中国药典与美英药典微生物限度比较.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,中国药典与美英药典微生物限度检查法的比较,苏德模,1.收载的检查项目,CP,BP,USP,需气菌,+,+,+,真菌,+,+,+,大肠埃希菌,+,+,+,沙门菌,+,+,+,铜绿色假单胞菌,+,+,+,金黄色葡萄球菌,+,+,+,梭菌,+,+,大肠菌群,+,+,+,肠杆菌科及其他某些革兰阴性杆菌,+,肠道菌、肠杆菌科,支原体,+,分枝杆菌,+,病毒的其他因子,+,活螨,+,2.检验量,CP,取10,g,或10,ml,供试品,BP、USP 10g,或10,ml,供试品数份,CP,BP,USP,一般制剂,0.9%的氯化钠溶液,pH7.0,无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液,乳糖肉汤,pH7.0,氯化钠-蛋白胨缓冲液,其他合适培养基,pH7.2,磷酸盐缓冲液,大豆酪蛋白消化培养基,乳糖液体培养基,非水溶性的制剂（膏剂、油剂）,司盘80、单硬脂酸甘油酯、,吐温-80,十四烷酸异丙酯,5克吐温-20或吐温-80,十四烷酸异丙酯,吐温-20,其他助溶剂,其他,不溶于水的膜剂,肠溶胶囊制备,供试液最终,pH,调至7.0,气雾剂制备法,样品加稀释剂至培养基时间不超过1,hr,3.供试液制备,4.制剂抑菌作用的确定（阳性对照试验）,*0.4%,l,卵磷脂，4.0%吐温,CP,BP,USP,控制菌阳性菌加量,1010,2,个,10,2,个,10,5,10,6,个,需气菌及真菌计数,50100,回收率大小于70%判断是否有抑菌作用,25200个金葡、白念、枯草、大肠菌在有无制剂存在下生长的稀释级差别大小判断是否有抑菌作用,根据控制菌阳性菌生长的结果判断,抑菌作用处理方法,中和法,+,+,+,*,稀释法,+,+,+,薄膜过滤法,+,+,+,离心沉淀法,+,5.需气菌和真菌计数,CP,BP,USP,方法,平皿法,+,+（浇碟、涂抹）,+,试管法,+,+,薄膜过滤法,+,+,培养基,营养琼脂,大豆酪蛋白消化琼脂,大豆酪蛋白消化琼脂,玫瑰红钠琼脂,含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂,沙氏葡萄糖琼脂,5.需气菌和真菌计数(续),稀释级的选择,3个连续稀释级,1个,2个,培养温度,30352328,30352025,30352025,培养时间（天）,需气菌,2(57),5,23,真菌,3(57),5,57,计数结果,需气菌,真菌,一般30300,30100,不生长按10个/1,g,或,ml,报告,300,100,30300,不生长按,10个/1,g,或,ml,报告,结果报告,1,g,或,ml,1g或ml,1g或ml,6.大肠埃希菌,CP,BP,USP,方法,MI,法,I,法,IMViC,法,检验量（,g,或,ml）,1,1,10,稀释剂,09%氯化钠溶液,pH7.0,氯化钠-蛋白胨缓冲液,乳糖液体培养基,预增菌,大豆酪胨肉汤35371848,h,增菌,BL,增菌培养基,35371824,h,M-I,35375、24h,Mac,肉,汤43451824,h,乳糖液体培养基,35372448,h,分离,Mac.,琼脂平板,35371872,h,Mac、EMB,琼脂平板,35372448,h,生化试验,MI,及,IMViC,+,+,7.大肠菌群,CP,BP,USP,检验量（,g,或,ml）,1,1,稀释剂,pH7.0,无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液,乳糖肉汤,预增菌,353725,h,增菌,0.1,g,0.01g0.001g BL,培养基,35371824,h,0.1,g,0.01g,0.001g,乳糖肉汤培养基,35372448,h,分离,EMB,或,Mac.C,琼脂平板,3537 1824,h,VRB.,琼脂平板,3537 1824,h,生化试验,+,-,8.铜绿假单胞菌,CP,BP,USP,检验量,1,（,g,或,ml）,1,（,g,或,ml）,10,（,g,或,ml）,稀释剂,09%氯化钠溶液,pH7.2,磷酸盐缓冲液,pH7.0,氯化钠-蛋白胨缓冲液,大豆酪蛋白消化培养基,增菌,胆盐乳糖增菌培养基,35371824,h,大豆酪蛋白消化培养基,35371848,h,大豆酪蛋白消化培养基,35372448,h,分离,溴化十六烷基三甲铵琼脂平板,35371824,h,Cetrimide,琼脂，培养1872,h,大豆酪蛋白消化培养基,4143 18,48,h。,薄膜过滤,大豆酪蛋白消化培养基1848,h，,Cetrimide,琼脂平板,Cetrimide,琼脂353772,h,生化试验,5种,1种（42,1,）,3种,9.金黄色葡萄球菌,CP,BP,USP,检验量,1,（,g,或,ml）,1,（,g,或,ml）,10,（,g,或,ml）,稀释剂,09%氯化钠溶液,pH7.0,氯化钠-蛋白胨缓冲液,pH7.0,氯化钠-蛋白胨缓冲液,大豆酪蛋白消化培养基,增菌,营养肉汤（或含亚碲酸甲）培养基,35371824,h,大豆酪蛋白消化培养基,35371848,h h,大豆酪蛋白消化培养基,35372448,h,分离,甘露醇氯化钠琼脂平板、卵黄氯化钠琼脂平板,35372448,h,BP,琼脂平板,35371872,h,VJ(,甘露醇氯化锂)琼脂、,MS(,甘露醇氯化钠)琼脂、,BP,琼脂平板,35372448,h,凝固酶试验,+,凝固酶、,DNA,酶,+,10.沙门菌,CP,BP,USP,检验量,1,（,g,或,ml）,10,（,g,或,ml）,10,（,g,或,ml）,稀释剂,09%氯化钠溶液、,pH7.0,氯化钠蛋白胨缓冲液,pH7.0,氯化钠蛋白胨缓冲液,乳糖液体培养基,增菌,营养肉汤培养基,35371824,h,大豆酪胨肉汤,35371824,h,乳糖液体培养基,3537培养,二次增菌,TTB,培养基,35371824,h,四硫酸盐肉汤培养基,41431824,h,SC、TTB,液体培养基,3537,1224,h,分离,EMB、Mac.C、DHL、SS,琼脂平板,35371824,h,DC、XLD、BG.,琼脂平板,35371872,h,BG、XLD、BS,琼脂平板,35372448,h,生化试验,+,+,+,11梭菌,CP,BP,USP,检验量（,g,或,ml）,1,10,10,稀释剂,09%无菌氯化钠溶液,pH7.0,无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液,乳糖肉汤,加热处理,1份8010,min,另1份不加热,1份8010,min,另1份不加热,增菌,100,ml 0.1%,葡萄糖,庖肉培养基,35377296,h,100,ml,梭菌增菌培养基,3537厌氧48,h,分离,含庆大霉素哥伦比亚琼脂平板,35374872,h,含和不含庆大霉素哥伦比亚琼脂平板,353748,h,过氧化氢酶试验,+,+,12.结果判断及复试,CP,BP,USP,控制菌,一次检出为准,一次检出为准,不符合标准规定，取大于25,g,的样品复试,需气菌和真菌,第一次试验结果超过规定的标准，重新抽样复试两次，三次结果平均值报告,测定结果在规定的限度标准5倍以内均为合格,同上,微生物限度标准,1.收载方式,CP,BP,USP,各论项下,+,+,+,制剂通则,+,+,专论,+,+,+,2.制剂通则中规定微生物限度的剂型,CP,BP,USP,注射液,1,、植入剂,1,、,酊剂、栓剂、软乳糊剂,2,、眼用剂,2,、糖浆、气粉喷雾,2,膜、口服液混悬乳剂、散剂,2,、滴耳,2,、滴鼻、洗冲灌肠剂,2,、搽涂摸剂、凝胶剂、贴剂,无微生物限度：片、胶囊、丸、颗粒,中药,除膏药、橡胶膏剂、巴布膏剂外药典均有规定,胶囊剂、口胶剂、颗粒剂、,搽剂、泡腾剂,1,、灌洗剂,1,、,滴鼻剂,2,、口服液、口服散剂、注射液,1,、直肠制剂、棒剂,1,、片剂、药用棉条、局部用散剂,2,、局部用半固体制剂,2,、透皮贴剂、阴道制剂、眼科制剂,1,、耳科制剂,2,43个品种（38个原料、5个制剂）,注射剂、眼膏剂,263个品种（原料96个、制剂167个）,1.要求无菌；2.无菌和微生物限度标准均有要求。,谢 谢!,