,推测应有氨基酸序列,合成,DNA,表示出蛋白质，经过该过程得到蛋白质，需要对其生物功效进行判定，以确保其发挥正常作用。,第68页,答案：,(1),氨基酸序列,(,或结构,),(2)P,P,1,DNA,和,RNA(,或遗传物质,),DNA,RNA,、,RNA,DNA,、,RNA,蛋白质,(,或转录、逆转录、翻译,),(3),设计蛋白质结构推测氨基酸序列功效,第69页,课堂归纳,第70页,易错清零,易错点,1,混同开启子与起始密码子，终止子与终止密码子，不明确标识基因作用,提醒,开启子,起始密码子，终止子,终止密码子,(1),开启子：一段有特殊结构,DNA,片段，位于基因首端。它是,RNA,聚合酶识别、结合部位。,(2),终止子：一段有特殊结构,DNA,片段，位于基因尾端。作用是使转录过程停顿。,第71页,(3),起始密码子和终止密码子位于,mRNA,上，分别控制翻译过程开启和终止。,(4),标识基因：普通为抗生素抗性基因或荧光基因等，其作用是判别受体细胞中是否含有目标基因,(,目标基因是否导入成功,),，从而将含目标基因细胞筛选出来。,第72页,易错点,2,误认为切取目标基因与切取载体时,“,只能,”,使用,“,同一个酶,”,提醒,(1),在获取目标基因和切割载体时通惯用同种限制酶，以取得相同黏性末端。但假如用两种不一样限制酶切割后形成黏性末端相同时，在,DNA,连接酶作用下目标基因与载体也能够连接起来。,(2),为了预防载体或目标基因黏性末端自己连接即所谓,“,环化,”,，可用不一样限制酶分别处理目标基因和载体，使目标基因两侧及载体上含有两个不一样黏性末端。,第73页,