新版药典微生物学.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,2010,年版,中国药典,分为三部出版,生物制品,化学药,中药,各部内容主要包括凡例、标准正文和附录三部分，其中附录由制剂通则、通用检测方法、指导原则及索引等内容构成。,药典二部收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品以及药用辅料等。,药典三部收载生物制品。,本版药典具有以下几个特点,一是新增与淘汰并举，收载品种有较大幅度的增加；,二是药品检测项目和检测方法增加，标准提高；,三是中药标准有突破和创新；,四是新版药典在凡例、品种的标准要求、附录的制剂通则等方面均有较大的变化和进步；,五是力求覆盖国家基本药物目录品种和社会医疗保险报销药品目录品种。,二、增修订内容,(,一,),结果报告 特殊品种可以最小包装单位报告,特殊品种包括,1.,药典规定微量包装药品的检验量可以酌减,2.,一些贵重药品也应考虑检验量,（二）检验量增修订内容,1.,中药膜剂检验量,50 cm2,修改为,100cm2,。,2.,沙门菌检验量修改为检验量为,20 g,或,20ml,并注明（其中,10 g,用于阳性对照）。,（三）供试液的制备增修订内容,1.,供试品检查时使用表面活性剂应证明其对微生物生长和存活无影响修改为无毒性。,2.,供试液的制备若需加温时，可采用其他经验证的方法，但应均匀加热，且温度不应超过,45,。,3.,新增贴剂供试液制备,经验证方法制备成供试液在无菌环境进行。,避免粘贴面粘合在一起。,置于含有表面活性剂（如聚山梨酯,80,或卵磷脂）的稀释剂中，制成供试液。,充分振摇。,也可采用以其他适宜的方法制备成供试液。,（四）具抑菌活性的供试品增修订内容,删除应消除供试液的抑菌活性修改为当供试品具有抑菌活性时，应尽量选择操作简便、快速的方法，应避免损伤供试品中污染的微生物。在供试品溶液性状允许的情况下，应尽量选用薄膜过滤法。,细菌、霉菌及酵母菌计数增修订内容,新增 计数培养基的适用性检查,菌种,大肠埃希菌（,Escherichia coli,）,CMCC,（,B,）,44102,金黄色葡萄球菌（,Staphylococcus aureus,）,CMCC,（,B,）,26 003,枯草芽孢杆菌（,Bacillus subtilis,）,CMCC,（,B,）,63 501,白色念珠菌（,Candida albicans,）,CMCC,（,F,）,98 001,黑曲霉（,Aspergillus niger,）,CMCC,（,F,）,98 003,增加了菌悬液的制备及保存条件,菌悬液制备后在室温下放置应在,2,小时内使用，若保存在,2,8,可以在,24,小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在,2,8,，在验证过的贮存期内使用，每株试验菌平行制备,2,个平皿，混匀，凝固，按规定条件培养计数，同时用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。,增加了对照培养,（五）供试品检查增修订内容,1.,平皿法,删去采用平皿法进行菌数测定时，连续,2,3,个稀释级的供试液。修改为按计数方法的验证试验确认的程序 进行供试液制备。,2.,培养时间修改内容,除另有规定外，细菌培养,48,小时改为,3,天，霉菌、酵母菌培养,72,小时改为,5,天，必要时，可适当延长培养时间至,7,天进行菌落计数并报告。,3.,菌数报告规则增修订内容,(1).,若同稀释级两个平板的菌落平均数不小于,15,，则两个平板的菌落数不能相差,1,倍或以上。,(2).,细菌、酵母菌和霉菌平均菌落数在,30,300,、,30,100,之间的稀释级修改为选取菌落数小于,300cfu,和,100cfu,的稀释级作为菌数报告的依据。,4.,薄膜过滤法增修订内容,(1).,新增内容 采用其它直径的滤膜，冲洗量应相应的进行调整（如使用膜直径增大冲洗液量也应相应增加，可保证冲洗液覆盖整个滤膜）。,(2).,删去每片滤膜的总过滤量不宜过大，修改为总冲洗量不得超过,1000ml,。,5.,控制菌检查法增修订内容,(1).,疑似致病菌的确证,微生物控制菌检查中没有规定进一步确证疑似致病菌的方法。选择已被认可的菌种鉴定方法。如,伯杰氏细菌鉴定手,。,(2).,控制菌检查方法验证删去阴性菌对照组。,(3).,大肠菌群检查用胆盐乳糖培养基 改为乳糖胆盐。,(4).,改梭菌检查用庖肉培养基为梭菌增 菌培养基。,(5).,改梭菌培养时间,72,96,小时为,48,小时。,(6).,增加了白色念珠菌检验方法增菌培养 沙氏葡萄糖肉汤培养基。,典型菌落,沙氏葡萄糖琼脂培养基,菌落呈乳白色偶见淡黄色，表面光滑有浓酵母气味，时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。,念珠菌显色培养基,菌落呈绿色或翠绿色菌落生长。,三、新增微生物限度检查法指导原则,（一）抑菌剂效力检查法指导原则,目的,一是为测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的活性，以评价最终产品的抑菌效力及生产企业在制剂研发阶段抑菌剂的确定提供指导。,二是为防止药品由于微生物污染而引起变质，对服用者造成不良反应，在药品生产过程中加入一定剂量的抑菌剂。,三是抑菌剂不能用于替代药品生产的,GMP,管理，不能作为非灭菌制剂降低微生物污染的唯一途径，也不能作为控制多剂量包装制剂灭菌前的生物负载的手段。,使用范围及原则,使用范围,如果药物本身不具有充分的抗菌活性，应根据制剂特性添加适宜的抑菌剂，以防止制剂在正常贮藏和使用过程中可能发生的微生物污染和繁殖，对患者造成伤害。,使用原则,所有抑菌剂都具有一定的毒性，添加抑菌剂时应注意以下原则,:,抑菌剂的用量应为最低有效量。,具有抗菌活性的制剂应确认其抗菌效力。,应验证最终容器中的抑菌剂效力在效期内不因贮藏条件而降低。,本试验方法和抑菌剂抑菌效力判断标准用于包装未启开的成品制剂,。,抑菌剂抑菌效力的测定,供试品的分类,分为四类，但对于一些抗酸性制剂和含活生物制剂应考虑会降低有益菌的生物活性。,产品分类 药品,1,类 注射剂、其他非肠道制剂，包 括乳剂、耳用制剂、无菌鼻用制剂及眼用制剂。,2,类 局部给药制剂、非灭菌鼻用制剂及用于黏膜的乳剂。,3,类 口服非固体制剂（非抗酸制剂）。,4,类 非固体抗酸制剂。,（二）药品微生物检验替代方法验证指导原则,目的,是为所采用的试验方法能否替代药典规定的方法用于药品微生物的检验提供指导。,在控制药品微生物质量中，需要采用替代方法 时，应进行方法的验证，确认其应用效果优于或等同于药典的方法。,微生物检验的类型及验证参数,药品微生物检验方法主要分两种类型,定性试验 定量试验,生物试验的特殊性,抽样误差 操作误差 稀释误差 培养误差,计量误差 计数误差,（三）药品微生物限度检查法应用指导原则,目的,为更好的应用微生物限度检查法及限度标准的合理执行提供指导。,用途,用于判断非规定灭菌制剂及原料、辅料是否符合药典的规定，也可用于指导制剂、原料、辅料的微生物质量标准的制定，及指导生产过程中间产品微生物质量的监控。,（四）药品微生物实验室规范指导原则,目的,该指导原则用于指导药品微生物检验实验室的质量控制。,药品微生物的检验的对象具特殊性；,活的生物、分布不均匀、重现性差必须使用经验证的检测方法并严格按照药品微生物实验室规范要求进行试验。,药品微生物实验室规范包括以下几个方面,人员、培养基、菌种、实验室的布局和运行、设备、文件、实验记录、结果的判断等。,谢 谢,